Marine leech Ozobranchus margoi parasitizing loggerhead turtle (Caretta caretta) in Rio Grande do Sul, Brazil / Sanguessugas Ozobranchus margoi parasitando uma tartaruga cabeçuda (Caretta caretta) no Rio Grande do Sul, Brasil

This paper reports the finding of several Ozobranchus margoi (Annelida: Hirudinea) parasitizing a loggerhead turtle (Caretta caretta) that was found in the municipality of Tavares, state of Rio Grande do Sul, southern Brazil. Since this parasite is considered to be a vector of chelonid herpesvirus 5 (ChHV-5), the leeches collected were tested for the presence of this virus. All the specimens were negative on PCR analysis. Although O. margoi is considered to be a common sea turtle parasite, this is the first official record describing collection of this parasite from a loggerhead turtle in southern Brazil, within the country's subtropical zone. This finding draws attention to the presence of this parasite and to the risk of leech-borne infectious diseases among turtles found along the coast of southern Brazil.

Este artigo relata a descoberta de vários exemplares de Ozobranchus margoi (Annelida Hirudínea) parasitando uma tartaruga cabeçuda (Caretta caretta) encontrada no município de Tavares, Rio Grande do Sul, sul do Brasil. Uma vez que esse parasito é considerado vetor do chelonid herpesvirus 5 (ChHV 5), as sanguessugas foram testadas para a presença deste vírus. Todas as amostras foram negativas pela análise de PCR. Embora o O. margoi seja considerado um parasito comum de tartarugas marinhas, este é o primeiro registro oficial que descreve a coleta deste parasita em uma tartaruga cabeçuda no sul do Brasil, dentro da zona subtropical do país. Este achado chama a atenção para a presença deste parasita e para o risco de sanguessugas transmitirem doenças infecciosas em tartarugas no litoral sul do Brasil.

Clonagem, expressão e caracterização de um inibidor de agregação plaquetária proveniente dos complexos salivares de sanguessugas Haementeria depressa / Cloning, expression and characterization of a platelet aggregation inhibitor from Haementeria depressa leech salivary complexes

Animais hematófagos possuem em sua saliva substâncias que permitem a fluidez do sangue, para o sucesso de sua alimentação. Com isso, têm sido descritos diversos componentes com atividades nos diferentes processos hemostáticos (coagulação, fibrinólise e agregação plaquetária). O complexo salivar da sanguessuga Haementeria depressa vem sendo estudado através de bioquímica clássica e análises transcriptômica e proteômica deste tecido determinaram o perfil dos transcritos e das proteínas produzidas. Dentre os transcritos mais abundantes foram encontrados três clones (H06A09, H06A02 e L02F02) que apresentaram 45%, 87% e 94% de similaridade ao LAPP, um inibidor de agregação plaquetária da sanguessuga Haementeria officinallis, a produção destes componentes pelo tecido foi confirmada pela análise proteômica. O LAPP é um inibidor que age pela via do colágeno e possui cerca de 14 kDa e pI de 4,0 e inibe a ligação da plaqueta ao colágeno tanto pelo epítopo do FvW quanto pelo domínio a2b1. Assim, o objetivo do presente trabalho foi clonar, expressar e caracterizar a proteína recombinante ativa, a partir do clone H06A09 para estudos de atividade desta molécula. Para obter a proteína recombinante de interesse inicialmente a clonagem do transcrito foi realizada com sucesso em vetor pAE, porém, a expressão em sistema procarioto apresentou alguns obstáculos já que a molécula não tinha atividade. Uma nova estratégia foi proposta, sendo realizada clonagem em vetor pPIC9K e expressão em sistema eucariótico (leveduras Pichia pastoris - GS115). Desta forma, o presente trabalho caracteriza o primeiro inibidor recombinante de agregação plaquetária pela via do colágeno proveniente de sanguessugas Haementeria depressa, e comprova que apesar de apresentar 45% de similaridade estrutural ao LAPP é um inibidor com características funcionais diferentes, e com grande potencial a ser estudado.

Hematophagous animals have in their saliva substances that maintain the blood fluidity to the success of their feeding. Therefore, components have been described by their activities in the hemostatic processes (coagulation, fibrinolysis and platelet aggregation).The salivary complex of Haementaria depressa leech has been studied by classical biochemical and transcriptomic and proteomic analysis of this tissue determined the profile of transcripts and proteins produced by it. Among the most abundant transcripts were found three clones (H06A09, H06A02 e L02F02) that showed 45%, 87% e 94% of similarity to LAPP, an inhibitor of platelet aggregation from Haementeria officinallis, the components production was confirmed by proteomic analysis. LAPP is a inhibitor that acts by collagen pathway and has around 14 kDa and pI of 4.0, and inhibits the binding of platelet to collagen by both the epitope domain of vWF as the a2b1. Thereby, the aim of this study was to clone, express and characterize the active recombinant protein from the clone H06A09 for studies of activity of this molecule. To obtain the recombinant protein initially cloning of transcript was successfully performed in pAE vector, however, the protein expressed in prokaryotic system presented some obstacles not presenting activity. A new strategy was proposed, being held in pPIC9K vector and expression in eukaryotic system - yeast Pichia pastoris (GS115). Thus, this study characterized the first recombinant inhibitor of platelet aggregation through collagen pathway from Haementeria depressa leeches, and proves that despite having 45% structural similarity to the LAPP is an inhibitor with different functional characteristics, and great potential to be studied.

Biodiversity and ecology of Hirudinea (Annelida) from the Natural Reserve of Isla Martín García, Río de la Plata, Argentina / A Biodiversidade e a Ecologia de Hirudinea (Annelida) da Reserva Natural da Ilha Martín García, na Argentina

The Island of Martin Garcia lies at the confluence of the Uruguay and Paraná Rivers (upper Río de la Plata). This island is an outcrop of the crystalline basement. Due to basalt exploitation the island exhibits several ponds covered by carpets of free-floating macrophytes. Seven major environmental variables were measured: water and air temperature, percentage of oxygen saturation, dissolved oxygen, electrical conductivity, total dissolved solids and pH. Eleven leech species were found, Helobdella striata, H. diploides, H. adiastola and H. hyalina were new records. UPGMA clustering of species based on their occurrence in different ecological conditions revealed three main species groups. Canonical Correspondence Analysis (CCA) explained 97.2 percent of the correlation between species and environmental variables. H. triserialis shows the widest range of tolerance, H. hyalina shows positive relationships to conductivity; H. diploides shows a high correlation with dissolved oxygen, H. striata, H. lineata, and S. similis are negatively correlated with water temperature, and H. simplex is positively correlated with pH. Relationships between the species richness (S) and the sampling sites were negatively correlated with water temperature and positively correlated with dissolved oxygen. Leech biodiversity from the water bodies of Martín García Island, shows a great diversity of species and a wide plasticity regarding the characteristics of the environmental factors considered.

A Ilha Martín García encontra-se na afluência dos Rios Uruguay e Paraná (no Rio de la Plata superior) e constitui um afloramento do maciço cristalino de Brasília. Por causa da exploração do basalto, formaram-se lacunas que apresentam tapetes de vegetação flutuantes e macrófitas enraizadas. Mediram-se sete variáveis físico-químicas da água: temperatura do ar e da água, porcentagem de saturação de oxigênio, oxigênio dissolvido, condutividade elétrica, sólidos totais dissolvidos e pH. Encontraram-se onze espécies de sanguessuga, como Helobdella striata, H. diploides, H. adiastola e H. hyalina que constituem novos registros para a ilha. A análise de agrupamento baseado na ocorrência das espécies em condições ecológicas diferentes revelou três grupos principais. A análise canônica da correspondência sugere que a distribuição das espécies relaciona-se às variáveis ambientais consideradas, 97,2 por cento da correlação entre as espécies e as variáveis se distribui no eixo dois do diagrama de ordenamento. As variáveis com maior flutuação foram a condutividade e o pH. H. triserialis foi a espécie mais tolerante às variáveis ambientais; H. hyalina se relacionou positivamente com a condutividade; H. diploides teve alta correlação com o oxigênio dissolvido; H. striata, H. lineata e Semiscolex similis relacionaram-se negativamente com a temperatura da água e H. simplex, positivamente com o pH. As relações entre a riqueza de espécies (S) e os lugares de amostras foram negativas com a temperatura da água e positivas com o oxigênio dissolvido. Os corpos da água da Ilha Martín García mostram uma grande biodiversidade de espécies de sanguessuga, assim como uma ampla ductilidade com relação aos fatores ambientais considerados.