Résumé
Resumen La tripanosomiasis americana es una enfermedad potencialmente letal causada por el protozoario hemoflagelado Trypanosoma cruzi. Esta enfermedad desatendida afecta entre 6 a 7 millones de personas en el mundo. Actualmente existen solo dos medicamentos para tratar la enfermedad, benznidazol y nifurtimox, ambos efectivos si se administran en la fase aguda, aunque su actividad disminuye en la fase crónica, también induce efectos secundarios significativos. El objetivo de este estudio fue analizar la actividad tripanosomicida de los extractos metanólicos de Hematoxilum brasiletto, Marrubium vulgare, Schinus molle, and Cympongon citratus contra T. cruzi epimastigotes, seguido de la separación cromatográfica e identificación de los compuestos activos del mejor candidato por medio de reacciones químicas coloridas y también, determinar su efecto citotóxico en cultivos de linfocitos humanos y Artemia salina. El extracto de H. brasiletto presentó la mejor actividad anti-T. cruzi con una concentración inhibitoria (CI) de 543 µg/mL; seguida en orden descendiente por M. vulgare (CI50 = 647 µg/mL), S. molle (CI = 827 µg/mL)y finalmente, C. citratus (CI = 1 210 µg/ mL). La fracción cromatográfica Fr22 de H. brasiletto presentó la mejor efectividad tripanosomicida (CI = 0.238 mg/ mL) que las otras fracciones o el extracto completo, además no presentaron efecto citotóxico contra linfocitos o A. salina. Los compuestos activos fueron identificados como taninos, quinonas, flavonoides y sesquiterpenlactonas. En conclusión, fueron identificados los compuestos activos contra T. cruzi en H. brasiletto los cuales no tuvieron efecto citotóxico. De acuerdo a nuestros resultados, el extracto de H. brasiletto podría ser usado como tratamiento alternativo para la enfermedad de Chagas, sin embargo, se necesitan estudios adicionales para probar su actividad y dosis en un modelo murino con la completa identificación de los compuestos activos, sobre los cual se está investigando.
Abstract American trypanosomiasis is a potentially lethal disease caused by the hemoflagellate protozoanTrypanosoma cruzi. This neglected disease affects from 6 to 7 million people worldwide. Currently there are only two medicines to treat this disease: beznidazol and nifurtimox, both effective if they are administrated in the acute phase of infection, although their effectiveness fades away in the chronic phase; it also induces significant side effects. The aim of this study is to screen the trypanocidal activity of methanolic extracts from Hematoxilum brasiletto, Marrubium vulgare, Schinus molle, and Cympongon citratus,against T. cruzi epimastigotes, followed by the chromatographic separation, and identification of active compounds of the best candidate by colored chemical reactions; furthermore, it was also determined their cytotoxic effect in human lymphocytes and the brine shrimp Artemia salina. The extract of H. brasiletto showed the highest anti-T. cruzi activity with a inhibitory concentration (IC50) of 543 µg/mL; in descending order, it was followed by M. vulgare (IC50 = 647 µg/mL), S. molle (IC = 827 µg/mL) and finally, C. citratus (IC = 1 210 µg/mL). The chromatographic fraction Fr22 from H. brasiletto showed the best anti-T. cruzi effectivity (IC50 = 0.238 mg/mL), when compared to the other fraction or the whole extract, with no cytotoxic effect against human lymphocytes or A. salina. The active compounds were identified as tannins, quinones, flavonoids and sesquiterpenlactones. In conclusion, active compounds against T. cruzi were identified for the first time in H. brasiletto, with non-cytotoxic effects. The H. brasiletto extract, according to our results, could be used as an alternative treatment for the Chagas disease; however, additional studies will be necessary to test their activity and doses in a murine model, with the complete identification of the active compounds, on which we are investigating.
Résumé
Introducción: Ulomoides dermestoides es un escarabajo usado en medicina tradicional oriental. En Centroamérica y América del Sur los escarabajos se consumen vivos en casos de asma y artritis reumatoide; sin embargo, pocos estudios científicos confirman esta terapia. Objetivo: evaluar la capacidad antioxidante de extractos metánolicos del cuerpo entero de U. dermestoides. Métodos: los extractos fueron obtenidos mediante extracción discontinua con MeOH 48 % y 96 %. La capacidad antioxidante se determinó por el método ORAC y el ensayo de reducción del radical 2,2-difenil-1-picrilhidrazilo (DPPH). Resultados: todos los extractos mostraron capacidad antioxidante, pero el extracto obtenido con MeOH 48 % y 48 h de extracción (UD4848) mostró mayor actividad: ORAC= 3,65±0,5 equivalentes trolox, reducción DPPH30min= 81,7 % y CI50 del DPPH30min= 23 µg/mL. Los principales componentes del extracto UD4848 fueron: ácidos grasos saturados e insaturados, n-pentadecanol y 4-etil-resorcinol. Conclusiones: la actividad antioxidante de extractos metanólicos de U. dermestoides puede explicar su utilidad in medicina popular.
Introduction: Ulomoides dermestoides is a beetle used in traditional Oriental medicine. In Central and South America beetles are eaten alive as a treatment for asthma and rheumatoid arthritis, but few scientific studies validate this therapy. Objective: evaluate the antioxidant capacity of whole-body methanolic extracts of U. dermestoides. Methods: extracts were obtained by discontinuous extraction with 48 % and 96 % MeOH. Antioxidant capacity was determined by the ORAC method and the 2.2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical reduction assay. Results: all extracts showed antioxidant capacity, but the extract obtained with 48 % MeOH and 48 h extraction time (UD4848) exhibited higher activity: ORAC= 3.65±0.5 trolox equivalents, reduction DPPH30min= 81.7 % and IC50 of DPPH30min= 23 µg/mL. The main components in extract UD4848 were saturated and unsaturated fatty acids, n-pentadecanol and 4-ethyl resorcinol. Conclusions: the antioxidant activity of methanolic extracts of U. dermestoides may explain its use in folk medicine.
Résumé
Different immunomodulatory activities present in Trichilia glabra (TG) leaf extracts have already been described. Particularly, chloroform-methanol extracts were responsible for an in-vivo anti-inflammatory effect. The effect of such extracts on the infectivity of enveloped and naked viruses were investigated. Methanolic fraction extracts were active against herpes simplex virus type 1 (HSV-1) and vesicular stomatitis virus (VSV), while no activity against poliovirus type 3 was observed. VSV was slightly more affected than HSV-1: 2.8 log10 reduction in VSV titer against 2.4 log10reduction in HSV-1 titer when 0.25 mg/ml F2 fraction was tested and a reduction of 2.7 log10in VSV virus titer and of 1.5 log10in HSV-1 virus titer was observed when 0.25 mg/ml F3 fraction was tested. Results obtained in this work suggest a potential pharmaceutical use of TG extract components.
Previamente se han descripto distintas actividades inmunomoduladoras, presentes en extractos de hojas de Trichilia glabra (TG). En particular, se ha demostrado una actividad antiinflamatoria presente en extractos metanólicos. En este trabajo se investigó la actividad virucida de dichos extractos sobre virus envueltos y desnudos. Distintos extractos metanólicos han inactivado en forma moderada los virus herpes simplex tipo 1 (HSV-1) y el virus de la estomatitis vesicular (VSV), mientras no evidenciaron actividad sobre poliovirus tipo 3. VSV resultó algo mas afectado que HSV-1: se observó una reducción en el título viral de 2,8 log10para VSV y de 2,4 log10para HSV-1 cuando se uso una concentración de 0,25 mg/ml de la fracción F2 y una reducción de 2,7 log10para VSV y de 1,5 log 10para HSV-1 cuando se usó una concentración de 0,25 mg/ml de la fracción F3. Los resultados obtenidos en este trabajo, sugieren un potencial uso farmacéutico de los componentes presentes en los extractos de TG.