Hands Free 3.c Technique - Step by Step Maximizes the Duration of Sublingual Microcirculatory Image - A Prognosis to Monitor Microcirculation in Patients with Covid-19 and Sepsis

ABSTRACT: The sublingual area is the most used site to assess microcirculation in critically ill patients at bedside. The prerequisite for microcirculation evaluation, using HVM imaging (Handheld Vital Microscopy), is to ensure measurements free of image artifacts, confirming an adequate analysis of blood flow. However, this would only be possible with standardizati on in the process of image capture. Currently, with the Hands On technique, the recommended capture time is 4 to 20 seconds, which is already considered laborious. In this study, the Hands Free 3.C technique proposes an alternative that maximizes the image period of sublingual microcirculation (as suggested by the Second Consensus) for more than 12 minutes, and thus opening the way for future research aiming at therapeutic maneuvers in critically ill patients such as COVID -19 and sepsis.

RESUMEN: El área sublingual es el sitio más utilizado para evaluar la microcirculación junto a la cama en pacientes críticamente enfermos. El requisito previo para la evaluación de la microcirculación, utilizando imágenes HVM (Microscopía Vital Portátil), es asegurar mediciones libres de artefactos de imagen, confirmando un análisis adecuado del flujo sanguíneo. Sin embargo, esto solo sería posible con la estandarización en el proceso de captura de imágenes. Actualmente, con la técnica Hands On, el tiempo de captura recomendado es de 4 a 20 segundos, lo que ya se considera laborioso. En este estudio, la técnica Hands Free 3.C propone una alternativa que maximiza el período de imagen de la microcirculación sublingual (como sugiere el Segundo Consenso) durante más de 12 minutos, y abre así el camino a futuras investigaciones encaminadas a maniobras terapéuticas en pacientes con enfermedades graves como COVID -19 y sepsis.

Hands Free Technique: New Tool Possibility for Image Capture of Sublingual Microcirculation with Handheld Vital Microscopy - HVM

ABSTRACT: New microcirculatory imaging techniques allowed direct observation of microcirculation at the bedside. This study presents a new device that assists the operator with the unprecedented Hands Free technique. To this end, a replica of Handheld Vital Microscopy was developed to simulate the method of capturing the image in the sublingual area, the most used site to assess microcirculation in critically ill patients. We achieved a reduction in the displacement of micros cope replica with a Hands Free method. The immediate consequence is an increase in the stability of HVM replica by 75 times, or more, over the current 4 seconds, during its contact with the sublingual tissue. The device also offers better control of th e pressure of the tip of the HVM replica over the sublingual area. The results demonstrated that the Hands Free technique, operating in the same sublingual area for 900 seconds, should allow for future research aimed at therapeutic maneuvers in patients with serious illnesses.

RESUMEN: Las nuevas técnicas de imagen microcirculatoria permitieron la observación directa de la microcirculación junto a la cama del paciente. Este estudio sin precedentes presenta un nuevo dispositivo que ayuda al operador con la técnica manos libres. Con este fin, se desarrolló una réplica de la Microscopía Vital Portátil para simular el método de captura de la imagen en el área sublingual, el sitio más utilizado para evaluar la microcirculación en pacientes críticos. Logramos una reducción en el desplazamiento de la réplica del microscopio con el método de manos libres. La consecuencia inmediata es un aumento en la estabilidad de la réplica de HVM en 75 veces, o más, durante los 4 segundos actuales, durante su contacto con el tejido sublingual. El dispositivo también ofrece un mejor control de la presión de la punta de la réplica de HVM sobre el área sublingual. Los resultados demostraron que la técnica de manos libres, que opera en la misma área sublingual durante 900 segundos, debería permitir futuras investigaciones destinadas a maniobras terapéuticas en pacientes con enfermedades graves.

Activación de la célula T, alteraciones en el lupus eritematoso sistémico, una revisión narrativa / T-cell activation, alterations in systemic lupus erythematosus: A narrative review

Resumen La activación de los linfocitos T se inicia a través de la presentación de antígenos endógenos o exógenos por células presentadoras de antígenos a través del complejo mayor de histocompatibilidad, el cual se une a un receptor especializado presente en los linfocitos T. Este reconocimiento desencadena una cascada de señalización intracelular que conlleva a un aumento en la expresión de integrinas, modificaciones del citoesqueleto y producción de factores de transcripción involucrados en la liberación de citocinas y mediadores inflamatorios. Uno de los inductores más importantes en la activación celular es el complejo enzimático con acción tirosina cinasa. Las cinasas que pertenecen a la familia SRC (SFK), FYN y LCK están involucradas en un gran número de procesos importantes en la activación, modulación de la respuesta linfocitaria y el desarrollo de enfermedades autoinmunes. La regulación de la señalización de las cinasas, así como de proteínas adaptadoras involucradas en la activación del linfocito T, son fundamentales para mantener el umbral de activación y modulación de la respuesta del linfocito. La fosforilación de sitios de regulación positiva de estas proteínas es importante para permitir una configuración activa de la proteína y de esta forma su máxima capacidad como cinasa. La fosforilación de los sitios de regulación negativa conlleva a una configuración cerrada de la proteína de tal forma que reduce su función de cinasa e inhibe su función. Las alteraciones en la señalización por modificación de algunas proteínas citoplasmáticas se asocian en algunos casos al desarrollo de enfermedades autoinmunes, como el lupus eritematoso sistémico. En condiciones fisiológicas, el complejo receptor de linfocitos T se reagrupa con complejos proteicos que interactúan armónicamente para generar una sen al interna. Los eventos de señalización alterados son en parte los responsables de una expresión anómala de citocinas, entre ellas la interleucina-6 (IL-6), IL-10, IL-2, IFN y CD40 ligando; estas modificaciones alteran la capacidad de los linfocitos T para sobre estimular a los linfocitos B, traduciéndose en un aumento en la producción de autoanticuerpos y en el desencadenamiento de la enfermedad autoinmune.

Abstract The activation of T cells is initiated by the presentation of exogenous or endogenous antigens, by antigen presenting cells through the major histocompatibility complex, which binds to a special receptor on T cells. This acknowledgement triggers a cascade of intracellular signalling that leads to an increase in integrin expression, cytoskeletal modifications, and transcription factors production involved in the liberation of cytokines and inflammatory mediators. One of the most important inducers in cell activation is the enzymatic complex with tyrosine kinase action. The kinases which belong to the SRC (SFK) LCK and FYN family have been involved in a large number of important processes in the activation and modulation of the T cells response, as well as in the development of autoimmune diseases. Regulating the kinases signalling, as well as the adapter proteins involved in T cell activation, is essential for maintaining an activation threshold, as well as the modulation of cell response. The phosphorylation of the positive regulation sites of these proteins is important to allow an active configuration of the protein and thereby its maximum capacity as kinase. The phosphorylation of negative regulation sites leads to a closed configuration of the protein that reduces its kinase function, and thereby inhibits its own function. The alteration in signalling by the modification of certain cytoplasmic proteins in some cases is associated with the development of autoimmune diseases, such as systemic lupus erythematosus. Under physiological conditions the T cell receptor complex regroups with protein complexes that interact harmonically to generate an internal signal. The altered signalling events are partly responsible for an anomalous expression of cytokines, including the interleukin-6 (IL-6), IL-10, IL-2, IFN, and CD40 linking, these modifications affects the cells ability to over-stimulate T and B cells, resulting in an increased production of autoantibodies and the triggering of the autoimmune disease.

Endoimplante con lima NiTi: solución novedosa para una complicación radicular antigua

El trauma dental es un problema común en la consulta diaria que no siempre se maneja de forma adecuada. En este artículo se presenta el caso de una paciente que a temprana edad recibió un golpe que afectó el desarrollo radicular de la pieza 1.1. Con el tiempo salió a relucir una serie de complicaciones como: necrosis pulpar, pigmentación coronal, presencia de gran lesión perialpical y aparición recurrente de fístula, lo que le llevó a realizarse una serie de tratamientos que a la larga fracasaron hasta que 37 años despúes, mediante los avances de la tecnología, se logró resolver el caso realizando una cirugía apical con colocación de un endoimplante con lima de níquel titanio (NiTi). Este caso clínico demuestra que con el paso del tiempo, el afán de la paciente por mantener su pieza dental en boca y la aparición de nuevos materiales y técnicas, hoy en día, se pueden llegar a resolver casos sumamente complejos que normalmente estarían destinados a la exodoncia.

The dental trauma is a common problem in daily practice not always handled properly. This article describes the case of a patient who received an early knock that affected radicular development of tooth 1.1. Eventually a number of complications appeared such pulp necrosis, coronal pigmentation, presence of large perialpical lesion and recurrent appearance of fistula, which led the patient to realized a series of treatments that eventually failed until 37 years later, through advances in technology, it was possible to solve the case by making an apical surgery with placement of an endoimplant with a nickel titanium (NiTi) file. This case shows that with the passage of time, the desire of the patient to keep teeth in her mouth and the appearance of new materials and techniques, nowadays, highly complex cases that would normally be destined for extraction can be solve.

Psicofarmacología del suicidio II parte: Estabilizadores del ánimo y suicidio / Mood stabilizers and suicide: Part II

Lithium and anticonvulsants have been widely used as mood stabilizers (MS) in bipolar affective disorder (BAD), showing a reduction of suicide risk, even more, the anti-suicidal effect of lithium would be independent of its stabilizer property. The action mechanisms of the drug are not completely known and clinical research is hampered due to the heterogeneity of the studied samples, however, some mechanisms related to neurotransmitters metabolism and neurotrophic and neuroprotective factors have been proposed in order to explain its effect. Despite the current decline in the use of lithium as a MS it remains as the anti-suicidal drug of choice in bipolar patients.

El litio y los anticonvulsivantes han sido ampliamente empleados como estabilizadores del ánimo (EA) en el trastorno afectivo bipolar (TAB), demostrando además una reducción del riesgo de suicidio. En el caso particular del litio, dicho efecto sería independiente de su acción estabilizadora. Si bien los mecanismos de acción de la droga no son completamente conocidos y la investigación clínica se ve dificultada debido a la heterogeneidad de las muestras estudiadas, se han propuesto distintas vías que explicarían su efecto, relacionadas con el metabolismo de los neurotransmisores y con factores neurotróficos y neuroprotectores. Pese a la disminución actual en el uso del litio como EA, continúa siendo el fármaco antisuicida de elección en pacientes bipolares.

Factors affecting the production and regeneration of protoplasts from Colletotrichum lindemuthianum / Fatores que afetam a produção e regeneração de protoplastos de Colletotrichum lindemuthianum

The present work reports factors affecting the production and regeneration of protoplasts from Colletotrichum lindemuthianum. The usefulness of protoplast isolation is relevant for many different applications and has been principally used in procedures involving genetic manipulation. Osmotic stabilizers, lytic enzymes, incubation time and mycelial age were evaluated in terms of their effects on protoplast yield. The optimal condition for protoplast production included the incubation of young mycelia (48 h) in 0.6 mol l-1 NaCl as the osmotic stabilizer, with 30 mg ml-1 Lysing Enzymes from Trichoderma harzianum for 3 h of incubation. In these conditions protoplasts production was higher than 10(6) protoplatos ml-1 in the digestion mixture, number suitable enough for experiments of transformation in fungi. Sucrose concentrations of 1.2 mol l-1 and 1 mol l-1 were the most suitable osmotic stabilizers for the regeneration after 48 h, with rates of 16.35 percent and 14.54 percent, respectively. This study produced an efficient method for protoplast production and reverted them into a typical mycelial morphology using a Colletotrichum lindemuthianum LV115 isolate.

O presente trabalho apresenta os fatores que afetam a produção e regeneração de protoplastos de Colletotrichum lindemuthianum. O isolamento de protoplastos é muito relevante para diferentes aplicações, principalmente, em procedimentos que envolvem a manipulação genética. Estabilizadores osmóticos, enzimas líticas, tempo de incubação e idade micelial foram testados com relação ao efeito na liberação de protoplastos. As condições otimizadas para produção de protoplastos foram incubação de micélio jovem (48 h) em estabilizador osmótico NaCl 0.6 mol l-1, acrescido de 30 mg ml-1 da enzima Lysing Enzymes de Trichoderma harzianum incubado, durante 3 h. Nessas condições, a obtenção de protoplastos foi maior que 10(6) protoplatos ml-1 na mistura de digestão, número suficientemente adequado para experimentos de transformação em fungos. Sacarose nas concentrações de 1.2 mol l-1 e 1 mol l-1 foram os estabilizadores mais apropriados para a regeneração, após 48 h, sendo as taxas de regeneração de 16.35 por cento e 14.54 por cento, respectivamente. Este estudo produziu um método eficiente para produção e reversão de protoplastos à morfologia micelial típica de Colletotrichum lindemuthianum utilizando o isolado LV115.

Obtenção de protoplastos do fungo filamentoso Aspergillus ochraceus / Production of protoplasts from the filamentous fungus Aspergillus ochraceus

A obtenção de protoplastos é uma ferramenta importante para a transformação genética de fungos. Neste trabalho foi estudada a influência de fatores como idade micelial, tipo e concentração de enzimas e estabilizadores osmóticos na produção de protoplastos de Aspergillus ochraceus. Os melhores resultados de produção de protoplastos foram obtidos utilizando-se NH4Cl 0,8mol L-1 como estabilizador osmótico, micélio com 24h de crescimento e a combinação de Lysing Enzymes e Meicelase ambas, a 20mg mL-1. Entretanto, bons resultados foram também obtidos com a utilização apenas de Lysing Enzymes.

Production of protoplasts is an important tool for genetic transformation of fungi. A protocol for protoplasts production in Aspergillus ochraceus was developed, evaluating culture aging of mycelium, different commercial enzymes and osmotic stabilizers. The best results were obtained with NH4Cl 0.8mol L-1 as osmotic stabilizer, mycelial age of 24 hours and Lysing Enzymes (20mg mL-1) plus Meicelase (20mg mL-1) as lytic enzymes. Good results were also obtained with Lysing Enzymes alone.