Isolation and characterization of bacteria associated with silkworm gut under antibiotic-treated larval feeding

Abstract The impact of antibiotics on growth, cocoon production was assessed in addition to isolation and characterization of bacteria associated with silkworm gut of infected larvae. Larval rearing was maintained at recommended conditions of temperature and humidity. Silkworm larvae showing abnormal symptoms were collected from the control group and dissected for gut collection. Bacteria were isolated from the gut content by spreading on agar plates and incubated at 37 °C for 48 hrs. Bacterial identification and phylogenetic analysis were carried out by 16S rRNA gene sequencing. The isolated bacteria were subjected to antimicrobial susceptibility test (disc diffusion methods) by using Penicillin (10 µg/mL), Tetracycline (30 µg/mL), Amoxicillin (25 µg/mL), Ampicillin (10 µg/mL), and Erythromycin (15 µg/mL). All isolated strains showed positive results for the catalase test. We isolated and identified bacterial strains (n = 06) from the gut of healthy and diseased silkworm larvae. Based on the 16S rRNA gene sequence, isolated bacteria showed close relation with Serratia, Bacillus, and Pseudomonas spp. Notably, 83.3% of strains were resistant to Penicillin, Tetracycline, Amoxicillin, Ampicillin, and Erythromycin but 16.6% showed antibiotic susceptibility to the above-mentioned commonly used antibiotics. Silkworm larvae fed on penicillin-treated leaves showed significant improvement in larval weight, larval length, and cocoon production. Significantly higher larval weight (6.88g), larval length (5.84cm), and cocoon weight (1.33g) were recorded for larvae fed on leaves treated with penicillin as compared to other antibiotics. Isolated bacterial strains showed close relation with Serratia spp., Bacillus spp. and Pseudomonas spp.

Resumo O impacto dos antibióticos no crescimento e na produção do casulo foi avaliado, além do isolamento e caracterização das bactérias associadas ao intestino de larvas infectadas do bicho-da-seda. A criação das larvas foi mantida nas condições recomendadas de temperatura e umidade. As larvas do bicho-da-seda com sintomas anormais foram coletadas do grupo controle e dissecadas para coleta do intestino. As bactérias foram isoladas do conteúdo intestinal por espalhamento em placas de ágar e incubadas a 37° C durante 48 horas. A identificação bacteriana e a análise filogenética foram realizadas pelo sequenciamento do gene 16S rRNA. As bactérias isoladas foram submetidas a teste de sensibilidade antimicrobiana (métodos de difusão em disco) com penicilina (10 µg / mL), tetraciclina (30 µg / mL), amoxicilina (25 µg / mL), ampicilina (10 µg / mL) e eritromicina (15 µg / mL). Todas as cepas isoladas apresentaram resultados positivos para o teste da catalase. Isolamos e identificamos cepas bacterianas (n = 06) do intestino de larvas de bicho-da-seda saudáveis e doentes. Com base na sequência do gene 16S rRNA, as bactérias isoladas mostraram estreita relação com Serratia, Bacillus e Pseudomonas spp. Notavelmente, 83,3% das cepas eram resistentes a penicilina, tetraciclina, amoxicilina, ampicilina e eritromicina, mas 16,6% mostraram suscetibilidade aos antibióticos comumente usados mencionados acima. As larvas do bicho-da-seda alimentadas com folhas tratadas com penicilina apresentaram melhora significativa no peso larval, comprimento larval e produção de casulo. Peso larval significativamente maior (6,88g), comprimento larval (5,84cm) e peso do casulo (1,33g) foram registrados para larvas alimentadas com folhas tratadas com penicilina, em comparação com outros antibióticos. Cepas bacterianas isoladas mostraram estreita relação com Serratia spp., Bacillus spp. e Pseudomonas spp.

Isolation and characterization of bacteria associated with silkworm gut under antibiotic-treated larval feeding / Isolamento e caracterização de bactérias associadas ao trato intestinal do bicho-da-seda sob alimentação larval tratada com antibióticos

Abstract The impact of antibiotics on growth, cocoon production was assessed in addition to isolation and characterization of bacteria associated with silkworm gut of infected larvae. Larval rearing was maintained at recommended conditions of temperature and humidity. Silkworm larvae showing abnormal symptoms were collected from the control group and dissected for gut collection. Bacteria were isolated from the gut content by spreading on agar plates and incubated at 37 °C for 48 hrs. Bacterial identification and phylogenetic analysis were carried out by 16S rRNA gene sequencing. The isolated bacteria were subjected to antimicrobial susceptibility test (disc diffusion methods) by using Penicillin (10 µg/mL), Tetracycline (30 µg/mL), Amoxicillin (25 µg/mL), Ampicillin (10 µg/mL), and Erythromycin (15 µg/mL). All isolated strains showed positive results for the catalase test. We isolated and identified bacterial strains (n = 06) from the gut of healthy and diseased silkworm larvae. Based on the 16S rRNA gene sequence, isolated bacteria showed close relation with Serratia, Bacillus, and Pseudomonas spp. Notably, 83.3% of strains were resistant to Penicillin, Tetracycline, Amoxicillin, Ampicillin, and Erythromycin but 16.6% showed antibiotic susceptibility to the above-mentioned commonly used antibiotics. Silkworm larvae fed on penicillin-treated leaves showed significant improvement in larval weight, larval length, and cocoon production. Significantly higher larval weight (6.88g), larval length (5.84cm), and cocoon weight (1.33g) were recorded for larvae fed on leaves treated with penicillin as compared to other antibiotics. Isolated bacterial strains showed close relation with Serratia spp., Bacillus spp. and Pseudomonas spp.

Resumo O impacto dos antibióticos no crescimento e na produção do casulo foi avaliado, além do isolamento e caracterização das bactérias associadas ao intestino de larvas infectadas do bicho-da-seda. A criação das larvas foi mantida nas condições recomendadas de temperatura e umidade. As larvas do bicho-da-seda com sintomas anormais foram coletadas do grupo controle e dissecadas para coleta do intestino. As bactérias foram isoladas do conteúdo intestinal por espalhamento em placas de ágar e incubadas a 37° C durante 48 horas. A identificação bacteriana e a análise filogenética foram realizadas pelo sequenciamento do gene 16S rRNA. As bactérias isoladas foram submetidas a teste de sensibilidade antimicrobiana (métodos de difusão em disco) com penicilina (10 µg / mL), tetraciclina (30 µg / mL), amoxicilina (25 µg / mL), ampicilina (10 µg / mL) e eritromicina (15 µg / mL). Todas as cepas isoladas apresentaram resultados positivos para o teste da catalase. Isolamos e identificamos cepas bacterianas (n = 06) do intestino de larvas de bicho-da-seda saudáveis e doentes. Com base na sequência do gene 16S rRNA, as bactérias isoladas mostraram estreita relação com Serratia, Bacillus e Pseudomonas spp. Notavelmente, 83,3% das cepas eram resistentes a penicilina, tetraciclina, amoxicilina, ampicilina e eritromicina, mas 16,6% mostraram suscetibilidade aos antibióticos comumente usados mencionados acima. As larvas do bicho-da-seda alimentadas com folhas tratadas com penicilina apresentaram melhora significativa no peso larval, comprimento larval e produção de casulo. Peso larval significativamente maior (6,88g), comprimento larval (5,84cm) e peso do casulo (1,33g) foram registrados para larvas alimentadas com folhas tratadas com penicilina, em comparação com outros antibióticos. Cepas bacterianas isoladas mostraram estreita relação com Serratia spp., Bacillus spp. e Pseudomonas spp.

Esculent coating of spider silk enhanced the preservation and shelf life of apricot / A cobertura escamada de seda de aranha aumentou a preservação e a vida útil do damasco

Abstract According to the Food and Agriculture Organization (FAO), roughly one-third of the total food produced is lost globally. The major cause of this wastage is the perishability of fruits and vegetables. Therefore, researchers have endeavored to develop an effective preservation technique. Our study explored the potential application of spider silk as an odourless and edible preservative coating for fruits. The spider silk was collected from spiders reared in the laboratory, following by degumming and dissolution to formulate the silk solution. For this study, apricots were selected as the model fruit. The apricots were dip coated with the formulated silk solution and allowed to dry. In order to enhance the beta sheet content of the silk coating, the fruits were exposed to water annealing for varying intervals of time under vacuum condition. The effect of silk coating and water annealing time period on preservation of fruits was then evaluated morphologically and gravimetrically. The results showed that the fruits, which were used as control, exhibited a greater degree of water loss and suffered from fungal attack. In contrast, the silk coated fruits showed less water loss and were protected from fungal attack. Therefore, the study provides compelling evidence regarding the application of spider silk as a preservative coating.

Resumo Segundo a Organização para Alimentação e Agricultura (FAO), cerca de um terço do total de alimentos produzidos é perdido globalmente. A principal causa deste desperdício é a perecibilidade das frutas e legumes. Portanto, os pesquisadores têm se esforçado para desenvolver uma técnica de preservação eficaz. Nosso estudo explorou a potencial aplicação de seda de aranha como um revestimento conservante inodoro e comestível para frutas. A seda da aranha foi coletada de aranhas criadas em laboratório, seguindo-se a degomagem e dissolução para formular a solução de seda. Para este estudo, os damascos foram selecionados como fruto modelo. Os damascos foram revestidos por imersão com a solução de seda formulada e deixados secar. A fim de aumentar o teor de folhas beta do revestimento de seda, os frutos foram expostos a recozimento de água durante vários intervalos de tempo sob condições de vácuo. O efeito do tempo de recobrimento de seda e recozimento de água na preservação de frutos foi então avaliado morfologicamente e gravimetricamente. Os resultados mostraram que os frutos, utilizados como controle, apresentaram maior grau de perda de água e sofreram ataque fúngico. Em contraste, os frutos revestidos de seda mostraram menos perda de água e foram protegidos contra ataques fúngicos. Portanto, o estudo fornece evidências convincentes sobre a aplicação de seda de aranha como um revestimento conservante.

Knowledge, attitude and practice of echinococcosis prevention and control, and their influencing factors among residents living in Seda County, Sichuan Province / 中国血吸虫病防治杂志

Objective To understand the status of knowledge, attitude and practice on echinococcosis prevention and control and investigate their influencing factors among residents living in Seda County of Sichuan Province, so as to provide a scientific basis for the further implementation of health education interventions in the county. Methods A multi-stage stratified random sampling method was employed on September 2018. Ten townships were randomly sampled, and 2 to 3 administrative villages were randomly sampled from each township. Then, 20 to 40 households were randomly sampled from each village, and 1 to 2 villagers were investigated in each household. The knowledge, attitude and practice on echinococcosis prevention and control were investigated using a household questionnaire survey, and the factors affecting the qualification of echinococcosis prevention and control knowledge were identified using chi-square test and logistic regression analysis. Results A total of 760 questionnaires were assigned, and 748 effective questionnaires were recovered, with a recovery rate of 98.42%. The overall qualification rate of echinococcosis prevention and control knowledge was 56.42% (422/748) in residents living in Seda County, and the awareness of the question “How to get echinococcosis?” was only 48.40%. The proportion of subjects with a positive attitude towards echinococcosis prevention and control was 64.71% to 94.79%, and the rate of corrected echinococcosis prevention and control behaviors was 10.40% to 82.45%. Univariate analysis showed that factors affecting the qualification rate of echinococcosis prevention and control knowledge included gender, occupation, education level, frequency of echinococcosis screening and frequency of health education (all P < 0.05), and binary logistic regression analysis showed that women, herdsmen as the primary occupation, an education level of primary school and below, absence of echinococcosis screening and absence of health education were factors responsible for the unqualified awareness of echinococcosis prevention and control knowledge (all P < 0.05). Conclusions There is a low awareness rate of echinococcosis prevention and control knowledge and a low proportion of corrected echinococcosis prevention and control behaviors in residents living in Seda County, Sichuan Province. Multiple forms of health education activities pertaining to echinococcosis prevention and control are needed with adaptation to local circumstance, and implementation of appropriate behavioral interventions is recommended.

The action of sericin protein on initial nerve repair, associated or not with swimming in wistar rats / Ação da proteína sericina no reparo nervoso inicial, associada ou não à natação, em ratos wistar / Acción de la proteína sericina en la reparación nerviosa inicial, asociada o no a la natación, en ratones wistar

ABSTRACT Objective: To analyze the effects of sericin treatment, associated or not with swimming with load exercise, on initial sciatic nerve repair after compression in Wistar rats. Methods: Forty animals were divided into five groups: control, injury, injury-sericin, injury-swimming and injury-sericin-swimming. During the axonotmesis procedure, the sericin was applied to the injury-sericin and injury-sericin-swimming groups. The injury-swimming and injury-sericin-swimming groups performed the swimming with load exercise for five days, beginning on the third postoperative day (PO), and were evaluated for function, nociception and allodynia. Euthanasia was performed on the 8th PO day and fragments of the nerve were collected and prepared for quantitative and descriptive analysis in relation to the total amount of viable nerve fibers and non-viable nerve fibers, nerve fiber diameter, axon diameter and myelin sheath thickness. Results: There was no significant improvement in the sciatic functional index up to the eighth day. The Von Frey test of the surgical scar and plantar fascia indicated a reduction in pain and allodynia for the injury-swimming and injury-sericin-swimming groups. The morphological analysis presented similar characteristics in the injury-sericin, injury-swimming and injury-sericin-swimming groups, but there was a significant difference in the number of smaller non-viable nerve fibers in the injury-swimming and injury-sericin-swimming groups as compared to the others. Conclusions: Isolated sericin protein presented proinflammatory characteristics. There was improvement of allodynia and a decrease in the pain at the site of the surgical incision, possibly linked to an aquatic effect. There was no acceleration of nerve repair on the eighth day after the injury. Level of Evidence I; High quality randomized clinical trial with or without statistically significant difference, but with narrow confidence intervals.

RESUMO Objetivo: Analisar os efeitos do tratamento da sericina, associada ou não ao exercício de natação com sobrecarga, sobre o reparo inicial do nervo isquiático após compressão em ratos Wistar. Métodos: Foram separados 40 animais em cinco grupos, sendo eles: controle; lesão; lesão-sericina; lesão-natação e lesão-sericina-natação. Durante o procedimento de axonotmese, a sericina foi aplicada sobre a lesão nos grupos lesão-sericina e lesão-sericina-natação. Os grupos lesão-natação e lesão-sericina-natação realizaram o exercício de natação com sobrecarga durante cinco dias, iniciando no terceiro dia pós-operatório (PO), sendo avaliados quanto à função, nocicepção e alodinia. A eutanásia foi realizada no oitavo dia PO, sendo que dois fragmentos do nervo foram coletados e preparados para análise quantitativa e descritiva em relação a quantidade total de fibras nervosas viáveis, não viáveis, diâmetro da fibra nervosa, do axônio e espessura da bainha de mielina. Resultados: No índice funcional isquiático não houve melhora significativa até o oitavo dia. O teste de Von Frey na cicatriz cirúrgica e fáscia plantar indicaram redução do quadro álgico e alodinia para os grupos lesão-natação e lesão-sericina-natação. A análise morfológica apresentou características semelhantes nos grupos lesão-sericina, lesão-natação e lesão-sericina-natação, porém houve diferença significativa das fibras nervosas não viáveis menores nos grupos lesão-natação e lesão-sericina-natação em relação aos demais. Conclusões: A proteína sericina isolada apresentou características pró-inflamatórias. Houve melhora da alodinia e diminuição do quadro álgico no local da incisão cirúrgica relacionadas a possível efeito aquático. Não houve aceleração do reparo nervoso no oitavo dia após a lesão. Nível de Evidência I; Estudo clínico randomizado de alta qualidade com ou sem diferença estatisticamente significante, mas com intervalos de confiança estreitos.

RESUMEN Objetivo: Analizar los efectos del tratamiento de la sericina, asociada o no al ejercicio de natación con sobrecarga, sobre la reparación inicial del nervio isquiático después de compresión, en ratones Wistar. Métodos: Se separaron 40 animales en cinco grupos, siendo: control; lesión; lesión-sericina; lesión-natación y lesión-sericina-natación. Durante el procedimiento de axonotmesis, la sericina fue aplicada sobre la lesión en los grupos lesión-sericina y lesión-sericina-natación. Los grupos lesión-natación y lesión-sericina-natación realizaron el ejercicio de natación con sobrecarga durante cinco días, iniciándose en el tercer día postoperatorio (PO), siendo evaluados cuanto a la función, nocicepción y alodinia. La eutanasia fue realizada en el octavo día PO, siendo que dos fragmentos del nervio fueron recolectados y preparados para análisis cuantitativo y descriptivo, con relación a la cantidad total de fibras nerviosas viables, no viables, diámetro de la fibra nerviosa, del axón y espesor de la vaina de mielina. Resultados: En el índice funcional isquiático no hubo mejoría significativa hasta el octavo día. La prueba de "Von Frey" en la cicatriz quirúrgica y la fascia plantar indicaron reducción del cuadro álgico y alodinia, para los grupos lesión-natación y lesión-sericina-natación. El análisis morfológico presentó características similares en los grupos lesión-sericina, lesión-natación y lesión-sericina-natación, pero hubo diferencia significativa de las fibras nerviosas no viables menores en los grupos lesión-natación y lesión-sericina-natación con relación a los demás. Conclusiones: La proteína sericina aislada presentó características proinflamatorias. Hubo mejora de la alodinia y disminución del cuadro álgico en el lugar de la incisión quirúrgica, relacionadas al posible efecto acuático. No hubo aceleración de la reparación nerviosa en el octavo día después de la lesión. Nivel de Evidencia I; Ensayo clínico aleatorizado de alta calidad con o sin diferencia estadísticamente significativa, pero con intervalos de confianza estrechos.

Green manuring with Calotropis procera for the production of coriander in two growing seasons / Adubação verde com Calotropis procera na produção de coentro em duas épocas de cultivo

ABSTRACT The use of spontaneous species of the Caatinga biome can contribute significantly to the nutritional demand of vegetable crops, thereby providing an agroecological and sustainable form of production. The objective of this research was to determine the effects of different biomasses of Calotropis procera (rooster tree) and times of incorporation into the soil of green manure during two growing seasons on the agronomic performance of coriander cv. Verdão produced in Serra Talhada, a semi-arid region of Pernambuco, Brazil. The experimental design was randomized blocks with three replications. The treatments were arranged in a 4 x 4 factorial scheme, with the first factor consisting of biomass amounts of C. procera (5.4, 8.8, 12.2 and 15.6 t ha-1 on a dry basis) and the second by the incorporation times into the soil (0, 10, 20 and 30 days before coriander planting). The evaluated characteristics were plant height, number of stems per plant, yield of green mass and dry mass of shoot. The best productive performance of coriander was observed in amounts of 12.2 (spring) and 8.8 (autumn-winter) t ha-1 C. procera added to the soil, with an ideal incorporation time of 13 (spring) and 23 (autumn-winter) days before sowing of the crop and with larger accumulations of green and dry mass of the shoot being obtained in autumn-winter.

RESUMO O uso de espécies espontâneas do bioma Caatinga pode contribuir de forma significativa no suprimento nutricional demandado pelas hortaliças, sendo uma forma agroecológica e sustentável de produção. O objetivo da pesquisa foi determinar os efeitos de quantidades de biomassa de Calotropis procera (flor-de-seda), de tempos de incorporação ao solo do adubo verde e de duas épocas de cultivo sobre o desempenho agronômico do coentro cv. Verdão produzido em Serra Talhada, semiárido de Pernambuco, Brasil. O delineamento experimental foi em blocos casualizados, com três repetições. Os tratamentos foram arranjados em esquema fatorial 4 x 4, com o primeiro fator constituído por quantidades de biomassa de C. procera (5,4; 8,8; 12,2 e 15,6 t ha-1 em base seca), e o segundo pelos tempos de incorporação ao solo (0, 10, 20 e 30 dias antes do plantio do coentro). As características avaliadas foram altura de plantas, número de hastes por planta, rendimento de massa verde e massa seca da parte aérea. O melhor desempenho produtivo do coentro foi observado nas quantidades 12,2 (primavera) e 8,8 (outono-inverno) t ha-1 de C. procera adicionada ao solo, com um tempo ideal de incorporação de 13 (primavera) e 23 (outono-inverno) dias antes da semeadura da cultura e com maiores acúmulos de massas verde e seca da parte aérea sendo obtidos no outono-inverno.

Ampullae infection of the malpighian tubules of Bombyx mori by Alphabaculovirus / Infecção de células da ampola dos túbulos de malpighi de Bombyx mori pelo Alphabaculovirus

Alphabaculovirus is a genus of the entomopathogenic virus, whose species Bombyx mori nucleopolyhedrovirus (BmNPV) infects the silkworm, Bombyx mori, which is an important insect in the sericulture industry. A geographic isolate of BmNPV was identified in the state of Paraná, Brazil. It was infecting B. mori larvae and various organs and target tissues were identified, however, there was no information about the infection of Malpighian tubules (MT). The MT comprises the excretory system of B. mori and acts in the elimination of toxic substances and in hydroelectrolytic homeostasis. Thus, the present study examined the susceptibility and cytopathology of B. mori MT to BmNPV. To this end, hybrid fifth instar larvae were inoculated with a virus suspension at different days post-inoculation (dpi). MT segments were collected and divided into the ampullae, proximal, medial and distal regions. These were processed for light microscopy and transmission electron analysis. The MT regions revealed differences in susceptibility to BmNPV and the ampullae in its transition area was infected from the sixth dpi; the other regions did not reveal any evidence of infection. The transition area of the ampullae has not been previously described in Lepidoptera and its cytopathology revealed a hypertrophic nucleus with viroplasm, followed by the formation and development of viral polyhedra, which are common characteristics of infections by Alphabaculovirus. Thus, infection of the ampullae of the MT of B. mori by BmNPV, together with other known targets, compromises the metabolic balance of the insect, which results in consequences for silk production and damage to the sericulture sector.

Alphabaculovirus é um gênero de vírus entomopatogênico, cuja espécie Bombyx mori nucleopolyhedrovirus (BmNPV) infecta o bicho-da-seda, Bombyx mori, inseto importante na indústria sericícola. Um isolado geográfico do BmNPV foi identificado no estado do Paraná, Brasil, infectando lagartas de B. mori e vários órgãos e tecidos alvos foram identificados; entretanto, não há informações sobre a infecção do túbulo de Malpighi (TM). O TM compõe o sistema excretor de B. mori, atuando na eliminação de substâncias tóxicas e na homeostase hidroeletrolítica. Assim, o presente estudo, analisou a susceptibilidade e a citopatologia do TM de B. mori ao BmNPV. Para tanto, lagartas híbridas de 5° instar foram inoculadas com uma suspensão viral e em diferentes dias pós-inoculação (dpi), segmentos do TM foram coletados e subdivididos nas regiões da ampola, proximal, média e distal; sendo processados para análises em microscopias de luz e eletrônica de transmissão. As regiões do TM revelaram diferenças na susceptibilidade ao BmNPV e a ampola, na sua área de transição, foi infectada a partir do 6° dpi, já as demais regiões não revelaram quaisquer indícios de infecção. A área de transição da ampola, ainda não havia sido descrita em lepidópteros e sua citopatologia revelou núcleo hipertrófico com viroplasma, seguido da formação e desenvolvimento dos poliedros virais, características comuns das infecções pelo Alphabaculovirus. Assim, a infecção da ampola do TM de B. mori ao BmNPV, somada a de outros alvos conhecidos, compromete o equilíbrio metabólico do inseto, com consequências na produção de seda e prejuízos ao setor sericícola.

Alternative phytosanitary products against to white muscardine in Bombyx mori L. (Lepidoptera: Bombycidae) / Produtos fitossanitários alternativos contra a calcinose em Bombyx mori L. (Lepidoptera: Bombycidae)

This work aimed to evaluate the effects of the products Biogermex®, Agro-mos®, Soil-Set® and Planta Clean® on the development of white muscardine in Bombyx mori. Products have been tested at two stages for effects on biology of caterpillars and on silk production (1), and then they were evaluated to know their potential in the prevention/control of white muscardine (2). Products were sprayed on mulberry leaves (preventive treatment) and also on the integument of silkworms (curative treatment). At the first stage, the products were applied on four consecutive days, in one of the daily feeds. Planta Clean® - curative treatment - and Soil-Set® - preventive treatment - caused mortality in 63.3% and 30% of silk worms, respectively. The fungus Beauveria bassiana was inoculated at the concentration 5 × 107 conidia/mL on the leaves and insects. The products were applied three hours after application on the fungus, in a single application, and also for four days in the other groups. A group of silkworms sprayed only with the fungus served as control. Biogermex® - curative treatment applied once and for four times - was the most effective, reducing mortality by 25 and 26.7%, respectively, as compared with the control group. None of the evaluated products acts preventively against white muscardine.(AU)

Este trabalho objetivou avaliar os efeitos de produtos Biogermex®, Agro-mos®, Soil-Set® e Planta Clean® no desenvolvimento da calcinose branca em Bombyx mori. Os produtos foram testados em duas etapas: efeitos sobre a biologia e produção de seda pela lagarta (1) e, em seguida, em função do seu potencial na prevenção/no controle da calcinose branca (2). Os produtos foram pulverizados sobre as folhas de amoreira (tratamento preventivo) e sobre o tegumento das lagartas (tratamento curativo). Na primeira etapa, os produtos foram aplicados durante quatro dias consecutivos, em uma das alimentações do dia. Planta Clean® - tratamento curativo - e Soil-Set® - tratamento preventivo - causaram mortalidade em 63,3 e 30% das lagartas, respectivamente. O fungo Beauveria bassiana foi inoculado na concentração 5 × 107 conídios/mL sobre folhas e insetos. Os produtos foram aplicados três horas após o fungo, em uma aplicação, e também por quatro dias em outro grupo. Um grupo de lagartas pulverizadas apenas com fungo serviu como controle. Biogermex® - tratamento curativo aplicado uma e quatro vezes - foi o mais eficiente, reduzindo a mortalidade em 25 e 26,7% respectivamente, em relação ao grupo controle. Nenhum dos produtos avaliados atuou de forma preventiva contra muscardina branca.(AU)

Alternative phytosanitary products against to white muscardine in Bombyx mori L. (Lepidoptera: Bombycidae) / Produtos fitossanitários alternativos contra a calcinose em Bombyx mori L. (Lepidoptera: Bombycidae)

This work aimed to evaluate the effects of the products Biogermex®, Agro-mos®, Soil-Set® and Planta Clean® on the development of white muscardine in Bombyx mori. Products have been tested at two stages for effects on biology of caterpillars and on silk production (1), and then they were evaluated to know their potential in the prevention/control of white muscardine (2). Products were sprayed on mulberry leaves (preventive treatment) and also on the integument of silkworms (curative treatment). At the first stage, the products were applied on four consecutive days, in one of the daily feeds. Planta Clean® - curative treatment - and Soil-Set® - preventive treatment - caused mortality in 63.3% and 30% of silk worms, respectively. The fungus Beauveria bassiana was inoculated at the concentration 5 × 107 conidia/mL on the leaves and insects. The products were applied three hours after application on the fungus, in a single application, and also for four days in the other groups. A group of silkworms sprayed only with the fungus served as control. Biogermex® - curative treatment applied once and for four times - was the most effective, reducing mortality by 25 and 26.7%, respectively, as compared with the control group. None of the evaluated products acts preventively against white muscardine.

Este trabalho objetivou avaliar os efeitos de produtos Biogermex®, Agro-mos®, Soil-Set® e Planta Clean® no desenvolvimento da calcinose branca em Bombyx mori. Os produtos foram testados em duas etapas: efeitos sobre a biologia e produção de seda pela lagarta (1) e, em seguida, em função do seu potencial na prevenção/no controle da calcinose branca (2). Os produtos foram pulverizados sobre as folhas de amoreira (tratamento preventivo) e sobre o tegumento das lagartas (tratamento curativo). Na primeira etapa, os produtos foram aplicados durante quatro dias consecutivos, em uma das alimentações do dia. Planta Clean® - tratamento curativo - e Soil-Set® - tratamento preventivo - causaram mortalidade em 63,3 e 30% das lagartas, respectivamente. O fungo Beauveria bassiana foi inoculado na concentração 5 × 107 conídios/mL sobre folhas e insetos. Os produtos foram aplicados três horas após o fungo, em uma aplicação, e também por quatro dias em outro grupo. Um grupo de lagartas pulverizadas apenas com fungo serviu como controle. Biogermex® - tratamento curativo aplicado uma e quatro vezes - foi o mais eficiente, reduzindo a mortalidade em 25 e 26,7% respectivamente, em relação ao grupo controle. Nenhum dos produtos avaliados atuou de forma preventiva contra muscardina branca.

Esculent coating of spider silk enhanced the preservation and shelf life of apricot

Abstract According to the Food and Agriculture Organization (FAO), roughly one-third of the total food produced is lost globally. The major cause of this wastage is the perishability of fruits and vegetables. Therefore, researchers have endeavored to develop an effective preservation technique. Our study explored the potential application of spider silk as an odourless and edible preservative coating for fruits. The spider silk was collected from spiders reared in the laboratory, following by degumming and dissolution to formulate the silk solution. For this study, apricots were selected as the model fruit. The apricots were dip coated with the formulated silk solution and allowed to dry. In order to enhance the beta sheet content of the silk coating, the fruits were exposed to water annealing for varying intervals of time under vacuum condition. The effect of silk coating and water annealing time period on preservation of fruits was then evaluated morphologically and gravimetrically. The results showed that the fruits, which were used as control, exhibited a greater degree of water loss and suffered from fungal attack. In contrast, the silk coated fruits showed less water loss and were protected from fungal attack. Therefore, the study provides compelling evidence regarding the application of spider silk as a preservative coating.

Resumo Segundo a Organização para Alimentação e Agricultura (FAO), cerca de um terço do total de alimentos produzidos é perdido globalmente. A principal causa deste desperdício é a perecibilidade das frutas e legumes. Portanto, os pesquisadores têm se esforçado para desenvolver uma técnica de preservação eficaz. Nosso estudo explorou a potencial aplicação de seda de aranha como um revestimento conservante inodoro e comestível para frutas. A seda da aranha foi coletada de aranhas criadas em laboratório, seguindo-se a degomagem e dissolução para formular a solução de seda. Para este estudo, os damascos foram selecionados como fruto modelo. Os damascos foram revestidos por imersão com a solução de seda formulada e deixados secar. A fim de aumentar o teor de folhas beta do revestimento de seda, os frutos foram expostos a recozimento de água durante vários intervalos de tempo sob condições de vácuo. O efeito do tempo de recobrimento de seda e recozimento de água na preservação de frutos foi então avaliado morfologicamente e gravimetricamente. Os resultados mostraram que os frutos, utilizados como controle, apresentaram maior grau de perda de água e sofreram ataque fúngico. Em contraste, os frutos revestidos de seda mostraram menos perda de água e foram protegidos contra ataques fúngicos. Portanto, o estudo fornece evidências convincentes sobre a aplicação de seda de aranha como um revestimento conservante.

Evaluación de la fibroína de seda como biomaterial de soporte para el crecimiento de células mesenquimales estromales de pulpa dental / Evaluation of silk fibroin as a support biomaterial for the growth of stromal mesenchymal cells of dental pulp

La regeneración de tejidos usando células, factores de crecimiento y soportes constituyen una alternativa en la Medicina Regenerativa. La fibroína de seda es un excelente biosoporte, sus propiedades mecánicas únicas le permiten soportar procesos de adhesión y crecimiento celular. Objetivo. Evaluar la fibroína de la seda obtenida del gusano de seda Bombyx mori L como material de soporte para el crecimiento de células mesenquimales estromales de pulpa dental (CMPD). Métodos. La fibroína obtenida a partir de capullos de gusanos de seda Bombyx mori L criados en la Granja El Pílamo, propiedad de la Universidad Tecnológica de Pereira, se empleó para la fabricación de películas de fibroína íntegras y resistentes a condiciones de cultivo. Las CMPD fueron obtenidas a partir de un donante de diente premolar, la pieza dental se cortó con disco de diamante para la obtención de la pulpa que fue sometida a disgregación enzimática. Las células obtenidas se subcultivaron hasta el segundo pase, para posteriormente transferirse a cajas de cultivo que contenían películas de fibroína, se sometieron a condiciones inherentes al proceso de incubación siguiendo su crecimiento y viabilidad celular durante 27 días. Resultados. Al final del periodo de incubación, se observaron películas integras, estables y resistentes que permitieron el crecimiento celular. Conclusión. Se plantea el uso de fibroína como un biopolímero natural que brinda un soporte mecánico, un microambiente óptimo y un mimetismo de la estructura organizacional de los tejidos, postulándose como un potencial biomaterial para procesos de crecimiento celular en Medicina Regenerativa e Ingeniería de Tejidos.(AU)

Tissue regeneration using cells, growth factors and supports are an alternative in Regenerative Medicine. Silk fibroin is an excellent biosupport, its unique mechanical properties allow it to support processes of cell adhesion and growth. Objective: Evaluating the obtained silk´s fibroin from silkworm (Bombyx mori L) as a scaffold material for growth of dental pulp mesenchymal stromal cells (CMPD). Methods: The fibroin was obtained from silkworm (Bombyx mori L) cocoons reared at "The Pilamo" Farm, owned by the Universidad Tecnológica de Pereira. Procedures for obtaining full and resistant fibroin films to culture conditions were performed. The CMPD were obtained from a premolar tooth, the tooth was cut with a diamond blade to obtain the pulp which was subjected to enzymatic digestion. The cells obtained were subcultured until the second pass, and then, transferred to culture dishes containing fibroin films. This cells were cultured in standard conditions and tracking incubation with cell viability and growth for 27 days. Results: At the end of the incubation period, we realize that the fibroin films were intact and also this fibroin films allows cell growth.Conclusion: The use of fibroin as a natural biopolymer provides mechanical support, also an optimal microenvironment and mimic the organizational structure of tissues, so we postulated fibroin as a potential biomaterial for cell growth to be used in regenerative medicine and tissue engineering.(AU)

Controle e prevenção da calcinose branca em Bombyx mori L. (Lepidoptera: Bombycidae) / Control and prevention of white muscardine in Bombyx mori L. (Lepidoptera: Bombycidae)

Um dos principais problemas enfrentados pelos sericicultores em todo o mundo são entomopatógenos que causam grandes perdas na produção. Destaca-se a doença calcinose branca, causada pelo fungo Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (Ascomycota: Cordycipitaceae). Doenças fúngicas são facilmente disseminadas, já que os conídios são transportados pelo ar. Além disso, as condições de temperatura e umidade nos barracões são favoráveis ao surgimento e à manutenção do fungo, aumentando sua incidência. Práticas de higiene como a desinfecção do barracão e de utensílios são recomendadas, no entanto a contaminação das lagartas ainda é frequente. Dessa forma, esse artigo reuniu trabalhos voltados para a pesquisa de produtos antimicrobianos alternativos para o uso em sericicultura.(AU)

Entomopathogens are the most important problem from sericulture all over the world, and cause heavy loss to silkworm crops. Calcinosis is a common disease of silkworm, caused by the pathogenic fungus Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (Ascomycota: Cordycipitaceae). Fungal diseases of silkworm are easily spread by spores which are carried through the air. Also, temperature and humidity inside the silkworm rearing rooms are favorable to disease development. Practice hygiene measures during silkworm rearing such as disinfection of rearing houses and appliances are recommended. However, contamination is frequent. This paper presents related research on promising antimicrobiotic products for their use in sericulture industry.(AU)

Verificação da interferência do solvente propilenoglicol sobre o efeito da própolis na produção de lagartas de Bombyx mori l. (Lepidoptera: bombicidae) comparado ao extrato alcoólico de própolis / Interference of propyleneglycol solvent on the effect of propolis in the production of silkworm Bombyx mori l. (Lepidoptera: bombicidae) compared to propolis alcoholic extract / Verificación de la interferencia del solvente propilenoglicol sobre el efecto de propóleos en la producción de gusano de seda Bombyx mori l. (Lepidoptera: bombicidae) comparado al extracto alcohólico de propóleos

Este experimento foi realizado no Laboratório de Sericicultura, no Campus Sede da Universidade Paranaense (UNIPAR) de Umuarama, no período de fevereiro a outubro de 2011, com o objetivo de verificar o efeito da própolis em diferentes dosagens na alimentação durante o desenvolvimento biológico do bicho-da-seda (Bombxy mori L.). O método empregado na parte experimental foi a pulverização do extrato glicólico de própolis, diluído em 500mL de água destilada nas folhas de amoreira, nas seguintes dosagens, água-controle, 25mL, 30mL, 35mL e 40mL compondo os tratamentos: controle, T1, T2, T3 e T4 respectivamente. As folhas de amoreira foram fornecidas cinco vezes ao dia, durante o manejo alimentar. Verificou-se, pelos resultados obtidos, que as diferentes dosagens de própolis utilizadas não interferiram no ganho de peso das lagartas, no peso dos casulos verdes, no peso da casca sérica e crisálidas, quando comparado ao tratamento controle, mas quando se compara o Controle e T4 do ensaio da primavera, respectivamente, para os teores de seda bruto e líquido, há resultados significativos. Portanto, verificou-se que o extrato glicólico de própolis, em dosagens de 40mL, pode prejudicar o teor líquido de seda em uma produção de casulos, trazendo resultados pouco apreciados dentro da sericicultura.

This experiment was performed at the Laboratory of Sericulture, at the main campus of University Paranaense (UNIPAR), in the city of Umuarama, from February to October 2011, in order to verify the effect of different doses of propolis in feeding during the biological development of silkworm (Bombyx mori L.). The method used in the experiment was the spraying of propolis glycolic extract dissolved in 500-mL distilled water on the mulberry leaves in the following water-control dosages: 25mL, 30mL, 35mL and 40mL related to the treatment controls T1, T2, T3 and T4, respectively. Mulberry leaves were provided five times a day for feeding management. The results obtained showed that the different dosages of propolis used did not affect the weight gain of the larvae, the weight of green cocoons, shells and pupae when compared to the control treatment. However, when comparing the control and T4 from the Spring assay, respectively, to the levels of crude and net silk, significant results were noted. Thus, it can be concluded that propolis glycolic extract in 40-ml dosages may impair the net silk content in a cocoon production, presenting negative results in sericulture.

Este experimento se llevó a cabo en el Laboratorio de Sericultura, Campus Sede de la Universidad Paranaense (UNIPAR) de Umuarama, en el período de febrero a octubre de 2011, con el fin de verificar el efecto de propóleos en diferentes concentraciones en la alimentación durante el desarrollo biológico del gusano de seda (Bombyx mori L.). El método utilizado en el experimento fue la pulverización de extracto glicólico de propóleos, disuelto en 500 ml de agua destilada en las hojas de morera, en las siguientes dosis, agua control, 25 mL, 30mL, 35 mL, y 40 mL componiendo los tratamientos: control T1, T2, T3 e T4 respectivamente. A las hojas de morera se les han dado cinco veces al día, durante el manejo alimentar. Se verificó, por los resultados obtenidos, que las diferentes dosis de propóleos utilizados no afectaron en la ganancia de peso de los gusanos, en el peso de los capullos verdes, en el peso de la cáscara sérica y crisálidas, en comparación con el tratamiento de control, pero cuando se compara el Control y T4 del ensayo de la primavera, respectivamente, para los niveles de seda cruda y líquida, hay resultados significativos. Por lo tanto, se encontró que el extracto glicólico de propóleos, en dosis de 40 mL, puede perjudicar la concentración líquida de seda en una producción de capullos, trayendo resultados poco apreciados dentro de la sericultura.

Efeito de vitaminas e esterol como aditivos foliares no desenvolvimento de Bombyx mori L. e influência do modo de aplicação / Effect of vitamins and sterol as foliar additives in the development of Bombyx mori L. and influence of the application mode

O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos e os métodos de aplicação dos aditivos foliares decanoato de nandrolona (esteroide anabolizante) a 0,5%, ácido ascórbico (vitamina C) a 0,5%, palmitato de retinol (vitamina A) a 0,5% e acetato de retinol (vitamina A) a 1,0% em alguns parâmetros biológicos do bicho-da-seda. No experimento do modo de aplicação (pulverização foliar antes do fornecimento, depois do fornecimento e por imersão antes do fornecimento) foram utilizados: decanoato de nandrolona 0,5%; ácido ascórbico 0,5%; e palmitato de retinol 0,5%. No ensaio de desenvolvimento do inseto foram avaliados: duração e viabilidade larval; peso de casulo; taxa de encasulamento; teor líquido de seda; longevidade de adultos; número de ovos por fêmea; e duração do período de subida ao bosque. Para o modo de aplicação determinaram-se: ganho de peso, comprimento, diâmetro do tórax e diâmetro do abdome de lagartas de 5º ínstar, assim como comprimento, diâmetro e peso de glândula sericígena. Os resultados mostraram que, apesar de o ácido ascórbico proporcionar os melhores valores para o desenvolvimento corpóreo das lagartas, este não corresponde a incrementos significativos na produção; o palmitato de retinol não melhora o desenvolvimento das lagartas; o acetato de retinol e o palmitato de retinol prolongam o período larval, sem, no entanto, alterar significativamente os parâmetros de produção; a imersão de folhas antes do fornecimento às lagartas é mais viável para a aplicação dos aditivos.(AU)

The present study was aimed to evaluate the effects of different methods of foliar application of the additives nandrolone decanoate (anabolic steroid) 0,5%; ascorbic acid (vitamin C) 0,5%; retinol palmitate (vitamin A) 0,5%; and retinol acetate (vitamin A) 1,0% on some biological parameters of the silkworm. The experiment of application method (foliar spray prior to delivery, after delivery and soaking before feeding) used: nandrolone decanoate 0.5%, ascorbic acid 0.5%, and retinol palmitate 0.5%. The test of insect development evaluated: duration and larval viability, weight of cocoon, cocooning rate, liquid silk content, adult longevity, number of eggs per female and rising up time. For the application of foliar additives, the following were determined: weight gain, length, diameter and abdomen diameter of fifth instar larvae, and length, diameter and weight of silk gland. The results showed that although ascorbic acid provided the best value for the development of the caterpillars body, it did not correspond to significant increase in production; retinol palmitate did not affect the larvae body development; retinol acetate and retinol palmitate prolong the larval period, without, however, significantly altering the production parameters. The immersion method of leaves before being delivered to the caterpillars is the most feasible for the foliar application of additives.(AU)

Verificação da interferência do solvente propilenoglicol sobre o efeito da própolis na produção de lagartas de Bombyx mori L. (Lepidoptera: bombicidae) comparado ao extrato alcoólico de própolis / Interference of propyleneglycol solvent on the effect of propolis in the production of silkworm Bombyx mori L. (Lepidoptera: bombicidae) compared to propolis alcoholic extract / Verificación de la interferencia del solvente propilenoglicol sobre el efecto de propóleos en la producción de gusano de seda Bombyx mori L. (lepidoptera: bombicidae) comparado al extracto alcohólico de propóleos

Este experimento foi realizado no Laboratório de Sericicultura, no Campus Sede da Universidade Paranaense (UNIPAR) de Umuarama, no período de fevereiro a outubro de 2011, com o objetivo de verificar o efeito da própolis em diferentes dosagens na alimentação durante o desenvolvimento biológico do bicho-da-seda (Bombxy mori L.). O método empregado na parte experimental foi a pulverização do extrato glicólico de própolis, diluído em 500mL de água destilada nas folhas de amoreira, nas seguintes dosagens, água-controle, 25mL, 30mL, 35mL e 40mL compondo os tratamentos: controle, T1 , T2 , T3 e T4 respectivamente. As folhas de amoreira foram fornecidas cinco vezes ao dia, durante o manejo alimentar. Verificou-se, pelos resultados obtidos, que as diferentes dosagens de própolis utilizadas não interferiram no ganho de peso das lagartas, no peso dos casulos verdes, no peso da casca sérica e crisálidas, quando comparado ao tratamento controle, mas quando se compara o Controle e T4 do ensaio da primavera, respectivamente, para os teores de seda bruto e líquido, há resultados significativos. Portanto, verificou-se que o extrato glicólico de própolis, em dosagens de 40mL, pode prejudicar o teor líquido de seda em uma produção de casulos, trazendo resultados pouco apreciados dentro da sericicultura...

This experiment was performed at the Laboratory of Sericulture, at the main campus of University Paranaense (UNIPAR), in the city of Umuarama, from February to October 2011, in order to verify the effect of different doses of propolis in feeding during the biological development of silkworm (Bombyx mori L.). The method used in the experiment was the spraying of propolis glycolic extract dissolved in 500-mL distilled water on the mulberry leaves in the following water- -control dosages: 25mL, 30mL, 35mL and 40mL related to the treatment controls T1, T2, T3 and T4, respectively. Mulberry leaves were provided five times a day for feeding management. The results obtained showed that the different dosages of propolis used did not affect the weight gain of the larvae, the weight of green cocoons, shells and pupae when compared to the control treatment. However, when comparing the control and T4 from the Spring assay, respectively, to the levels of crude and net silk, significant results were noted. Thus, it can be concluded that propolis glycolic extract in 40-ml dosages may impair the net silk content in a cocoon production, presenting negative results in sericulture...

: Este experimento se llevó a cabo en el Laboratorio de Sericultura, Campus Sede de la Universidad Paranaense (UNIPAR) de Umuarama, en el período de febrero a octubre de 2011, con el fin de verificar el efecto de propóleos en diferentes concentraciones en la alimentación durante el desarrollo biológico del gusano de seda (Bombyx mori L.). El método utilizado en el experimento fue la pulverización de extracto glicólico de propóleos, disuelto en 500 ml de agua destilada en las hojas de morera, en las siguientes dosis, agua control, 25 mL, 30mL, 35 mL, y 40 mL componiendo los tratamientos: control T1 , T2 , T3 e T4 respectivamente. A las hojas de morera se les han dado cinco veces al día, durante el manejo alimentar. Se verificó, por los resultados obtenidos, que las diferentes dosis de propóleos utilizados no afectaron en la ganancia de peso de los gusanos, en el peso de los capullos verdes, en el peso de la cáscara sérica y crisálidas, en comparación con el tratamiento de control, pero cuando se compara el Control y T4 del ensayo de la primavera, respectivamente, para los niveles de seda cruda y líquida, hay resultados significativos. Por lo tanto, se encontró que el extracto glicólico de propóleos, en dosis de 40 mL, puede perjudicar la concentración líquida de seda en una producción de capullos, trayendo resultados poco apreciados dentro de la sericultura...

Biometria de frutos e sementes e germinação de Calotropis procera Aiton (Apocynaceae) / Biometry of fruits and seeds and germination of Calotropis procera Aiton (Apocynaceae)

Essa pesquisa teve como objetivos avaliar a biometria dos frutos e sementes de Calotropis procera, bem como estabelecer as condições de luz, temperatura e substrato adequados à germinação de sementes dessa espécie. A biometria dos frutos foi determinada numa amostra de 100 unidades, coletados ao acaso, no município de Mossoró-RN, constituindo-se nas determinações de comprimento, largura, espessura e peso de frutos e sementes. Dessas sementes, numa amostra de 100 unidades retiradas aleatoriamente, determinaram-se comprimento, número de sementes por fruto, teor de água e peso de mil sementes. Foram avaliadas as seguintes variáveis: germinação e tempo médio de germinação. Para análise empregou-se o delineamento experimental inteiramente casualizado em arranjo fatorial 6x3x2 sendo seis temperaturas (20, 25, 30, 35, 20-30 e 25-30 ºC), três substratos (areia, papel toalha e mata-borrão) e duas condições de luminosidades (presença e ausência de luz), com seis repetições de 50 sementes. Os dados biométricos foram analisados através da estatística descritiva e para os caracteres germinação e tempo médio de germinação utilizou-se análise de variância e teste de Tukey através do SISVAR 4.5. Concluiu-se que há variabilidade para os caracteres relacionados às dimensões e pesos de frutos de flor-de-seda; o número de sementes por fruto é elevado, favorecendo a disseminação da espécie. Recomenda-se que as contagens inicial e final do teste de germinação sejam realizadas aos 5 e 10 dias após a semeadura, respectivamente. A temperatura constante de 30 ºC, alternada de 25-30 ºC e os substratos areia e papel toalha são condições adequadas para a germinação e as sementes são indiferentes à luminosidade.

This research aimed to evaluate the biometry of fruits and seeds Calotropis procera and to establish the optimum light, temperature and substrate conditions for seeds germination. It was evaluated length, width, thickness and weight of fruits and seeds, number of seeds per fruit, moisture content and weight of 1000 seeds. Evaluated the following variables: germination and the germination average time. The experimental design was completely randomized with a factorial arrangement 6x3x2, using six temperatures (20, 25, 30, 35, 20-30 e 25-30 ºC), three substrates (sand, towel paper and blotting paper) and two light conditions (presence and absence), with six replications of 50 seeds. It was concluded that there is variability for characters related to fruit size and weight of silk-flower, the number of seeds per fruit is high, favoring the spread of the species, widely distributed in the semiarid region. It is recommended that the initial and final counts of the germination test are performed at 5 and 10 days after sowing, respectively. The constant temperature of 30 °C, alternating 25-30 °C and the substrates sand and paper roll were the most appropriate conditions for germination and the seeds are indifferent to light.

Genetic Analysis of Izoenzymes Polymorphisms in Silkworm (Bombyx mori L) Strains / Análise genética de polimorfismos bioquímicos em linhagens do bicho da seda (Bombyx mori L)

This work carried out to evaluates the polymorhism in the silkworm of different lineages using the isoenzymes electrophoresis to detect biochemical markers and to investigate the genetics of populations for those lineages. They were used as samples individual extracts of silk glands of second day old larvas of the fifth instar, originating from seven Japanese lineages and eight pure Chinese lineages maintained by the Cocamar- Cooperativa Agroindustrial de Maringá. The isozymes acid phosphatase (ACP), alkaline phosphatase (AKP) and carbonic anhydrase (CA) they were submitted to the electrophoresis in starch gels 14%. The esterases (EST) were analyzed in polyacrylamide gels to 10% and stained with α and ß-naphtyl acetate. The total of 21 loci was detected, and 04 (19.05%) they are polymorphic, Est-11, Acp, Akp, Ca. The fixation index (Fis) for the analyzed isozymes it was 0.0751, indicating excess of homozygotes. The value of Fst (0.6128) it shows that the lineages are well differentiated. The dendrogram obtained with the values of genetic distance didn't separate the Chinese and Japanese lineages analyzed totally. That preliminary evaluation of the lineages of B. mori shows that they present genetic material that it can be used in breeding programs that have the purpose of producing hybrid for silk production.

Este trabalho teve como objetivo avaliar o polimorfismo em lagartas do bicho-da-seda de diferentes linhagens utilizando a eletroforese de isoenzimas para detectar marcadores bioquímicos e investigar a genética de populações para essas linhagens. Foram utilizados como amostras extratos individuais de glândulas sericígenas de lagartas do segundo dia da quinta idade, de sete linhagens japonesas e oito linhagens chinesas puras mantidas pela Cocamar-Cooperativa Agroindustrial de Maringá. As isozimas fosfatase ácida (ACP), fosfatase alcalina (AKP) e anidrase carbônica (CA) foram avaliadas por meio de eletroforese em géis de amido de milho a 14%. As esterases (EST) foram analisadas por meio de eletroforese vertical em géis de poliacrilamida a 10% e coloração com α e ß- naftil acetato. Foram observados 21 locos, dentre os quais quatro (19.05%) são polimórficos, Est-11, Acp, Akp, Ca. O índice de fixação (Fis) para as isozimas analisadas foi 0.0751, indicando excesso de homozigotos. O valor de Fst (0.6128) permite sugerir que as linhagens estão bem diferenciadas. O dendograma obtido a partir dos valores de distância genética não separou totalmente as linhagens chinesas e japonesas analisadas. Essa avaliação preliminar das linhagens de B. mori mostra que elas apresentam material genético que pode ser utilizado em programas de cruzamentos que tenham a finalidade de produzir híbridos para produção de seda.

Comparative electrophoretic profile of proteins and esterases in healthy silkworm larvae (Bombyx mori Lineu, 1758) and infected with nucleopolyhedrovirus / Perfil eletroforético comparativo de proteínas e esterases em lagartas de bicho da seda (Bombyx mori Lineu, 1758) saudáveis e infectadas por nucleopoliedrovírus

Total proteins and esterases from silk gland extracts of Bombyx mori silkworm were characterized and compared with electrophoretic profiles of prepared extracts with silkworm glands infected with nucleopolyhedrovirus (BmNPV). SDS-PAGE (7%) gels was used for the total proteins, and 10% native PAGE for esterases. In the silk glands extracts of healthy silkworms, it was observed seven protein zones with molecular weight varying between 10 kDa (P1) and 60 kDa (P7). In the infected silkworms, a new zone named P8 (90 kDa) was also detected. Esterases activity at 5th instar larvae underwent changes after the infection with BmNPV, since there was a reduction (EST-6 and EST-7) and an increase (EST-8) in the intensity of the regions of esterases activity, and specificity of EST-9 to ß-naphthyl acetate. Those alterations observed in the expression of genes after the infection with the nucleoplyhedrovirus can be used as markers to detect infections in B. mori.

Nesse estudo foram identificadas e comparadas as alterações das proteínas totais e esterases em extratos de glândula sericígena de lagartas de Bombyx mori sadias e infectadas por nucleopoliedrovírus (BmNPV), empregando eletroforese SDS-PAGE com géis a 7% para proteínas totais, e PAGE a 10% para esterases. Nos extratos de glândulas sericígenas de lagartas saudáveis, foram observadas sete regiões proteicas com peso molecular que variam entre 10 kDa (P1) a 60 kDa (P7). Naquelas infectadas pelo BmNPV, uma nova região denominada de P8 (90 kDa) foi detectada. A atividade das esterases no 5º instar larval sofreu alterações após a infecção pelo BmNPV porque houve redução (EST-6 e EST-7) e aumento (EST-8) na intensidade das regiões de atividade de esterases; e especificidade da EST-9 com o substrato ß-naftil acetato. Essas alterações na expressão gênica, após a infecção pelo nucleopoliedrovírus, poderão ser utilizadas como marcadores para detecção da infecção em B. mori.

Enriquecimento da dieta do bicho-da-seda com extrato hidrossolúvel de soja / Enrichment of the silkworms diet with soybean water soluble extract

O objetivo deste trabalho foi avaliar se a suplementação da dieta do bicho-da-seda com extrato hidrossolúvel de soja (EHS) interfere na produção de casulos e no consumo de folhas de amoreira (Morus alba L.) de diferentes cultivares pelas lagartas. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado em esquema fatorial 4x5, com quatro cultivares de amoreira ('IZ64', 'IZ56/4', 'FM86' e 'FMSM') e cinco dietas (folhas não tratadas, folhas umedecidas com água, folhas enriquecidas com EHS, em três níveis: suplementação da dieta com 5, 10 e 20% de PB). O EHS foi aspergido sobre as folhas, tendo a água como agente dispersante. O consumo foi verificado pela diferença entre a quantidade de folhas fornecidas e a quantidade não consumida pelas lagartas. A ingestão de alimento apresentou-se de forma quadrática, diminuindo à medida que o EHS foi adicionado à dieta. Houve interação dos fatores cultivar e dieta. O fornecimento de folhas de amoreira com acréscimo proteico de 10% por meio do EHS melhorou a qualidade dos casulos do bicho-da-seda com a utilização das cultivares 'IZ56/4' e 'FMSM'. A pulverização de EHS nas folhas da cultivar 'IZ64' prejudicou a produção de casulos. Lagartas do bicho-da-seda, alimentadas com folhas de amoreira sem suplementação, produziram cascas séricas mais pesadas com folhas das cultivares 'IZ64' e 'FMSM'. A aspersão de água nas folhas incrementou o peso de cascas séricas produzidas a partir da cultivar 'FM86'. A suplementação da dieta com EHS diminui o consumo da lagarta do bicho-da-seda. A aplicação de EHS influencia a produção de casulos em função da cultivar utilizada.

The aim of this research was to assess if the supplementation of the silkworm diet with soybean water soluble extract (WSE) interferes on the consumption of mulberry leaves (Morus alba L.) by the caterpillars and on cocoon production. The experimental design was completely randomized in factorial arrangement 4x5, with four mulberry varieties ('IZ64', 'IZ56/4', and 'FMSM' 'FM86') and five diets (untreated control leaves, leaves moistened with water and leaves enriched with WSE, in three levels). The WSE was sprayed on the leaves with water as dispersing agent. The consumption was measured by the difference between the quantity of food provided and the amount that was not consumed by the larvae. The consumption was presented quadratic form, which decreased as the WSE was added on diet. There was interaction between cultivar and diets. Silkworm fed diets containing leaves of mulberry with addition of 10% of crude protein through WSE improved the quality of cocoons with utilization of 'IZ56/4' and 'FMSM' cultivars. The sprayed of WSE on leaves of 'IZ64' cultivar decreased production of cocoons. Silkworm fed with leaves without supplementation produced heavier cocoons shells of the 'IZ64' and 'FMSM' cultivars. Water sprayed on leaves provided higher weight of cocoons shells from 'FM86' cultivar. The WSE supplementation in diets decreases consumption of silkworm. The WSE sprayed influences cocoon production depending on the cultivar.

A criação do bombyx mori (bicho-da-seda) e as principais doenças / Cría del bombyx mori (gusano de seda) y las principales enfermedades / Bombyx mori (silkworm) breeding and main diseases

Este artigo revisa os principais aspectos relacionados à sericicultura, que abrange a criação do Bombyx mori, popularmente conhecido como bicho-da-seda, que representa uma atividade desenvolvida principalmente nas pequenas propriedades rurais, onde predomina o trabalho familiar, representando uma alternativa importante para a melhoria da renda e, contribuindo desta forma para a diminuição do êxodo rural. Além dessas características, a sericicultura é uma atividade de baixo impacto ambiental, que contribui para o desenvolvimento sustentável do país. O presente trabalho tem por objetivo discutir a criação do bicho-da-seda e as principais doenças que acarretam perdas na produção, destacando que o melhoramento genético pode auxiliar na criação de híbridos mais resistentes à doenças e com melhor qualidade e quantidade de seda por casulo.

This article revises the main aspects related to sericulture which includes the breeding of Bombyx mori, popularly known as silkworm. It represents an activity developed mainly in small rural properties, where the family work prevails, representing an important alternative for the income improvement and, thus, contributing to the decrease of rural exodus. Besides, sericulture is an activity with low environmental impact which contributes to the sustainable development of the country. This study aims to discuss silkworm breeding and the main diseases that cause production losses, noting that genetic improvement can help breed more disease-resistant hybrids with better quality and quantity of silk by cocoon.

Este artículo revisa los principales aspectos relacionados con la sericultura, que abarca la cría del Bombyx mori, popularmente conocido como gusano de seda, que representa una actividad desarrollada principalmente en las pequeñas propiedades rurales, donde predomina el trabajo familiar, representando una alternativa importante para la mejora de renta y, contribuyendo así a reducir el éxodo rural. Además de esas características, la sericultura es una actividad de bajo impacto ambiental, que contribuye al desarrollo sostenible del país. Este trabajo pretende discutir la cría del gusano de seda y las principales enfermedades que causan pérdidas en la producción, señalando que el mejoramiento genético puede ayudar a crear híbridos más resistentes a las enfermedades y con mejor calidad y cantidad de seda por capullo.