Résumé
Recent years have seen growing interest in the development of genetic animal models to investigate the bidirectional relationship between trait anxiety and defensive reactions. The present study further analyzed behavioral correlates of two novel breeding lines of rats, Carioca high-and low-conditioned freezing (CHF and CLF), based on defensive freezing responses to contextual cues previously associated with electric footshock. Male and female rats from the 10th generation were used to assess anxiety-like reactions in the elevated plus maze (EPM), depressive-like behavior in the forced swim test (FST), and aversive memory in the contextual fear conditioning paradigm. In the EPM, female rats showed lower anxiety-like behavior than males, whereas CHF rats were more anxious than CLF rats. The same pattern of results was found in the contextual fear conditioning paradigm. No differences were found between lines or sexes in the FST. Such differences in emotionality responses in the 10th generation of selected rats further indicate a possible use of this model to study correlations between trait anxiety and defensive reactions. The face validity of the model and its use to experimentally simulate generalized anxiety disorder in humans are also discussed.
Nos últimos anos, tem crescido o interesse pelo desenvolvimento de modelos animais geneticamente modificados para o estudo da relação bidirecional entre ansiedade traço e reações de defesa. O presente estudo analisou a correlação comportamental de duas novas linhagens de ratos, denominados de Carioca Alto e Baixo Congelamento (CHF e CLF), baseado na resposta de congelamento a estímulos contextuais previamente associados a choque elétrico nas patas. Foram utilizados ratos machos e fêmeas da 10ª geração para serem avaliadas as reações relacionadas à ansiedade no labirinto em cruz elevado (LCE), comportamentos relacionados à depressão no teste do nado forçado (TNF) e a memória aversiva no paradigma do medo condicionado ao contexto. No LCE, ratas fêmeas apresentaram um menor índice de comportamento indicativo de ansiedade comparadas aos machos. Mais ainda, animais da linhagem CHF apresentaram maiores índices de ansiedade em relação a animais da linhagem CLF. O mesmo padrão de resultados foi encontrado no paradigma do medo condicionado ao contexto. Não foram encontradas diferenças entre as linhagens ou entre os sexos testados no TNF. Tais diferenças nas respostas emocionais da 10ª geração de ratos geneticamente selecionados indicam uma possível utilização deste modelo no estudo de correlações entre ansiedade traço e reações de defesa. A validade de face do modelo e seu uso para simular experimentalmente o transtorno da ansiedade generalizada em humanos também são discutidos.
En los ultimos años, ha crescido el interés por el desarrollo de modelos animales geneticamente modificados para el estudio de la relación bidireccional entre ansiedad de rasgo y reaciones de defensa. El presente estudio analisó la correlación existente en el comportamiento de dos nuevas linajes de ratones, denominados de Carioca Alto y Bajo Congelamiento (CHF e CLF), basado en la respuesta de congelamiento a estimulos contextuales previamente asociados a choque elétrico en las patas. Fueron utilizados ratones machos y hembras de la 10ª generación para que fuesen evaluadas las reacciones relacionadas a la ansiedad en el laberinto en cruz elevado (LCE), comportamientos relacionados a la depresión en el teste de natación forzada (TNF) y la memória aversiva en el paradigma del miedo condicionado al contexto. En el LCE, las ratazanas presentaron un menor índice de comportamiento indicativo de ansiedad, se comparadas a los ratones machos. Animales de la linaje CHF presentaran mayores índices de ansiedad que los animales de la linaje hembras CLF. El mismo patrón de resultados fue encontrado em el paradigma del miedo condicionado al contexto. No se encontraron diferencias entre los linajes ó entre los sexos testados en el TNF. Tales diferencias en las respuestas emocionales de la 10ª generación de ratones geneticamente selecionados indican una posible utilización de ese modelo en el estudio de correlación entre ansiedade de rasgo y reacciones de defensa. La validad de contenido yaparente del modelo y sus utilización para simular experimentalmente el transtorno de la ansiedad generalizada en humanos, también son discutidos.
Sujets)
Animaux , Mâle , Femelle , Animal génétiquement modifié , Anxiété , ComportementRésumé
El Condicionamiento Pavloviano de Miedo es uno de los modelos preclínicos más comunes en el estudio del Trastorno de Estrés Post-traumático. El objetivo de la presente investigación consistió en utilizarlo como biomodelo para el estudio de las diferencias sexuales que caracterizan este síndrome, así como elaborar una descripción preliminar de las diferencias a lo largo de la trayectoria ontogenética. Se utilizaron 45 sujetos, de tres camadas diferentes de ratas ingenuas de ascendencia Wistar, 18 machos y 27 hembras, dos aproximadamente por camada para cada uno de los dos grupos experimentales: animales adolescentes y adultos. Los resultados señalan diferencias significativas en la segunda medición del estímulo condicionado en la interacción entre sexo y edad y al comparar las tres mediciones del estímulo condicionado. Se discuten los resultados en torno a las discrepancias en la literatura respecto al efecto de las variables evaluadas en la adquisición de miedo condicionado.
Pavlovian fear conditioning is one of the most popular preclinical models in the study of Post-Traumatic Stress Disorder (PTSD). The aim of the present research was explore the sex differences that characterize PTSD by means of this experimental paradigm, as well as to offer a preliminary description of how these sex differences behave throughout development. Forty five native rats, of Wistar descent were used as subjects, with 18 males and 27 females approximately balanced by litter across the two experimental groups: adolescents and adults. The results show significant differences in the second measurement of the conditioned stimulus in the interaction between sex and age and to compare the tree measurements of the conditioned stimulus. Results are discussed regarding the discrepancies in the literature regarding the effect of the variables evaluated in the acquisition of Conditioned fear.
Résumé
Para estudiar el efecto del aumento comportamental o farmacológico de la ansiedad sobre la adquisición del miedo condicionado al contexto, 32 ratas Wistar (275±25 gm) divididas en dos grupos (restricción comportamental y control) recibieron fluoxetina (ig, 4 mg/kg; 1ml) o solución salina (ig, 0.9%). Luego fueron entrenadas en una tarea de miedo condicionado al contexto. El ANOVA de dos vías mostró diferencias significativas para el factor tratamiento (F[1,28] = 25.261; P < 0.001). Los sujetos tratados con fluoxetina presentaron menor tiempo de congelamiento (Student Newman-Keuls; P < 0.05). No hubo diferencias significativas para la restricción, ni para la interacción entre factores (F[1,28] = 0.115; P = 0.737 y F[1,28] = 0.016; P = 0.899). Así, la restricción no alteró la adquisición del miedo condicionado indicando que el aumento de liberación de 5-HT así inducido, no es comparable al inducido por fluoxetina. La fluoxetina deterioró la adquisición de la respuesta de miedo, indicando que el mecanismo por el cual la ansiedad interrumpe el aprendizaje puede ser serotoninérgico...
In order to study the effect of behavioral or pharmacologically enhanced anxiety on the acquisition of contextual fear conditioning, thirty two Wistar rats (275±25 gm) were divided in two groups (behavioral restriction and control). Half of each group received saline solution (ig.; 0.9%) or fluoxetine (ig.; 4mg/Kg) before the fear conditioning procedure. The two way ANOVA showed significant differences for treatment (F[1,28] = 25.261; P < 0.001). Student Newman-Keuls showed that subjects treated with fluoxetine had lower freezing times. There were no significant differences nor for restriction neither for the interaction between the factors (F[1,28] = 0.115; P = 0.737 y F[1,28] = 0.016; P = 0.899). Thus, the restriction procedure used did not modify the acquisition of the conditioned fear response suggesting that the putative 5-HT enhancement induced is not comparable to that induced by fluoxetine. Acute fluoxetine disrupted the acquisition of the conditioned fear response, suggesting that the mechanism by means of which anxiety disrupts learning could be serotonergic in nature...
Sujets)
Animaux , Fluoxétine/effets indésirables , Rats/psychologie , SérotonineRésumé
El análisis de datos de extinción en experimentos de miedo condicionado ha involucrado, tradicionalmente, el uso de modelos lineales estándar, primordialmente ANOVA de diferencias entre grupos de sujetos sometidos a diferentes protocolos de extinción, manipulaciones farmacológicas o algún otro tratamiento. Aún cuando algunos estudios reportan diferencias individuales en indicadores como tasas de supresión o porcentajes de congelamiento, esas diferencias no son incluidas en el análisis estadístico. Los patrones de respuesta intra-sujeto son entonces promediados usando ventanas temporales de baja resolución, las cuales pueden ignorar esta dinámica del desempeño individual. Este trabajo ilustra un procedimiento analítico alternativo que consta de 2 pasos: estimación de la tendencia para los datos intra-sesión y el análisis de las diferencias entre-grupo usando la tendencia como variable de respuesta. Este procedimiento se pone a prueba usando datos reales de extinción de miedo condicionado, comparando estimaciones de tendencia robusta vía Mínimos Cuadrados Medianos con Mínimos Cuadrados Ordinarios, y comparando las diferencias de grupo usando la pendiente robusta versus la mediana del porcentaje de congelamiento como variable dependiente.
Traditionally , the analysis of extinction data in fear conditioning experimentshas involved the use of standard linear models, mostly ANOVA of between-group differences of subjects that have undergone different extinction protocols, pharmacological manipulations or some other treatment. Although some studies reportindividual differences in quantities such as suppression rates or freezing percentages, these differences are not included in the statistical modeling. Withinsubject response patterns are then averaged using coarse-grain time windows which can overlook these individual performance dynamics. Here we illustrate an alternative analytical procedure consisting of 2 steps: the estimation of a trend for within-session data and analysis of group differences in trend as main outcome. This procedure is tested on real fear-conditioning extinction data, comparing trend estimates via Ordinary Least Squares (OLS) and robust Least Median of Squares (LMS) regression estimates, as well as comparing between-group differences and analyzing mean freezing percentage versus LMS slopes as outcomes.