Cinética do cultivo de Neisseria lactamica em biorreator / Bioreactor cultivation kinetics of Neisseria lactamica

Neisseria lactamica está envolvida na aquisição da imunidade natural contra Neisseria meningitidis, causadora da doença meningocócica. Vesículas de membrana externa (OMV) de N. lactamica são antígenos potenciais contra N. meningitidis. Analisou-se a cinética de biomassa, de produção de OMV, da fonte de carbono (lactato), e dos metabólitos, para maximizar a produção de OMV. Realizaram-se ensaios em biorreator, em batelada simples, batelada alimentada com lactato, com ou sem pulsos de aminoácidos e extrato de levedura (YE). Utilizou-se o meio de Catlin (MC) como meio mínimo, e analisaram-se efeitos das concentrações do lactato, aminoácidos e YE. Lactato foi consumido e citrato e acetato produzidos. Os melhores resultados obtidos foram no meio com adição de 2 g/L de YE e concentrações dobradas de lactato e 5 aminoácidos constitutivos do MC, em batelada alimentada com pulsos. O lactato apresentou efeito positivo sobre o rendimento de OMV e o YE sobre a biomassa. Os 5 aminoácidos constitutivos do MC foram necessários para obtenção de biomassa e rendimento de OMV.

Neisseria lactamica is involved with the acquisition of natural immunity to Neisseria meningitidis. N. lactamica outer membrane vesicles (OMV) are potential antigens against N. meningitidis, the pathogen of meningococcal disease. The objective of this work was to analyze the kinetics of bacterial growth, OMV production, the carbon source (lactate), and products of metabolism, to improve growing conditions and OMV production. Groups were studied in batch process, fed-batch process with lactate, fed-batch process with pulses of amino acids and YE. MC was considered as minimal medium and it was analyzed the effect of lactate, amino acids and YE. Lactate was consumed and citrate and acetate increased in the medium. The best results were in fed-batch with pulses, in MC with the double concentrations of lactate and amino acids, added with 2 g/L of YE. The lactate had a positive effect over OMV yield and YE had a positive effect over biomass. 5 amino acids of MC were necessary to obtain biomass and OMV yield.

Importância da pesquisa da Beta-galactosidase na caracterização laboratorial da Neisseria lactamica / Importance of Beta-galactosidase research in the laboratory characterization of Neisseria lactamica

Na pesquisa de portadores de Neisseria meningitidis, a distinção da Neisseria lactamica é da maior importância, pois esta apresenta um perfil antigênico semelhante ao da Neisseria meningitidis o que ocasiona reações cruzadas freqüentes. Em pesquisa realizada em 1.983 voluntários, foram encontradas 431 amostras de Neisséria que se comportaram sorologicamente como Neiseeria meningitidis. Estas cepas foram estudadas em relação ao ataque à lactose (1% em meio C.T.A., Difeo) e quanto à hidrólise do O.N.P.G. (ortho-nitrophenyl-j3-D-galactopyranoside) pela ação da Beta-galactosidase. Das 431 amostras, 70 foram O.N.P.G. positivas e destas apenas 42 atacaram a lactose, após 48 horas (tempo máximo de observação foi de 15 dias). O ataque da lactose revelou o encontro da Neisseria lactamica em apenas 60% das oportunidades e, assim mesmo, após observação por 48 horas na grande maioria dos casos. Em vista destes achados, os autores recomendam a introdução do teste da Beta-galactosidase na rotina da pesquisa de Neisseria. meningitidis pois, além de ser um método simples e rápido, evita erros diagnósticos decorrentes de reações antigênicas cruzadas. Este fato assume maior relevância, pois esta bactéria já foi responsabilizada por um caso de meningite purulenta (AU).