Cálculo da estimativa da incerteza de medição associada ao ensaio de contagem de bactérias heterotróficas em matriz água purificada através da técnica de detecção por fluorescência / Measurement uncertainty calculation associated with heterotrophic bacterial count in purified water matrix using the fluorescence detection technique

A incerteza de medição representa o nível de confiança no resultado. Para a estimativa da incerteza de medição foi empregado o cálculo do desvio padrão da reprodutibilidade intralaboratorial de 48 ensaios de contagem de bactérias heterotróficas pela técnica da membrana filtrante com detecção por fluorescência pelo uso de substrato fluorogênico em amostras de água purificada contaminadas artificialmente entre 10 e 100 UFC/mL. O valor obtido, 1,3 x 10-3 (log10), indica que a técnica utilizada pode ser uma alternativa para a estimativa da incerteza de medição em ensaios microbiológicos quantitativos de contagem de bactérias heterotróficas em amostras de água purificada. (AU)

Measurement uncertainty represents the confidence level in the result. To estimate the expanded measurement uncertainty, the standard deviation of intra-laboratory reproducibility of 48 heterotrophic bacterial count assays by fluorescence detection by the use of fluorogenic substrate on artificially contaminated purified water samples between 10 and 100 CFU/mL was used. The value obtained, 1.3 x 10-3 (log10), indicates that the technique used can be an alternative to estimate measurement uncertainty in quantitative microbiological heterotrophic bacterial count assays in purified water samples using fluorogenic substrate. (AU)

Cálculo da estimativa da incerteza de medição associada ao ensaio de contagem de bactérias heterotróficas em matriz água purificada através da técnica de detecção por fluorescência / Measurement uncertainty calculation associated with heterotrophic bacterial count in purified water matrix using the fluorescence detection technique

A incerteza de medição representa o nível de confiança no resultado. Para a estimativa da incerteza de medição foi empregado o cálculo do desvio padrão da reprodutibilidade intralaboratorial de 48 ensaios de contagem de bactérias heterotróficas pela técnica da membrana filtrante com detecção por fluorescência pelo uso de substrato fluorogênico em amostras de água purificada contaminadas artificialmente entre 10 e 100 UFC/mL. O valor obtido, 1,3 x 10-3 (log10), indica que a técnica utilizada pode ser uma alternativa para a estimativa da incerteza de medição em ensaios microbiológicos quantitativos de contagem de bactérias heterotróficas em amostras de água purificada.

Measurement uncertainty represents the confidence level in the result. To estimate the expanded measurement uncertainty, the standard deviation of intra-laboratory reproducibility of 48 heterotrophic bacterial count assays by fluorescence detection by the use of fluorogenic substrate on artificially contaminated purified water samples between 10 and 100 CFU/mL was used. The value obtained, 1.3 x 10-3 (log10), indicates that the technique used can be an alternative to estimate measurement uncertainty in quantitative microbiological heterotrophic bacterial count assays in purified water samples using fluorogenic substrate.

Effects of probiotic intake on intestinal bifidobacteria of celiac patients / Efeitos do consumo de probióticos sobre as bifidobactérias intestinais de pacientes celíacos

ABSTRACT BACKGROUND Healthy individuals exhibit a significantly higher concentration of faecal bifidobacteria in comparison to celiac patients. Even though there are potential benefits in probiotic usage, they have been little explored as an adjunctive therapy in celiac disease. OBJECTIVE This study aimed at the comparison of faecal bifidobacteria concentration and pH among celiac patients and healthy subjects before and after the daily intake of 100 g of yogurt containing probiotic for a thirty-day period. METHODS Feces from 17 healthy subjects and 14 celiac patients were analyzed, in which stool culture was performed for the isolation and quantification of faecal bifidobacteria. Furthermore, Gram’s method was employed for the microscopic analysis of the colonies, while the identification of the Bifidobacterium genus was made through determination of the fructose-6-phosphate phosphoketolase enzyme. Faecal pH was measured using a calibrated pHmeter. RESULTS Faecal bifidobacteria concentration before probiotic consumption was significantly higher in healthy individuals (2.3x108±6.3x107 CFU/g) when compared to celiac patients (1.0x107±1.7x107 CFU/g). Faecal pH values did not show a significant difference. After the daily consumption of probiotic-containing yogurt both groups showed a significant increase in the concentration of faecal bifidobacteria, but healthy subjects presented significantly higher bifidobacteria concentrations (14.7x108±0.2x108 CFU/g) than the celiac group (0.76x108±0.1x108 CFU/g). The obtained pH values from both groups were not significantly different, being 7.28±0.518 for the celiac patients and 7.07±0.570 for healthy individuals after the probiotic intake. CONCLUSION The probiotic supplementation significantly increased the number of bifidobacteria in the feces of celiac patients, although it was not sufficient to reach the concentration found in healthy individuals prior to its consumption.

RESUMO CONTEXTO Indivíduos saudáveis apresentam uma concentração de bifidobactérias fecais significativamente maior em comparação a pacientes celíacos. Apesar de haver benefícios potenciais no uso de probióticos na doença celíaca, estes têm sido pouco explorados como uma terapia adjuvante. OBJETIVO Este estudo objetivou a comparação do pH e concentração fecal de bifidobactérias entre pacientes celíacos e indivíduos saudáveis antes e após o consumo diário de 100 g de iogurte contendo probiótico por um período de 30 dias. MÉTODOS Foram analisadas fezes de 17 pessoas saudáveis e 14 pacientes celíacos, tendo sido realizada a coprocultura para o isolamento e quantificação de bifidobactérias fecais. Além disso, o método de Gram foi empregado na análise microscópica das colônias, enquanto a identificação do gênero Bifidobacterium foi feita através da determinação da enzima frutose-6-fosfato fosfocetolase. O pH fecal foi medido usando um pHmetro calibrado. RESULTADOS A concentração de bifidobactérias fecais antes do consumo do iogurte probiótico foi significativamente maior em indivíduos saudáveis (2.3x108±6.3x107 UFC/g) quando comparada aos celíacos (1.0x107±1.7x107 CFU/g). Por outro lado, o pH fecal de ambos os grupos não apresentou diferença significativa. Após o consumo diário de iogurte contendo probiótico, ambos os grupos tiveram um aumento significativo na concentração de bifidobactérias fecais, entretanto indivíduos saudáveis apresentaram concentrações de bifidobactérias significativamente maiores (14.7x108±0.2x108 UFC/g) do que o grupo celíaco (0.76x108±0.1x108 UFC/g). Os valores de pH obtidos de ambos os grupos não foram significativamente diferentes, sendo de 7.28±0.518 para os pacientes celíacos e de 7.07±0.570 para os indivíduos saudáveis após o consumo do probiótico. CONCLUSÃO A suplementação com probiótico aumentou significativamente o número de bifidobactérias nas fezes dos pacientes celíacos apesar de não ter sido suficiente para alcançar a concentração encontrada em indivíduos saudáveis antes do consumo de probióticos.

Microbial colonization in orthodontic mini-implants

Peri-implant inflammation contributes for loss of secondary stability of orthodontic mini-implants. The investigation of microbial colonization in this area would benefit its control, and consequently favor the long-term success of mini-implants. Therefore, the aim of this study was to determine the establishment and the evolution of microbial colonization process in orthodontic mini-implants for 3 months, since the time of their installation. One-hundred and fifty samples collected from 15 mini-implants were investigated from baseline up to 3 months. The biological material was obtained from peri-implant area using paper points. Nonspecific, Streptococcus spp, Lactobacillus casei and Candida spp colonizations were analyzed by cell growth methods. Porphyromonas gingivalis colonization was observed by 16S rDNA-directed polymerase chain reaction. Data from cell growth were submitted to the Wilcoxon sign rank test and results from molecular analysis were presented in a descriptive way. There was no significant difference in the microbial colonization among the examined time intervals, except for Streptococcus spp, between baseline and 24 h, which characterized the initial colonization in this time interval. Lactobacillus casei and Candida spp colonizations were insignificant. No Porphyromonas gingivalis was detected among the analyzed samples. The microbial colonization of mini-implants did not significantly change during the study. However, it should be monitored by orthodontists, since it is an important factor for mini-implants success.

A inflamação peri-implantar contribui para a perda da estabilidade secundária dos mini-implantes ortodônticos. A investigação da colonização microbiana desta área beneficiaria o seu controle e, consequentemente, favoreceria o sucesso dos mini-implantes a longo prazo. Portanto, o objetivo dos autores foi determinar o estabelecimento e evolução do processo de colonização microbiana em mini-implantes ortodônticos por três meses desde a instalação. Cento e cinquenta amostras coletadas de 15 mini-implantes foram investigadas desde o tempo inicial até 3 meses. O material biológico foi obtido da área peri-implantar com auxílio de cones de papel absorvente. As colonizações inespecíficas de Streptococcus spp, Lactobacillus casei e Candida spp foram analisadas por métodos de crescimento celular. A colonização por Porphyromonas gingivalis foi observada por meio da reação em cadeia da polimerase 16S rDNA. Os dados do crescimento celular foram submetidos ao teste de Wilcoxon sign rank e os resultados da biologia molecular foram apresentados de modo descritivo. Não houve diferença estatisticamente significante da colonização microbiana entre os intervalos de tempo avaliados, exceto para Streptococcus spp entre os tempos inicial e 24 h, o que caracterizou o início da colonização neste intervalo de tempo. As colonizações por Lactobacillus casei e Candida spp foram insignificantes. Não foi detectada a presença de Porphyromonas gingivalis nas amostras analisadas. A colonização microbiana nos mini-implantes não se alterou significativamente durante o estudo. No entanto, deve ser monitorada por ortodontistas, uma vez que é um fator importante para o sucesso dos mini-implantes.