Effect of low-density lipoproteins and trehalose on the quality of cryopreserved bovine semen / Efecto de las lipoproteínas de baja densidad y la trehalosa en la calidad del semen bovino criopreservado / Efeito das lipoproteínas de baixa densidade e trealose na qualidade do sêmen bovino criopreservado

Abstract Background: In artificial insemination, chicken egg yolk is added to bovine semen to protect it during the cryopreservation process, although it contains substances that can affect the microbiological quality and metabolism of sperm. Objective: To evaluate post-thaw quality of bovine cryopreserved semen added with centrifuged and non-centrifuged egg yolk, low-density lipoproteins (LDL), and trehalose (T). Methods: Ten ejaculates from five bulls were cryopreserved under the treatments T1: pure egg yolk (PEY) at 20% v/v, T2: centrifuged egg yolk (CEY) at 20% v/v, T3: LDL at 8% v/v, T4: T at 100 mM, and T5: T at 100 mM plus LDL at 8% v/v (TLDL). Spermatic motility and kinetics, functional membrane integrity (FMI), structural membrane integrity (SMI), sperm vitality (SV) and abnormal morphology (AM) were assessed using the Sperm Class Analyzer (SCA®) system, hypoosmotic test (HOST), SYBR/PI probes, and eosin-nigrosin staining, respectively. A completely randomized design was used. Normal distribution of the variables was validated through the Kolmogórov- Smirnov test. A generalized linear model was used to determine sources of variation. Means were compared using the Tukey test. Results: Inclusion of CEY or LDL had a similar effect on sperm protection, and were superior for motility, kinetics and membrane integrity compared to the other treatments (p<0.05). CEY was superior for progressive motility (p<0.05). The cryoprotective action of LDL was similar to TLDL for motility and kinetics, SMI, SV, and AM (p<0.05). Inclusion of PEY and T resulted in the lowest semen quality (p<0.05). The use of T resulted in a reduction in FMI and SMI (p<0.05). No differences in AM between treatments were found (p>0.05). Conclusions: Egg yolk can be replaced by centrifuged egg yolk or low-density lipoproteins in the freezing extender used for bovine semen used in artificial insemination.

Resumen Antecedentes: la yema de huevo de gallina se agrega al semen bovino usado en inseminación artificial para protegerlo durante el proceso de criopreservación, aunque ésta tiene sustancias que pueden afectar el metabolismo espermatico y la calidad microbiológica del semen. Objetivo: evaluar la calidad post-descongelación del semen bovino criopreservado agregado con yema de huevo centrifugada y no centrifugada, lipoproteínas de baja densidad (LDL) y trehalosa (T). Métodos: diez eyaculados de cinco toros se criopreservaron bajo los tratamientos, T1: yema de huevo pura (PEY) al 20% v/v, T2: yema de huevo centrifugada (CEY) al 20% v/v, T3: LDL al 8% v/v, T4: T a 100 mM, y T5: T a 100 mM más LDL al 8% v/v (TLDL). La movilidad y la cinética espermática, la integridad funcional de la membrana (FMI), la integridad estructural de la membrana (SMI), la vitalidad espermática (SV) y la morfología anormal (AM), se determinaron mediante el sistema Sperm Class Analyzer (SCA®), la prueba hipoosmótica (HOST), las sondas SYBR/PI y la tinción con eosina-nigrosina, respectivamente. Se utilizó un diseño completamente al azar. La normalidad de las variables se validó mediante la prueba de Kolmogórov-Smirnov. Se utilizó un modelo lineal generalizado para determinar las fuentes de variación. Las medias de los tratamientos se compararon mediante la prueba de Tukey. Resultados: CEY y LDL tuvieron un efecto similar en la protección de los espermatozoides, siendo superiores a los demás tratamientos respecto a movilidad, cinética e integridad de la membrana (p<0,05). CEY fue superior para la movilidad progresiva (p<0,05). La acción crioprotectora de LDL fue similar a TLDL para movilidad y cinética, SMI, AM y SV (p<0,05). PEY y T resultaron en la más baja calidad seminal (p<0,05). El uso de T redujo la FMI y la SMI (p<0,05). No se encontraron diferencias en AM entre los tratamientos (p>0,05). Conclusiones: la yema de huevo puede reemplazarse por yema de huevo centrifugada o por lipoproteinas de baja densidad en el diluyente de congelación usado para semen bovino destinado a inseminacion artificial.

Resumo Antecedentes: a gema de ovo de galinha tem sido utilizada com a finalidade de proteger o sêmen bovino durante o processo de criopreservação, embora tenha substâncias que possam afetar o metabolismo dos espermatozóides e a qualidade microbiológica do sêmen utilizado para a inseminação artificial. Objetivo: avaliar a qualidade pós-descongelamento do sêmen bovino criopreservado com gema de ovo centrifugada e não centrifugada, lipoproteínas de baixa densidade (LDL) e trealose (T). Métodos: dez ejaculados de cinco touros foram criopreservados sob os tratamentos, T1: gema de ovo pura (PEY) 20% v/v, T2: gema de ovo centrifugada (CEY) 20% v/v, T3: LDL 8% v/v, T4: T 100 mM e T5: T 100 mM mais LDL 8% v/v (TLDL). Mobilidade e cinética espermática, integridade funcional da membrana (FMI), integridade estrutural da membrana (SMI), vitalidade espermática (SV) e morfologia anormal (AM) foram determinadas por o sistema Sperm Class Analyzer (SCA®), teste hiposmótico (HOST), coloração com SYBR/PI e eosina-nigrosina, respectivamente. Um design completamente aleatoriedade foi usado. A normalidade das variáveis foi validada pelo teste de Kolmogorov-Smirnov. Um modelo linear generalizado foi utilizado para determinar as fontes de variação. As médias dos tratamentos foram comparadas pelo teste de Tukey. Resultados: T2 (CEY) e T3 (LDL) tiveram efeito similar na proteção espermática, sendo superior aos demais tratamentos para mobilidade, cinética e integridade da membrana (p<0,05). T2 (CEY) foi superior para mobilidade progressiva (p<0,05). A ação crioprotetora de T3 (LDL) foi semelhante à T5 (TLDL) para motilidade e cinética, SMI, SV e AM (p<0,05). T1 (PEY) e T4 (T) tiveram a menor qualidade seminal (p<0,05). O uso de T4 (T) produziu uma redução na SMI e FMI (p<0,05). Não foram encontradas diferenças na AM entre os tratamentos (p>0,05). Conclusões: a gema de ovo pode ser substituída por gema de ovo centrifugada ou lipoproteínas de baixa densidade no diluente de congelamento de sêmen bovino.

Fibra y capacidad antioxidante de algas comestibles en ratas suficientes o deficientes en vitamina E / Fiber and antioxidant capacity of edible algae in vitamin E sufficient and deficient rats / Fibra e capacidade antioxidante de algas comestíveis em camundongos suficientes e deficientes em vitamina E

Debido a la importancia que han alcanzado las algas en la alimentación de los países occidentales aquí se estudió el potencial de las algas Nori y Wakame como fuentes de fibra y capacidad antioxidante en ratas en crecimiento alimentadas con dietas suficientes o deficientes en vitamina E (vit E) durante 15 días. Hubo 3 grupos de ratas que recibieron dietas: 1. grupo control, 2. grupo Nori y 3 grupo Wakame con vit E y 3 grupos similares sin vit E. En las dietas con vit E, Nori produjo una reducción de crecimiento y las dos algas causaron una acumulación de vit E hepática, una reducción en la vit E plasmática y un aumento en TBARS en plasma e hígado. En contraste, cuando las algas se ofrecieron en dietas exentas de vit E, el grupo Nori recuperó su capacidad de crecer, mantuvo una mayor reserva de vit E en el hígado que el grupo control deficiente en vit E y el consumo de ambas algas resultó en TBARS plasmáticos por debajo de las ratas controles deficientes en vit E, lo que señaló que las algas se comportaron mejor en dietas sin vit E. Adicionalmente, se observó que las algas estimularon la función excretora del intestino sin afectar su capacidad absortiva.

In western countries, edible seaweed consumption has markedly increased in recent years. Accordingly, in this study the antioxidant capacity and fiber value of Nori and Wakame algae were evaluated in growing rats fed with sufficient of deficient vitamin E. There were 3 groups of rats: 1. Control, 2. Nori and 3. Wakame with vitamin E and 3 similar groups without vitamin E. The diet with Nori and sufficient vitamin E caused a reduction in growth and Nori and Wakame were associated with liver vitamin E accumulation, plasma vitamin E reduction and an increase in TBARS in liver and plasma. In contrast, when the same diets were offered without vitamin E, the Nori fed rats recovered their growing capacity, they maintained a higher vitamin E reserve than the control or Wakame fed rats, and the consumption of both algae was associated with lower plasma TBARS than vitamin E deficient rats, indicating that these algae are best accepted when offered without vitamin E. In addition, both algae improved the excretory capacity of the intestine without affecting its absorption function.

Visto que nos países ocidentais revestiu importância o consumo de algas na alimentação, aqui foi estudado o potencial das algas Nori e Wakame como fontes de fibra e capacidade antioxidante em ratos em crescimento, alimentados com dietas suficientes ou deficientes em vitamina E (vit E) durante 15 dias. Houve 3 grupos de ratos que receberam dietas: 1. grupo controle, 2. grupo Nori e 3. grupo Wakame com vit E e 3 grupos similares sem vit E. Nas dietas com vit E, Nori produziu uma redução no crescimento e as duas algas provocaram uma acumulação de vit E hepática, redução da vit E plasmática e aumento em TBARS em plasma e fígado. Em contraste, quando as algas foram oferecidas em dietas sem vitamina E, o grupo Nori recuperou sua capacidade de crescimento, manteve maior reserva de vit E no fígado do que o grupo controle deficiente em vit E e o consumo de ambas as algas resultou em TBARS plasmáticos mais baixos do que nos ratos do grupo controle deficientes em vitamina E, indicando que essas algas são melhor aceitas quando oferecidas sem vit E. E, também, as algas melhoraram a capacidade de excreção do intestino sem afetar sua função de absorção.

Medida del colesterol de lipoproteínas de baja densidad utilizando tres metodologías / Measurement of cholesterol low-density lipoprotein using three methodologies / Medida do colesterol de lipoproteínas de baixa densidade utilizando tres metodologias

Tomando en cuenta que aún no existe una metodología estándar de rutina para la determinación del colesterol de lipoproteínas de baja densidad (LDL-c) se decidió evaluar su determinación analítica utilizando tres técnicas: determinación enzimática homogénea, precipitación con sulfato de polivinilo y fórmula de Friedewald. Fueron procesadas 98 muestras de suero a las cuales se les determinó triglicéridos (TG), colesterol total (CT), colesterol de lipoproteínas de alta densidad (HDL-c) y colesterol de lipoproteínas de baja densidad (LDL-c). Los valores promedio de CT fueron 194,46 ± 43,54 mg/dL, HDL-c 51,12 ± 12,36 mg/dL y TG 132,88 ± 76,93 mg/dL. Aun cuando el análisis de regresión mostró una buena correlación entre los valores de LDL-c, los resultados indicaron una diferencia estadísticamente significativa en los mismos cuando los niveles de TG superaron los 200 mg/dL. La misma se observó principalmente entre el método de precipitación y la fórmula de Friedewald, siendo los valores significativamente más bajos en esta última (LDL-c por precipitación: 141,3 ± 26,2 mg/dL; LDL-c por fórmula de Friedewald: 110,1 ± 35,4 mg/dL). De la misma manera se vio afectada la proporción de individuos clasificados según su riesgo coronario. Es necesario comparar las técnicas aplicadas en este estudio con la cuantificación beta para evaluar cuál tiene un mayor nivel de exactitud.

Considering that there is still no standard methodology for routine determination of low density lipoprotein (LDL-c) it was decided to evaluate their analytical determination using three techniques: homogeneous enzymatic determination, polyvinyl sulphate precipitation and Friedewald formula. Ninety-eight serum samples were processed; triglycerides (TG), total cholesterol (TC), high-density lipoprotein (HDL-c) and LDL-c were determined. Mean total cholesterol was 194.46 ± 43.54 mg/dL, HDL-C was 51.12 ± 12.36 mg/dL and TG was 132.88 ± 76.93 mg/dL. Although regression analysis showed a good correlation between LDL-c, the results showed a statistically significative difference in them when TG levels exceeded 200 mg/dL. It was mainly observed in the precipitation method and the Friedewald formula, the latter values being significantly lower (LDL-C by precipitation: 141.3 ± 26.2 mg/dL, LDL-C by the Friedewald formula: 110, 1 ± 35.4 mg/dL). Moreover, this difference affected the proportion of individuals classified according to their coronary risk. It is necessary to compare the techniques applied in this study with beta quantification to assess which has a higher level of accuracy.

Levando em consideragao que ainda nao existe uma metodologia padrao de rotina para a determinagao do colesterol de lipoproteínas de baixa densidade (LDL-c) se decidiu avaliar sua determinagao analítica utilizando tres técnicas: determinagao enzimática homogénea, precipitagao com sulfato de polivinil e fórmula de Friedewald. Foram processadas 98 amostras de soro as quais lhes foi determinado triglicerídeos (TG), colesterol total (CT), colesterol de lipoproteínas de alta densidade (HDL-c) e colesterol de lipoproteínas de baixa densidade (LDL-c). Os valores médios de CT foram 194,46 ± 43,54 mg/dL, HDL-c 51,12 ± 12,36 mg/dL e TG 132,88 ± 76,93 mg/dL. Inclusive quando a análise de regressao mostrou uma boa correlagao entre os valores de LDL-c, os resultados indicaram uma diferenga estatisticamente significativa nos mesmos quando os niveis de TG superaram os 200 mg/dL. A mesma se observou principalmente entre o método de precipitagao e a fórmula de Friedewald, sendo os valores significativamente mais baixos nesta última (LDL-c por precipitagao: 141,3 ± 26,2 mg/dL; LDL-c por fórmula de Friedewald: 110,1 ± 35,4 mg/dL). Da mesma maneira se viu afetada a proporgao de indivíduos classificados conforme seu risco coronariano. É necessário comparar as técnicas aplicadas neste estudo com a quantificagao beta para avaliar qual é que tem maior nível de exatidao.