Brazilian spotted fever serological survey among equids at the Guarapiranga Dam area in the city of São Paulo, Brazil / Investigação sorológica da febre maculosa brasileira entre equídeos na área da represa de Guarapiranga, na cidade de São Paulo, Brasil

In the Guarapiranga dam region located in the metropolitan area of São Paulo, human cases have been reported of Brazilian spotted fever (BSF), a tick-borne disease caused by the bacterium Rickettsia rickettsii. In this area, R. rickettsii is known to be transmitted to humans by Amblyomma aureolatum, a typical dog tick that is not associated with horses. In other BSF-endemic areas, R. rickettsii transmission is associated with Amblyomma sculptum, a tick species that typically infest capybaras and horses. The Guarapiranga Dam bears abundant populations of capybaras and horses. However, since nothing is known about a possible cycle of transmission of R. rickettsii by A. sculptum in this area, this study evaluated such transmission by performing a serosurvey of horses living in the Guarapiranga Dam region. A total of 206 equids living in the margins of the Guarapiranga Dam were serologically tested for antibodies reactive to five Rickettsia species, four of the spotted fever group (R. rickettsii, R. parkeri, R. amblyommatis, R. rhipicephali) and one basal group species, R. bellii. Overall, 171 (83%) equids reacted positively to at least one Rickettsia species. A total of 160 (78%), 123 (60%), 80 (39%), 72 (35%), and 71 (34%), equid sera reacted to R. bellii, R. rickettsii, R. parkeri, R. rhipicephali, and R. amblyommatis, respectively, with endpoint titers ranging from 64 to 1024 for R. bellii, and 64 to 512 for the remaining four Rickettsia species. Endpoint titers to R. bellii (median: 256) was significantly higher (P<0.05) than the endpoint titers to the other four Rickettsia species, for which the median values varied from 64 to 128. A total of 65 (32%) equid sera showed endpoint titers to R. bellii at least 4-fold higher than those to any of the other four antigens, indicating that they have been exposed to R. bellii or a very closely related species. Our results provide serological evidence that the sampled equids were not frequently exposed to R. rickettsii-infected ticks. Since horses are a highly suitable sentinel for R. rickettsii transmission by A. sculptum, we conclude that this tick species has no epidemiological role in the transmission of R. rickettsii in the BSF-endemic area of the Guarapiranga Dam in the metropolitan area of São Paulo.(AU)

Na região da represa de Guarapiranga localizada na área metropolitana de São Paulo, têm sido relatados casos humanos de Febre Maculosa Brasileira (FMB), uma doença transmitida por carrapatos causada pela bactéria Rickettsia rickettsii. Nesta área de estudo, R. rickettsii é conhecida por ser transmitida aos seres humanos pelo Amblyomma aureolatum, um carrapato de cão que não está associado a cavalos. Em outras áreas endêmicas da FMB, a transmissão de R. rickettsii está associada ao Amblyomma sculptum, uma espécie de carrapato que normalmente infesta capivaras e cavalos. A represa de Guarapiranga possui populações abundantes de capivaras e cavalos; no entanto, como nada se sabe sobre um possível ciclo de transmissão de R. rickettsii por A. sculptum nessa área, este estudo avaliou essa transmissão realizando um levantamento sorológico em cavalos que vivem na região da represa de Guarapiranga. Um total de 206 equídeos que vivem nas margens da represa de Guarapiranga foram testados sorologicamente para cinco espécies de Rickettsia, sendo quatro do grupo da FMB (R. rickettsii, R. parkeri, R. amblyommatis, R. rhipicephali) e um do grupo basal (R. bellii). No geral, 171 (83%) equídeos reagiram positivamente a pelo menos uma espécie de Rickettsia. Um total de 160 (78%), 123 (60%), 80 (39%), 72 (35%) e 71 (34%), reagiram a R. bellii, R. rickettsii, R. parkeri, R. rhipicephali e R. amblyommatis, respectivamente, com títulos finais variando de 64 a 1024 para R. bellii e 64 a 512 para as quatro espécies restantes de Rickettsia. Os títulos finais para R. bellii (mediana: 256) foram significativamente maiores (P <0,05) do que os títulos para as outras quatro espécies de Rickettsia, para os quais os valores medianos variaram de 64 a 128. Um total de 65 (32%) equideos, os soros mostraram títulos finais para R. bellii pelo menos quatro vezes maior que os de qualquer um dos outros quatro antígenos, indicando que eles foram expostos a R. bellii ou a uma espécie muito próxima. Os resultados obtidos fornecem evidências sorológicas de que os equídeos amostrados não eram frequentemente expostos a carrapatos infectados por R. rickettsii. Como os cavalos são um sentinela altamente adequado para a transmissão de R. rickettsiipor A. sculptum, a conclusão obtida foi que essa espécie de carrapato não tem papel epidemiológico na transmissão da bactéria na área endêmica de FMB da represa de Guarapiranga na região metropolitana de São Paulo.(AU)

Rickettsia spp., Ehrlichia spp. e Anaplasma spp. em carrapatos de vida livre nas mesorregiões Sul Fluminense e Metropolitana do Rio de Janeiro, RJ / Rickettsia spp., Ehrlichia spp. and Anaplasma spp. in free-living ticks of mesoregions South Fluminense and Metropolitan area of Rio de Janeiro, RJ

Os carrapatos são ectoparasitas obrigatórios e vetores de agentes patogênicos como bactérias, parasitos e vírus. O presente estudo teve como objetivo identificar a presença de bactérias dos gêneros Rickettsia, Ehrlichia e Anaplasma em carrapatos de vida livre coletados em cinco áreas, localizadas nas mesorregiões Sul Fluminense e Metropolitana do Rio de Janeiro. Foram coletados 9.353 carrapatos distribuídos em 372 pools. A análise dos dados pelo método PCR-RFLP indicou que as bandas verificadas na análise eram de Rickettsia bellii em 0,25% dos carrapatos coletados de duas áreas. A pesquisa molecular para os gêneros Ehrlichia e Anaplasma revelou resultados negativos para ambos os gêneros. A presença de genoma de R. bellii em carrapatos sugere a importância da execução de novas pesquisas com o intuito de entender a epidemiologia dos agentes estudados na região.

Ticks are obligate ectoparasites and vectors of several bacterial, parasitic and viral pathogens. This study aimed to identify bacteria of the Rickettsia, Ehrlichia and Anaplasma genera in free-living ticks, collected in five areas located in both South Fluminense and Metropolitan mesoregions of Rio de Janeiro state. We collected a total of 9,353 ticks which were distributed in 372 pools. Data analysis using the PCR-RFLP method showed that the bands observed in the analysis are of the type Rickettsia bellii. The positivity level to R. bellii found in this study was 0.25%. The molecular search for Ehrlichia and Anaplasma genera revealed negative results for both genera. The presence of Rickettsiae DNA in the Rocky Mountain Spotted Fever group in ticks suggests the importance of undertaking new research in order to understand the epidemiology of the agents.

Detection of Rickettsia bellii and Rickettsia amblyommii in Amblyomma longirostre (Acari: Ixodidae) from Bahia state, Northeast Brazil

Studies investigating rickettsial infections in ticks parasitizing wild animals in the Northeast region of Brazil have been confined to the detection of Rickettsia amblyommii in immature stages of Amblyomma longirostre collected from birds in the state of Bahia, and in immatures and females of Amblyomma auriculariumcollected from the striped hog-nosed skunk (Conepatus semistriatus) and armadillos (Euphractus sexcinctus) in the state of Pernambuco. The current study extends the distribution of R. amblyommii (strain Aranha), which was detected in A. longirostre collected from the thin-spined porcupine Chaetomys subspinosus and the hairy dwarf porcupine Coendou insidiosus. In addition, we report the first detection of Rickettsia bellii in adults of A. longirostre collected from C. insidiosus in the state of Bahia.

Environmental infestation and rickettsial infection in ticks in an area endemic for brazilian spotted fever / Infestação ambiental e infecção por rickéttsias em carrapatos de área endêmica para Febre Maculosa Brasileira

Brazilian spotted fever (BSF), caused by Rickettsia rickettsii, is endemic in the municipality of Americana, southeastern Brazil, where the disease is transmitted by the tick Amblyomma cajennense. This study evaluated the tick fauna and rickettsial infection in free-living ticks that were captured monthly using dry ice traps in areas endemic for BSF in Americana, from July 2009 to June 2010. Two tick species were captured: A. cajennense (6,122 larvae; 4,265 nymphs; 2,355 adults) and Amblyomma dubitatum (7,814 larvae; 3,364 nymphs; 1,193 adults). The immature stages of A. cajennense and A. dubitatum had similar distribution through the 12-month period, with larvae of both species collected in highest numbers between April and July, and nymphs between June and October. The highest numbers of A. cajennense adults were collected between October and December, whereas A. dubitatum adults were collected in relatively similar numbers throughout the 12-month period. Rickettsial infection was evaluated by means of PCR in 1,157 A. cajennense and 1,040 A. dubitatum ticks; only 41 (3.9%) A. dubitatum were found to be infected by Rickettsia bellii. The present study showed that the areas of Americana that are endemic for BSF are characterized by high environmental burdens of A. cajennense and A. dubitatum.

A Febre Maculosa Brasileira (FMB) é uma antropozoonose endêmica no município de Americana/SP, causada pela bactéria Rickettsia rickettsii e transmitida pelo carrapato Amblyomma cajennense. Este estudo avaliou a fauna de carrapatos e a infecção por riquétsias em carrapatos de vida livre capturados mensalmente com armadilhas de CO2, em áreas de risco para FMB de Americana, de julho de 2009 a junho de 2010. Duas espécies foram capturadas, A. cajennense (6.122 larvas; 4.265 ninfas; 2.355 adultos) e Amblyomma dubitatum (7.814 larvas; 3.364 ninfas; 1.193 adultos). Os estágios imaturos de A. cajennense e A. dubitatum apresentaram uma distribuição anual semelhante, com larvas de ambas as espécies sendo coletadas em maior número no período de abril a julho e ninfas de junho a outubro. Maior número de adultos de A. cajennense foi coletado de outubro a dezembro, enquanto que os adultos de A. dubitatum foram coletados em número relativamente semelhante durante todo o ano. A infecção por Rickettsia foi avaliada pela PCR em 1157 carrapatos A. cajennense e 1040 A. dubitatum, com apenas 41 (3,9%) A. dubitatum infectados com Rickettsia bellii. Este estudo demonstrou que as áreas de risco para FMB de Americana são caracterizadas por elevadas infestações ambientais de A. cajennense e A. dubitatum.

Pesquisa de Rickettsia spp em carrapatos Amblyomma cajennense e Amblyomma dubitatum no Estado de São Paulo / Survey of Rickettsia spp in the ticks Amblyomma cajennense and Amblyomma dubitatum in the State of São Paulo

Foi pesquisada a presença de riquétsias em 3.545 carrapatos Amblyomma cajennense e 2.666 Amblyomma dubitatum. Através do teste de hemolinfa, reação em cadeia pela polimerase e isolamento de rickettsia em cultivo celular, todos os Amblyomma cajennense foram negativos, sendo que 634 (23,8 por cento) Amblyomma dubitatum mostraram-se infectados com Rickettsia bellii.

The presence of rickettsial infection was surveyed in 3,545 Amblyomma cajennense ticks and 2,666 Amblyomma dubitatum ticks. Using the hemolymph test, polymerase chain reaction and isolation of Rickettsia in cell cultures, all of the Amblyomma cajennense were negative, whereas 634 (23.8 percent) of the Amblyomma dubitatum ticks were shown to be infected with Rickettsia bellii.

Aislamiento de Rickettsia bellii a partir de Garrapatasamblyomma ovale y Amblyomma incisum procedentes del sur de Brasil / Isolation of Rickettsia bellii from Amblyomma ovale and Amblyomma incisum ticks from southern Brazil

Amblyomma incisum collected in the state of São Paulo. Materials and methods. Adult,free-living A. ovale and A. incisum were collected in an Atlantic rainforest area in the stateof São Paulo, Brazil. Each tick was tested using the hemolymph assay; samples from positiveticks were placed in shell vials in order to isolate rickettsiae and subsequently grown in Verocells. Amplification of three rickettsial genes (gltA, htrA and ompA) was attempted usingpolymerase chain reaction (PCR) for each isolate obtained. Amplicons were subsequentlysequenced. Results. A total of 388 A. incisum and 50 A. ovale were collected. Only one A.incisum and one A. ovale were hemolymph-test positive. Rickettsiae were successfullyisolated from these ticks; however establishment in Vero cell culture was successful only forthe isolate from A. ovale. Bacterial contamination in the first cell passage of the A. incisumisolate precluded successful isolation of the organism. PCR products were obtained with thegltA and htrA primers for the two isolates, but no product was obtained with the ompAprimers. By BLAST analysis, partial gltA and htrA sequences of isolates from A. ovale and A.incisum were similar to the corresponding sequences of R. bellii. Conclusions. This is thefirst report of R. bellii infecting A. incisum and the first successful isolation from A. ovale.