Detección molecular de agentes infecciosos de transmisión sexual en un grupo de hombres sintomáticos y su relación con la conducta sexual / Molecular detection of sexually transmitted agents in a symptomatic group of men and its relationship with sexual behavior

Background: Sexually transmitted infections (STIs) affect sexual and reproductive health of millions of men. Pathogens such as human papillomavirus (HPV), herpes simplex virus type 1 and 2 (HSV-1 y HSV-2), Chlamydia trachomatis,Mycoplasmagenitalium,Mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum are associated with STIs. Aim: To detect pathogens associated with STIs in symptomatic men and its relationship with sexual behavior. Methodology: DNA was obtained from exfoliated cells of penis from 20 symptomatic men. Pathogens were detected using qPCR or PCR followed by reverse line blot. Sexual behavior was evaluated through a survey. Results: Two or more infectious agents were detected in 50% of samples. U. urealyticum was found in 25%, meanwhile C. trachomatis and M. hominis were detected in 15%. VHS-1, VHS-2 andM. genitalium were detected only in 5%. HPV was found in all samples. The most frequent HPV genotypes were VPH 16, 11, 70. There were no statistical link found between sexual behavior and the studied microorganisms Conclusion: Infectious agents associated with STIs were detected in symptomatic men. HPV was the most frequent pathogen and it was detected in multiple genotypes. It is necessary to increase the sample size to associate significantly the sexual behavior with the results.

Introducción: Las infecciones de transmisión sexual (ITS) afectan la salud sexual y reproductiva de millones de hombres. Patógenos como virus papiloma humano (VPH), virus herpes simplex (VHS-1 y VHS-2), Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis y Ureaplasma urealyticum están asociados a ITS. Objetivo: Detectar patógenos asociados a ITS en hombres sintomáticos y relacionarlos con su conducta sexual. Metodología: Se obtuvo ADN de exfoliado celular del pene de 20 hombres sintomáticos de ITS. Los patógenos fueron detectados por RPC cuantitativa o RPC seguida de reverse line blot. La conducta sexual se evaluó mediante una encuesta. Resultados: En 50% de las muestras se detectaron dos o más agentes infecciosos; U. urealyticum fue detectado en 25% de los casos, mientras que C. trachomatis y M. hominis en 15%. VHS-1, VHS-2 y M. genitalium sólo en 5%. VPH se encontró en todas las muestras y los genotipos más frecuentes fueron VPH 16, 11, 70. No se encontró relación estadística entre los microorganismos estudiados y la conducta sexual de los encuestados. Conclusión: Se detectaron agentes infecciosos asociados a ITS en hombres sintomáticos, siendo VPH el más frecuente y encontrándose en múltiples genotipos. Es necesario aumentar el tamaño de muestra para asociar significativamente la conducta sexual a los resultados.

Frecuencia de virus papiloma humano en tumores no ginecológicos de la Región de la Araucanía, Chile / Human papilloma virus frequency in non-gynecological tumors in the Araucanía Region, Chile

El Virus Papiloma Humano (HPV por sus siglas en inglés) es una de las infecciones de transmisión sexual más frecuentes del mundo y se encuentra presente en la mayoría de los cánceres de cuello uterino. Se ha descrito su presencia en otros tipos de cáncer no ginecológicos como lo son esófago y próstata. Sin embargo, las frecuencias de HPV descritas hasta el momento para estos tipos de cáncer son muy variables, y no hay artículos donde se muestren la presencia de HPV en estas neoplasias en Chile. El objetivo de este estudio fue determinar la frecuencia de HPV en muestras de biopsias de tumores no ginecológicos y tejido inflamatorio de pacientes de la región de La Araucanía. Se extrajo DNA desde un total de 47 biopsias de pacientes con esofagitis, 25 con carcinoma escamoso esofágico, 20 con hiperplasia nodular de la próstata y 39 con adenocarcinoma prostático. Estas fueron analizadas por PCR de la región L1 del virus y posterior genotipificación por reverse line blot. Se detectó HPV en el 53,2% de las muestras de esofagitis, 48% en muestras de carcinoma escamoso esofágico, 15% en hiperplasia nodular de la próstata y un 15,4% en los casos de adenocarcinoma prostático. Siendo los más frecuentes los genotipos de HPV 16 y 18, ya sea en infecciones simples o junto con otros genotipos, en lesiones preneoplásicas y neoplásicas de los tejidos estudiados. Existe una alta frecuencia de infección por HPV en biopsias de esofagitis y tejido inflamatorio esofágico de pacientes de la región de la Araucanía. En los casos de adenocarcinoma prostático e hiperplasia nodular de la próstata se observa una baja frecuencia de HPV.

Human Papilloma Virus (HPV) is the most common sexually transmitted disease in the world and it is present in practically all cervical cancers. Its presence was described in other types of non-gynecologic cancer such as esophageal and prostate. However, HPV frequency described for these cancers is highly variable, and there are no articles describing the presence of HPV in these tumors in Chile. To determine HPV frequency in samples from biopsies of non-gynecological tumors and inflammatory tissue from patients in the Araucanía region, DNA was extracted from a total of 47 biopsies from patients with esophagitis, 25 with esophageal squamous cell carcinoma, 20 with prostate nodular hyperplasia and 39 with prostate adenocarcinoma. These were analyzed by PCR of HPV L1 region and subsequent genotyping by reverse line blot. HPV was detected in 53.2% of esophagitis samples, 48% in esophageal squamous cell carcinoma, 15% in prostatitis and 15.4% in cases of prostatic adenocarcinoma. The most frequent HPV genotypes were 16 and 18, either single or in combination with other genotype infections, in inflammatory tissue and neoplastic lesions. In patients of the Araucanía region, there is a high rate of HPV infection in biopsies obtained in esophagitis and esophageal inflammatory tissue. In cases of prostatic adenocarcinoma and prostate nodular hyperplasia a low rate of HPV was observed.

Infección por VPH en mujeres del municipio de Pasto (Colombia) con resultados de citología normal / HPV infection in women from Pasto (Colombia) with normal results citology

Introducción. El cáncer de cuello uterino (CCU) asociado a la infección por VPH se considera un importante problema de salud pública a nivel mundial. En Colombia, es la segunda causa de muerte por cáncer en mujeres. En el municipio de Pasto (N) ubicado al suroccidente de Colombia, la tasa de incidencia es de 27,3/100.000 habitantes. Profundizar en la historia natural de la infección por VPH permitiría mejorar las estrategias de control y diagnóstico temprano para evitar la progresión de este tipo de cáncer. Métodos. Se realizó la detección y tipificación del VPH, mediante Reverse line blot - GP5+/GP6+, en muestras de cepillado cervical tomadas de 145 mujeres que acudieron a toma de citología en 7 Instituciones Prestadoras de Salud del municipio de Pasto. Los resultados obtenidos se analizaron junto con algunas variables poblacionales. Resultados. Se detectó VPH en 6,9% de las pacientes, los genotipos encontrados fueron VPH 11, 45, 53, 54, 55, 56, 70 y 84, los tipos virales de alto riesgo representaron el 54,6%. El 10% de las mujeres VPH positivas, presentaron infección múltiple. La edad, la infección por otros microorganismos, el número de gestas, el uso de anticonceptivos y los cambios celulares reactivos asociados a inflamación no constituyeron factores determinantes para adquirir o explicar la infección por el VPH en mujeres con citología normal. Conclusión: La infección por VPH fue más frecuente en mujeres < 37 años, con al menos una gesta previa y con algún grado de inflamación en el cérvix.

Introduction. Human Papillomavirus is sexually-transmitted well known for being the main cause of cervical cancer, which constitutes a major problem of public health worldwide. In Colombia, cervical cancer is the second cause of women mortality, and Pasto shows one of the highest incidence rates (27.39 per 100,000 inhabitants). Further in-depth research about natural history of HPV infection, would enable to improve the early-diagnosis and control strategies of the viral infection avoiding the progression to cancer. Methods. In the present study was performed the HPV-detection and typing by Reverse line blot - GP5+/6+, in cervical cell samples taken from 145 women who attended the cytology’s taking in 7 IPS (health provider institutions) of Pasto city (Colombia). Such results were analyzed together with some population variables. Results. The HPV was detected in 6.9 % of the patients studied; meanwhile, the genotypes found were: HPV 11, 45, 53, 54, 55, 56, 70 and 84, the high-risk HPV types represented 54.6%. Among women HPV positive, 90% had a single HPV infection and 10% of patients had a multiple HPV infection. Age, infection with other microorganisms, the number of pregnancies, the use of contraceptives and reactive cellular changes associated with inflammation were found to be not decisive factors for acquiring or explain HPV-infection into the group of women with normal cytology. Conclusion. The HPV infection was more often for women under 37 years having at least one previous pregnancy together with some degree of cervix inflammation.

Detección molecular de patógenos emergentes de importancia médica y veterinaria en garrapatas capturadas sobre caballos domésticos / Molecular detection of emerging pathogens of medical and veterinary importance in ticks found in domestic horses

En la actualidad son varias las especies de patógenos emergentes de importancia médica y veterinaria transmitidos por garrapatas. Los estudios sobre estos agentes y sus enfermedades han sido escasos en Cuba. Conocer la presencia de algunos de estos patógenos en garrapatas cubanas que afectan el ganado equino. Se procesaron 95 garrapatas colectadas de caballos domésticos, conservadas en alcohol e identificadas taxonómicamente según claves convencionales. A cada una se le realizó extracción de ADN y posteriormente diferentes reacciones en cadena de la polimerasa utilizando cebadores específicos para los grupos microbianos Borrelia burgdorferi sensu lato, Anaplasma-Ehrlichia, y Babesia-Theileria. Cada uno de los productos de las reacciones en cadena de la polimerasa fue sometido a hibridaciones en línea reversa utilizando sondas para cada grupo en cuestión, así como específicas para las principales especies de estos. Las garrapatas estudiadas pertenecían a las especies Dermacentor (Anocentor) nitens (60 por ciento), Amblyomma cajennense (38 por ciento) y Rhipicephalus (Boophilus) microplus (2 por ciento). Se detectaron 7 garrapatas Dermacentor (Anocentor) nitens infectadas con bacterias del grupo Anaplasma/Ehrlichia, y no se pudo identificar la especie en cuestión con las sondas utilizadas. Una de estas garrapatas estaba además coinfectada con Babesia bovis. Se sugiere la circulación de una nueva especie de Anaplasma o Ehrlichia no reportada antes en Cuba, por lo que se necesita estudiar un número mayor de garrapatas, así como la incorporación de nuevas sondas en la hibridación en línea reversa u otras metodologías que permitan conocer con exactitud las especies que pudiesen afectar hoy día los caballos domésticos.

At present, there are several tick-borne emerging pathogen species of medical and veterinary importance. Few studies on these agents and its diseases have been made in Cuba. To determine the presence of some of these pathogens in Cuban ticks existing in the equine cattle. Ninety five ticks collected from domestic use horses were processed, preserved in alcohol and taxonomically identified according to the set classifications. Their DNA was extracted and subjected to several polymerase chain reactions with specific primers for microbial groups Borrelia burgdorferi sensu lato, Anaplasma-Ehrlichia, y Babesia-Theileria. Each of the products from polymerase chain reactions underwent reverse line blot hybridation using probes for each group as well as specific probes for the main species included in these groups. The studied ticks belonged to Dermacentor (Anocentor) nitens (60 percent), Amblyomma cajennense (38 percent) y Rhipicephalus (Boophilus) microplus (2 percent). Seven Dermacentor (Anocentor) nitens ticks infested with Anaplasma/Ehrlichia bacteria were detected but the species in question could not be detected by the used probes. One of these ticks was also co-infested with Babesia bovis. It is suggested that a new species of Anaplasma o Ehrlichia, not reported in Cuba before now, is circulating, so studying a higher number of ticks is needed and new probes in reverse line blot hybridation or other methodologies must be incorporated to allow exactly determining the species that may affect the Cuban domestic horses at present.

Identification of human papillomavirus in vulvar intraepithelial neoplasia / 临床检验杂志

Objective To evaluate the rate and types of human papillomavirus (HPV) in vulvar intraepithelial neoplasia (VIN).Methods We detected HPV DNA in 67 lesion tissues collected from 40 VIN patients with PCR based reverse line blot hybridization and DNA sequencing. The PCR using GP5/GP6 primers in HPV L1 region resulted in a 150-bp fragment. When the PCR did not amplify the target DNA,another PCR using SPF1/SPF2 primers was performed to amplify the 65-bp fragment.Results HPV DNA amplified with primers GP5/GP6 was positive in 52.2% (35/67) of the lesions. Of the 32 negative lesions,26 (81.2%) were positive for HPV DNA amplified with SPF1/SPF2 primers. The total positive rate was 91.0% (61/67). Ninety percent of the HPV belonged to high risk types. Sequencing data showed that the genotypes of 31 mono-infection lesions were the same as those of the reverse line blot results,yet the sequences in 4 multi-infection samples could not be determined. Of the 26 SPF PCR products,24 could be sequenced. 80.6% (25/31) patients with multiple lesions displayed the same genotype,suggesting HPV in the different lesions from the same patient was monoclonal.Conclusion The high risk type of HPV is associated with vulvar intraepithelial neoplasia and may play an important role in the development of invasive vulvar carcinoma.

Genotyping of Human Papillomavirus in Condyloma Acuminata / 中华皮肤科杂志

Objective To systematically investigate the molecular epidemiological profiles of human papillomavirus (HPV) in patients with condyloma acuminata(CA). Methods Two hundred and one samples of HPV DNA isolated from CA were PCR amplified by the PGMY09/11 primer system. The PCR products were simultaneously hybridized to 37 specific HPV probes immobilized on a nylon strip and then genotyped. All DNA templates were further PCR amplified using HPV 6 and 11 type specific primers for verification. Results All samples were HPV DNA positive consisting of totally 31 genotypes, the types of which were type 11(53.7%, 108/201), 6(43.8%, 88/201), 16(6.5%, 13/201), 52(6.0%, 12/201), 33(5.5%, 11/201), cp6108 (5.5%, 11/201) and 42 (5.0%, 10/201). The samples infected with a single and mixed types of HPV accounted for 60.2% (121/201) and 39.8% (80/201) respectively. Consistent results were found with the detection of HPV6 and 11 between hybridization assay and type-specific PCR. Conclusions At least 31 HPV genotypes are associated with CA. HPV 11 predominates while 68, 40, 54, 67, 73, 82, 35, 64 and 83 are rare in CA. Type cp6108 is detected in CA for the first time with a high prevalence. HPV26, 69, 70, 71,72 and IS39 might be not associated with CA. CA infected with a single and mixed HPV types accounts for 60.2% and 39.8%, respectively.