Résumé
Resumen: La hiperlipidemia es altamente prevalente y contribuye de forma sustancial a la enfermedad cardiovascular aterosclerótica, que es una de las principales causas de morbilidad y mortalidad en Colombia. La reducción del colesterol LDL (c-LDL) produce una disminución del riesgo de enfermedad cardiovascular aterosclerótica y de eventos cardiovasculares adversos. La terapia dirigida a la proproteína convertasa subtilisina/kexina tipo 9 (PCSK9; su sigla en inglés) ha surgido como una herramienta novedosa para el tratamiento de la hiperlipidemia. Inclisiran es un ARN pequeño de doble hebra, que actúa inhibiendo la transcripción de PCSK-9 en los hepatocitos, lo que conduce a una reducción marcada y sostenida del c-LDL. En contraste con otras terapias hipolipemiantes, como estatinas, ezetimibe y anticuerpos monoclonales (MAbs; su sigla en inglés) e inhibidores de PCSK9, inclisiran propone un régimen de dosificación infrecuente de dos o tres veces al año. Su efecto prolongado representa una ventaja frente al incumplimiento del tratamiento, que es una de las principales causas por las que no se alcanzan los objetivos de c-LDL con la terapia estándar. Esta revisión tiene como objetivo presentar y discutir los datos científicos actuales con relación a la eficacia, tolerabilidad y seguridad del inclisiran en el tratamiento de la hipercolesterolemia.
Abstract: Hyperlipidemia is a highly prevalent condition and contributes substantially to atherosclerotic cardiovascular disease (ASCVD), which is one of the main causes of morbidity and mortality in Colombia. The reduction of LDL cholesterol (LDL-C) decreases the risk of ASCVD and adverse cardiovascular events. Targeted therapy for the proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK-9) has emerged as a novel tool for the treatment of hyperlipidemia. Inclisiran is a small double-stranded small interfering RNA that acts by blocking PCSK-9 transcription in hepatocytes, leading to a marked and sustained reduction in circulating LDL-C levels. In contrast to other lipid-lowering therapies such as statins, ezetimibe and monoclonal antibodies (MAbs) PCSK-9 inhibitors, Inclisiran proposes an infrequent dosing regimen of twice or three times a year. Its prolonged effect represents an advantage over non-compliance of the treatment, which is one of the main reasons why LDL-C goals are not achieved with standard therapy. This review aims to present and discuss current scientific data regarding the efficacy, tolerability and safety of Inclisiran in the treatment of hypercholesterolemia.
Résumé
La enfermedad cardiovascular aterosclerótica es la causa número uno de morbi-mortalidad a nivel mundial. La relación directa entre los niveles del colesterol unido a lipoproteínas de baja densidad y la aterosclerosis ha llevado a optimizar los esfuerzos en regular y controlar esta sub-fracción lipoproteica. El descubrimiento de la pro proteína convertasa subtilisina kexina tipo 9 (PCSK9) como regulador del receptor de la lipoproteína de baja densidad a nivel hepático, y por consiguiente de los niveles circulantes del colesterol unido a la lipoproteína de baja densidad, desencadenó un esfuerzo inusual a fin de disminuir su concentración plasmática. La inhibición de PCSK9, a través de anticuerpos monoclonales, ha demostrado ser una estrategia farmacológica con un amplio perfil de seguridad y una alta eficacia en los estudios de fase 3. Esto ha llevado a su aprobación por distintos entes reguladores en determinados grupos específicos, como los pacientes portadores de hipercolesterolemia familiar y los pacientes en prevención secundaria que no alcanzan las metas con las herramientas farmacológicas disponibles. A la espera de resultados sobre eventos clínicos, se propone revisar en el siguiente artículo los aspectos farmacológicos de los inhibidores de PCSK9.
Atherosclerotic cardiovascular disease is the leading cause of morbidity and mortality worldwide. The direct relationship between cholesterol levels lipoprotein low density and atherosclerosis has led to optimize efforts to regulate and control this lipoprotein sub-fraction. The discovery of the pro protein convertase subtilisin kexin type 9 (PCSK9) as regulator receptor low-density lipoprotein in liver and therefore circulating levels of cholesterol bound to low density lipoprotein, triggered an unusual effort to reduce its plasma concentration. Inhibition of PCSK9 through monoclonal antibodies, it has proved to be a pharmacologic strategy with a broad safety profile and high efficacy in the phase 3 trials. This has led to approval by several regulatory entities in certain specific groups, such as patients with familial hypercholesterolemia and patients in secondary prevention who not reaching goals with the pharmacological toolsavailable. Pending results of clinical events, the aim of this article is to review the pharmacological aspects of the inhibitors of PCSK9.
A doença cardiovascular aterosclerótica é a principal causa de morbidade e mortalidade no mundo. A relação direta entre os níveis de colesterol de lipoproteína de baixa densidade e aterosclerose levou a otimizar os esforços para regular e controlar esse sub-fração de lipoproteína. A descoberta da pró-proteína convertase subtilisina kexin tipo 9 (PCSK9) como regulador do receptor de lipoproteína de baixa densidade no fígado e, portanto, os níveis de colesterol ligado à lipoproteína de baixa densidade em circulação, desencadeado um esforço incomum para reduzir a sua concentração no plasma. A inibição da PCSK9 por meio de anticorpos monoclonais, tem provado ser uma estratégia farmacológica com um amplo perfil de segurança e uma elevada eficácia nos estudos de fase 3. Isto levou à aprovação de várias entidades regulatórias em determinados grupos específicos, tais como pacientes com hipercolesterolemia familiar e pacientes em prevenção secundária, que não atingem metas com as ferramentas farmacológicas disponíveis. Enquanto se aguarda resultados de eventos clínicos, o objetivo deste artigo é revisar os aspectos farmacológicos dos inibidores de PCSK9.
Résumé
Nomuraea rileyi represents an important natural control agent of Anticarsia gemmatalis preventing populations from reaching economic threshold levels in soybean. During the processes of host infection, entomopathogenic fungi produce extracellular proteases, which degrade the host cuticle and are suggested to be virulence determinants. It was examined the production of subtilisin-like (Pr1) and trypsin-like (Pr2) proteases in two strains (NR458 and CG434) of N. rileyi and its possible role in the process of pathogenicity to this caterpillar. Fungal growth was performed in a mineral medium containing nitrate, and supplemented with the cuticle or exuviae from A. gemmatalis, or with the non-cuticular substrate casein. In medium containing nitrate as sole nitrogen source, no detectable Pr1-like activity occurred in the culture supernatants of the two fungal strains. However, both strains of N. rileyi produced Pr1-like protease in all medium amended with exogenous nitrogen source, and it was highly expressed in the presence of insect cuticle. Pr2-like activity was significantly inferior to Pr1-like activity and it was detected only in some of the media culture and incubation periods tested. In the NR458 culture supernatant the highest activity was observed in medium containing nitrate as nitrogen source. Correlation analysis between the percentage of A. gemmatalis mortality in bioassays and Pr1-like protease activity of strain NR458 suggests a positive correlation for these variables.
O objetivo deste estudo foi avaliar a produção de proteases dos tipos subtilisina [Pr1] e tripsina [Pr2] por duas linhagens do fungo entomopatogênico Nomuraea rileyi e a correlação entre a atividade de Pr1 e a patogenicidade contra Anticarsia gemmatalis. O crescimento do fungo foi realizado em meio mínimo contendo nitrato e suplementado com a cutícula ou exúvia de A. gemmatalis, ou com substrato não cuticular caseína. Em meio contendo nitrato, nenhuma atividade de Pr1 foi detectada nos sobrenadantes das culturas. Entretanto, as duas linhagens de N. rileyi produziram Pr1 em meio suplementado com fonte exógena de nitrogênio, e alta atividade foi verificada na presença da cutícula do inseto. A atividade de Pr2 foi inferior à atividade de Pr1. A análise de correlação entre a atividade de Pr1 da linhagem NR458 e mortalidade de A. gemmatalis sugere uma correlação positiva para essas variáveis. A avaliação da atividade de enzimas em diferentes condições pode ajudar na compreensão do processo infeccioso de N. rileyi em A. gemmatalis.
Résumé
With the aim of increasing the nutritional value of whey, a subtilisin was used for hydrolysing its proteins and obtaining high di-tripeptide and free amino acid contents, besides small amounts of large peptides. The whey protein concentrate was used as raw material and different hydrolytic conditions were tested such as reaction time (5, 10 and 15h), enzyme:substrate ratio (1:100, 2:100 and 4:100) and raw material concentration (10% and 15%). The peptide profi les were initially characterized using a fractionation method by a size-exclusion-HPLC followed by a rapid Corrected Fraction Area method for quantifying the peptides. The action of subtilisin showed varied effects depending on the hydrolysis parameters used. The best peptide profi le was obtained using a raw material concentration of 10%, an enzyme:substrate ratio of 4:100, after 5h reaction, reaching 13.34% ofdi-tripeptides, 45.56% of free amino acids and just 12.28% of large peptides.
Con el propósito de mejorar el valor nutricional del suero lácteo, fue empleada una subtilisina para hidrolizar sus proteínas y obtener un alto contenido de di-tri péptidos, aminoácidos libres con reducción del tenor de grandes péptidos.La materia prima fue el concentrado proteico del suero lácteo y diferentes condiciones de hidrólisis fueron probadas: tiempo de hidrólisis(5, 10 y 15h), la relación enzima: substrato (1:100, 2:100 y 4:100) y la concentración de la materia prima (10% y 15%). Se caracterizó elperfi l peptídico por medio de fraccionamiento de los hidrolizados utilizando cromatografía líquida de alta efi ciencia de exclusión moleculary la cuantifi cación de los componentes de las fracciones cromatográfi cas fue realizada por el método rápido del área corregida de la fracción. Para los parámetros estudiados, se observaronefectos variados de la subtilisina en la obtención de los hidrolizados, y el mejor perfi l peptídico fue encontrado cuando se utilizó la concentración de materia prima de 10%, relación enzima: substrato de 4:100 y 5 horas de reacción. Estas condiciones dieron origen a un hidrolizado compuesto de 13,34% de di-tripeptídeos, 45,56%de aminoácidos libres y sólo 12,28% de grandes péptidos.
Com o intuito de elevar o valor nutricional do soro de leite, foi empregada uma subtilisinapara hidrolisar suas proteínas e obter alto teor de di-tripeptídios, e de aminoácidos livres, alémde pequena quantidade de grandes peptídios. A matéria-prima utilizada foi o concentrado proteico do soro de leite e diferentes condições hidrolíticas foram testadas, tais como o tempo dereação (5, 10 e 15h), a relação enzima:substrato (1:100, 2:100 e 4:100) e a concentração damatéria-prima (10% e 15%). Caracterizou-se o perfil peptídico pelo fracionamento dos hidrolisados por cromatografia líquida de alta eficiência de exclusão molecular e, para a quantificação dos componentes das frações cromatográficas, empregou-se o método rápido da Área Corrigida da Fração. Para os parâmetros estudados, observaram-se efeitos variados da subtilisina na obtenção dos hidrolisados, sendo que o melhor perfil peptídico foi encontrado ao se empregar a concentração da matéria-primade 10%, relação enzima:substrato de 4:100, após 5 h de reação, tendo obtido 13,34% de ditripeptídeos, 45,56% de aminoácidos livres e, apenas, 12,28% de grandes peptídios.
Sujets)
Lait , Valeur nutritive , Subtilisine , Activation enzymatique , HydrolyseRésumé
A Brazilian isolate of Beauveria bassiana (CG425) that shows high virulence against the coffee berry borer (CBB) was examined for the production of subtilisin-like (Pr1) and trypsin-like (Pr2) cuticle-degrading proteases. Fungal growth was either in nitrate-medium or in CBB cuticle-containing medium under both buffered and unbuffered conditions. In unbuffered medium supplemented with cuticle, the pH of cultures dropped and Pr1 and Pr2 activities were detected in high amounts only at a pH of 5.5 or higher. In buffered cultures, Pr1 and Pr2 activities were higher in medium supplemented with cuticle compared to activities with nitrate-medium. The Pr1 and Pr2 activities detected were mostly in the culture supernatant. These data suggest that Pr1 and Pr2 proteases produced by strain CG425 are induced by components of CBB cuticle, and that the culture pH influences the expression of these proteases, indicating the occurrence of an efficient mechanism of protein secretion in this fungus. The results obtained in this study extend the knowledge about protease production in B. bassiana CG425, opening new avenues for studying the role of secreted proteases in virulence against the coffee berry borer during the infection process.
O isolado brasileiro de Beauveria bassiana (CG425) que apresenta alta virulência contra a broca do café (CBB) foi analisado quanto à produção de proteases degradadoras de cutícula, tipo-subtilisina (Pr1) e tipo-tripsina (Pr2). O crescimento fúngico foi realizado em meio contendo nitrato e em meio contendo cutícula da broca em condições de pH tamponado e não tamponado. Em meio não tamponado, suplementado com cutícula, o pH da cultura caiu e as atividades de Pr1 e Pr2 foram detectadas somente em valores de pH igual ou superior a 5,5. Em culturas tamponadas, as atividades Pr1 e Pr2 foram superiores em meio suplementado com cutícula, comparativamente as atividades em meio contendo nitrato. As atividades Pr1 e Pr2 ocorreram predominantemente no sobrenadante de cultivo. Os dados obtidos sugerem que Pr1 e Pr2 produzidas pelo isolado CG425 são induzidas por componentes da cutícula da broca do café (CBB), e que o pH da cultura influencia a expressão destas proteases, indicando a ocorrência de um mecanismo eficiente de secreção por este fungo. Os resultados obtidos neste estudo aumentam o conhecimento a respeito da produção de proteases por B. bassiana CG425, abrindo novos caminhos para o estudo do papel de proteases na virulência contra a broca do café durante o processo de infecção.