Relationship between superovulation and embryo production with ovarian follicular population before superovulatory treatment in Brazilian Bergamasca sheep / [Relação da resposta superovulatória e produção embrionária com a população folicular ovariana antes do tratamento superovulatório de ovelhas da raça Bergamácia Brasileira]

The objective of this study was to quantify the superovulatory response and embryo production of Brazilian Bergamasca sheep and to evaluate the link to the follicular condition before superovulatory treatment, as a reference for selection of donors with potential for superovulation. Follicular population of twenty-three sheep was evaluated by ultrasound during metestrus phase of the estrous cycle and divided into groups of low, medium and high follicular population. Subsequently, they were synchronized, superovulated with 133mg of pFSH, mated and subjected to embryo collection. The superovulatory response (9.0±3.3 vs 10.7±6.2 vs 13.8±7.1) and embryo production (4.0±3.8 vs 2.6±2.0 vs 1,8±4.0) were similar between groups (P>0.05). There was a positive correlation between the number of follicles during the metestrus phase and the number of corpus luteum with premature regression (PLR) (0.52) and a negative correlation between the recovery rate and PLR (-0.44) (P<0.05). The sheep that presented PLR had more follicles during metestrus (16.9±7.8 vs 12.7±3.2) and lower embryo recovery rate (38.8±29.3 vs 72.2±29.9) than those with functional CLs (P<0.05). Follicular quantification during metestrus phases was unable to identify donors with high embryo production. Animals with PLR had a larger follicular population during metestrus and lower embryo recovery rate.(AU)

O objetivo deste trabalho foi quantificar a resposta superovulatória e a produção embrionária de ovelhas Bergamácia Brasileira e relacioná-las com a condição folicular antes do tratamento superovulatório, como referência para seleção de doadoras com potencial para superovulação. Vinte e três ovelhas foram avaliadas quanto à população folicular por ultrassonografia na fase de metaestro do ciclo estral e divididas em grupos com baixa, média e alta população folicular. Posteriormente foram sincronizadas, superovuladas com 133mg de pFSH, acasaladas e submetidas à coleta de embriões. A resposta superovulatória (9,0±3,3 vs. 10,7±6,2 vs. 13,8±7,1) e a produção embrionária (4,0±3,8 vs. 2,6±2,0 vs. 1,8±4,0) foram semelhantes entre os grupos (P>0,05). Houve correlação positiva entre o número de folículos no metaestro e o número de corpos lúteos com regressão prematura (RPCL) (0,52) e correlação negativa entre a taxa de recuperação e RPCL (-0,44) (P <0,05). As ovelhas que apresentaram RPCL tiveram mais folículos no metaestro (16,9±7,8 vs. 12,7±3,2) e menor taxa de recuperação embrionária (38,8±29,3 vs. 72,2±29,9) do que as que apresentaram CLs funcionais (P<0,05). A quantificação folicular nas fases de metaestro não foi capaz de identificar doadoras com alto potencial de produção embrionária. Animais com RPCL tiveram maior população folicular no metaestro e menor recuperação de embriões.(AU)

Estudo da vascularização folicular e do corpo lúteo de éguas cíclicas tratadas com extrato de pituitária equina utilizando ultrassom Doppler colorido / Study of follicular and corpus luteum vascularization in mares treated with Equine Pituitary Extract using ultrasound color Doppler

Informações sobre a vascularização da parede folicular e do corpo lúteo equino, associadas à superovulação, são escassas. Com o objetivo de avaliar o efeito superovulatório do extrato de pituitária equina (EPE) no fluxo sanguíneo folicular e luteal, foram utilizadas seis éguas Puro Sangue Árabe, em dois ciclos estrais (controle e tratamento). As éguas foram monitoradas diariamente por ultrassonografia modo B, até que os folículos atingissem diâmetro de 23mm (desvio). No ciclo tratamento, as éguas receberam 8mg de EPE, uma vez ao dia, por via IM, até que dois ou mais folículos atingissem o diâmetro entre 32 e 35mm. A ovulação foi induzida com acetato de deslorelina, quando os folículos atingiram, no mínimo, 35mm. No momento do desvio folicular, da indução da ovulação e do último exame pré-ovulatório, foi utilizada a ultrassonografia modo B para medir o diâmetro dos folículos e, no oitavo dia pós-ovulação, para a área do corpo lúteo (CL). Utilizou-se também ultrassonografia com Doppler colorido para avaliar a perfusão sanguínea da parede folicular e do parênquima luteal. No ciclo controle, foi realizado o mesmo procedimento, exceto pelo uso do EPE. Os dados foram submetidos à análise de variância, com nível de significância de 5%. Não foi observado efeito do EPE sobre o número de ovulações, o diâmetro dos folículos, a vascularização da parede folicular e a concentração sérica de estrógeno. Os animais, tratados ou não, apresentaram CLs funcionais, não havendo diferença na área do parênquima ou da vascularização luteal, nem na concentração sérica de progesterona, no oitavo dia após a ovulação. Foi observado que o EPE proporcionou um maior número de folículos subordinados no momento da indução da ovulação do folículo dominante (P ≤ 0,05). Embora esses folículos não tenham chegado a ovular, concluiu-se que o EPE atuou no crescimento de folículos, que podem ser utilizados em outras biotécnicas, como a transferência de oócitos, com maior aproveitamento da reserva folicular de ovários equinos.(AU)

Knowledge about follicle and corpus luteum vascularization associated with superovulation in mares is scarce. Aiming to evaluate the effect of equine pituitary extract (EPE) on superovulation, the experiment was conducted using six mares Purebred Arabian in two estrous cycles (control and treatment). The mares were synchronized, and monitored daily by ultrasound B mode until the follicles reached diameter ≤ 23 mm (deviation). In the treatment cycle, from the deviation, mares received 8 mg of EPE, once a day, intramuscularly, until two or more follicles reached a diameter between 32 and 35 mm. Ovulation was induced with deslorelin acetate when follicles reached at least 35 mm. At the time of follicular deviation, induction of ovulation and final preovulatory exam, it was used B-mode ultrasound to measure the diameter of follicles and on the eighth day after ovulation to measure the area of the corpus luteum (CL); color Doppler was also used to assess blood perfusion of the follicle wall and luteal parenchyma. In the control cycle was performed the same procedure except for the use of EPE. Data were subjected to analysis of variance, with 5% significance level. There was no effect of EPE on ovulation number, diameter of follicles, vascularity of the follicular wall and serum estrogen concentration. The animals treated or not, showed functional CLs, with no difference in parenchymal area or luteal vascularization, or in serum progesterone concentration on the eighth day after ovulation. It was observed that the EPE provided a greater number of subordinate follicles at the time of induction of ovulation of the dominant follicle. Although these follicles have failed to ovulate, it was concluded that EPE influenced the follicles growth, and it can be used in other biotechnologies, with greater utilization of equine ovarian follicular reserve.(AU)

Produção de embriões em ovinos Morada Nova e Somalis Brasileira / Embryo production in Morada Nova and Somalis Brasileira ewes

Superovulatory response and embryo yield in 19 Morada Nova and 20 Somalis Brasileira ewes was analyzed. All animals were synchronized with the insertion of an intravaginal device (CIDR®) on Day 0, replaced by a new device on Day 7, which remained in place until Day 14 and superovulated with 133mg of porcine FSH (pFSH) in decreasing doses at 12h intervals from Day 12 until Day 15 of the treatment, and a single dose of equine chorionic gonadotropin (eCG, 200UI) on Day 14 (i.e., administered in CIDR removal). Fifty hours after CIDR® removal, females were inseminated by laparoscopy. All embryos were recovered by laparotomy 5 days after insemination. Sheep which responded to the superovulation protocol (P>0.05) included 74% of the Morada Nova ewes and 50% of the Somalis Brasileira ewes. Morada Nova showed better results (P<0.05) than Somalis Brasileira in number of ovulations (15.38 ± 5.24 vs. 10.56 ± 2.83), total structures (11.00 ± 7.55 vs. 3.33 ± 1.94) and embryo yields (6.79 ± 5.35 vs. 2.90 ± 2.18). Despite the high fertilization rate, degenerate embryo rate was high for both breeds, with an overall rate of 39% (57/145). In conclusion, superovulatory response and embryo yields in Morada Nova ewes were considered sufficient to justify the use of this procedure in genetic resources conservation programs. However, improvements to embryo quality and control of precocious regression of corpus luteum are necessary to produce better results in the MOET program, with minimal variations and maximum embryo yield in Morada Nova and Somalis Brasileira ewes.(AU)

Redução da resposta superovulatória de fêmeas bovinas superestimuladas com FSH em doses split / Reduced superovulatory response of bovine females overstimulated with FSH in split doses

Objetivou-se avaliar a superovulação (SOV) de vacas zebuínas, utilizando protocolo convencional ou protocolo com número menor de aplicações e similar dosagem (dose split). Utilizaram-se 16 fêmeas (total 32 SOV), com idade entre 17-42 meses e escore de condição corporal 2,5-4 (escala de 1-5), em delineamento tipo cross-over. No início do tratamento (D0), os animais receberam um dispositivo de progesterona e 2mg de benzoato de estradiol. As fêmeas do grupo convencional receberam 250UI de FSH/LH divididas em oito doses decrescentes administradas em intervalos de 12h (FSH/LH no D4, D5, D6 e D7 no período da manhã e tarde, nas respectivas dosagens: 50,0 UI; 37,5 UI; 25,0 UI; 12,5 UI). No D7 pela manhã, as fêmeas foram tratadas com 150μg de D+cloprostenol, e a remoção da progesterona foi realizada no D7 à tarde. As fêmeas do grupo split também receberam 250 UI de FSH/LH. No D4 de manhã, administraram-se 62,5 UI de FSH/LH via IM e 125 UI por via SC. Quarenta e oito horas após (D6) administraram-se 62,5 UI via SC e na manhã do D7 foi removida a progesterona e aplicaram-se 150μg de D+cloprostenol. As fêmeas de ambos os grupos receberam 50μg de análogo de GnRH no D8 pela manhã e foram inseminadas 12 e 24 horas após. No D15 realizou-se a colheita dos embriões em ambos os tratamentos. Avaliou-se a resposta superovulatória pela contagem do número de folículos e CLs de cada ovário, com auxílio de ultrassom. Todas as variáveis foram submetidas ao teste T de Student para amostras pareadas. Houve diferença (P<0,05) na quantidade de folículos acima de 8mm no D8 (9,06±4,54 e 5,50±4,59); número de CLs no dia da colheita (8,12± 3,26 e 4,69±3,46), número de embriões totais (6,69±3,05 e 3,37±2,50) e de embriões viáveis (5,25±2,29 e 2,37±1,78) nas vacas do grupo convencional em relação às do split, respectivamente. Conclui-se que o protocolo split tem pior resposta superovulatória e de produção in vivo de embriões, em vacas zebuínas, quando comparado ao protocolo convencional...

The aim of this study was to evaluate the superovulation (SOV) response of zebu cows, using conventional protocol or other protocol with similar dose but smaller number of applications (split dose). 16 females (32 SOV), aged 17-42 months, and body condition score of 2.5-4 (1-5 scale) were used in randomized cross-over. At the start of treatment (D0), the animals received progesterone device and 2mg of estradiol benzoate. The females from the conventional group received 250 IU of FSH/LH divided into eight decreasing doses administered at intervals of 12 hours (FSH/LH in D4, D5, D6 and D7, with their respective strengths: 50.0 IU, 37.5 IU, 25.0 IU, 12.5 IU). In D7, the females were treated with 150μg of D+cloprostenol, and the removal of progesterone device was held in the afternoon. The females from the split group also received 250 IU of FSH/LH. In the morning D4 was administered in 62.5 IU FSH/LH IM and 125 IU subcutaneously. Forty eight hours later (D6) 62.5 IU was administered subcutaneously in the morning and on D7, the progesterone device was removed and 150 μg of D+cloprostenol was applied. The females in both groups were given 50 μg of GnRH in the morning and on D8 were inseminated after 12 and 24 hours. On D15 the embryo collection was performed in both treatments. The evaluation of superovulatory response was done by counting the number of follicles and corpus luteum (CL) in each ovary, with the aid of ultrasound. The variables were assessed by Student's t test for paired samples...

Morfometria do aparelho genital e resposta superovulatória de coelhas suplementadas com geleia real / Morphometry of the genital tract and superovulatory response in rabbits supplemented with royal jelly

Avaliou-se o efeito da suplementação com geleia real sobre a morfometria do aparelho genital, resposta superovulatória e qualidade embrionária de coelhas. Trinta e seis fêmeas foram distribuídas em quatro grupos (G), sendo: G1 (n=9) formado por animais não suplementados com geleia real, e G2, G3 e G4 (n=9 em cada grupo) por animais suplementados com 10, 20 e 40mg/dia de geleia real. A superovulação consistiu na aplicação de 40UI de gonadotrofina coriônica equina, seguida por 40UI de gonadotrofina coriônica humana, via intramuscular, 48 horas após, e submetidas à cobrição natural. Os animais foram sacrificados, e os embriões coletados 72 horas após a cópula. Não houve diferença estatística entre tratamentos para as variáveis analisadas. O peso médio do aparelho genital foi de 10,88±0,38g; dos ovários - direito e esquerdo -, 0,28±0,02g; e o índice gonadossomático, 0,02±0,0g. O número médio de estruturas totais recuperadas foi de 9,2±1,4; de embriões viáveis, 8,7±1,4; e de degenerados, 0,5±0,2. Dos embriões viáveis, 5,6±0,8 foram classificados como grau I; 2,3±0,5, como grau II; e 0,8±0,2, como grau III. A suplementação com geleia real na dose de até 40mg/dia não apresentou efeito estimulador sobre o aparelho genital e a qualidade embrionária de coelhas.

The purpose of this paper was to assess the effect of supplementation of royal jelly on the morphometry of the genital tract, superovulatory response and embryonic quality in adult rabbits. 36 rabbits were distributed in four groups (G), as follows: G1 (n=9): no supplementation with royal jelly, G2, 3 and 4 (n=9): supplementation with 10, 20 and 40mg/day of royal jelly. The superovulatory protocol consisted in the application of a dose of 40UI of Equine Chorionic Gonadotrophin, followed by a dose of UI of Human Chorionic Gonadotrophin, intramuscularly, 48 hours later, and submitted to natural cover. The animals were euthanasiated and the embryos collected 72 hours after copulation. There was no statistical difference for the analyzed variables (P>0.05). The average weight for the female genital tract was 10.89±0.38g; the average weight of right and left ovaries was 0.28±0.02g and the average gonadosomatic index rate was 0.02±0.0g. The number of total recovered structures was 9.2±1.4. The average number of viable embryos was 8.7±1.4 and of degenerated embryos was 0.5±0.2. Viable embryos were morphologically classified as degree I: 5.6±0.8; degree II: 2.3±0.5; degree III: 0.8±0.2. Royal jelly did not present stimulatory effect on organs related to the reproduction of rabbits, nor was it effective to improve their embryonic quality at dosages of up to 40mg of in natura royal jelly.

Produção de embriões em vacas zebuínas após superovulação com duas formulações comerciais de gonadotrofina

O presente trabalho teve como objetivo avaliar a produção de embriões em protocolos de superovulação de fêmeas zebuínas das raças Gir, Nelore e meio sangue Gir x Nelore utilizando duas diferentes formulações comerciais de gonadotrofinas. Foram utilizadas 27 vacas, divididas em dois protocolos de superovulação: T1) 133mg Folltropin® (4 animais de cada grupo), e T2) 250UI de Pluset® (5 animais de cada grupo). Sete dias após o cio a resposta de cada doadora foi avaliada por ultrassonografia e os embriões foram coletados. Foram avaliados o número de corpos lúteos, de folículos anovulatórios, de estruturas recuperadas e o número de embriões viáveis. As variáveis foram submetidas à análise de variância, considerando-se os efeitos de raça e gonadotrofina e sua interação. As análises foram realizadas no programa estatístico SAS, v.9.2 (P

Does supplemental LH changes rate and time to ovulation and embryo yield in Santa Ines ewes treated for superovulation with FSH plus eCG? / Suplementação com LH modifica a taxa e momento da ovulação e a produção de embriões em ovelhas Santa Inês superovuladas com FSH e eCG?

The objective was to evaluate if supplemental LH given at the end of FSH treatment would synchronize the time of ovulation and increase the ovulation rate and embryo yield in Santa Ines ewes. Twenty superovulatory (SOV) programs were accomplished in cross-over design (60d interval). On D0, a CIDR device was inserted, and the device was replaced with a new one 7 days later, when 37.5µg of d-cloprostenol was administered. On D12, we started the SOV treatment, administering 256mg of pFSH 8 times, 12h apart. On D14, the CIDR was removed, and 200IU of eCG and 37.5µg of d-cloprostenol were administered. On D15, the ewes were allocated into one of two groups, a Control group (n=10) that received no supplemental LH and a LH group (n=10) treated with 7.5mg of LH 24h after CIDR removal. Artificial inseminations (AI) were performed 42 and 48h after CIDR removal. The ovarian structures were evaluated by laparoscopy immediately before each AI and 5 days later (D21) when the embryos were collected. The LH ewes ovulated more frequently (P=0.05) before 42h than between 42 and 48h. Treatment with LH tended to increase the frequency of CL and to decrease the anovulatory follicles (P=0.08). The supplemental LH increased the frequency of ewes with a high SOV response (≥11 CL; P=0.05). In conclusion, supplemental LH increased the frequency of ewes with high SOV response and ovulating prior to 42h, however, there was no synchrony between ovulations. The supplemental LH also decreased the frequency of anovulatory follicles, although the ovulation rate and embryo yield were unaffected.

O objetivo deste trabalho foi avaliar se a suplementação com LH ao final do tratamento gonadotrófico sincroniza o tempo das ovulações e incrementa a taxa de ovulação e produção de embriões em ovelhas Santa Inês. Vinte programas de superovulação (SOV) foram realizados em delineamento cross-over (intervalo de 60 dias). No D0, um CIDR foi inserido, sendo trocado por um novo sete dias após, quando 37,5µg de d-cloprostenol foram administradas. No D12, iniciou-se o tratamento com 256mg de pFSH em 8 administrações (12/12h). No D14, o CIDR foi retirado, 200UI de eCG e 37,5µg de d-cloprostenol foram administradas. No D15, as ovelhas foram alocadas em um dos dois grupos: Controle (n=10), sem suplementação com LH, e LH (n=10), tratado com 7,5mg de LH, 24h após a remoção do CIDR. Inseminações artificiais (IA) foram realizadas 42 e 48h após a remoção do CIDR. As estruturas ovarianas foram avaliadas por laparoscopia imediatamente antes de cada IA e 5 dias após, quando os embriões foram colhidos. As ovelhas que receberam o LH tiveram maior frequência de ovulações antes de 42h (P=0,05). O tratamento com LH tendeu em incrementar a frequência de CL e diminuir a de folículos anovulatórios (P=0,08). A suplementação com LH incrementou (P=0,05) a frequência de ovelhas com alta resposta superovulatória (≥11 CL; P=0,05). Em conclusão, a suplementação com LH incrementou a frequência de ovelhas com alta resposta e ovulações antes de 42h depois da remoção do CIDR, entretanto, não houve sincronia entre as ovulações. A suplementação diminuiu a frequência de folículos anovulatórios, embora a taxa de ovulação e a produção de embriões permaneceram inalteradas.

Desempenho de novilhas Holandês na produção de embriões F1 Holandês-Zebu, em condições tropicais / Performance of Holstein heifers for F1 Holstein-Zebu embryo production, in tropical conditions

A produção in vivo de embriões bovinos é uma alternativa para a formação e manutenção de rebanhos mestiços F1 destinados à produção de leite. Objetivou-se estudar o potencial de utilização de novilhas da raça Holandês, mantidas em pasto e suplementadas, como doadoras de embrião, nas épocas de verão e inverno. Procederam-se superovulação e coleta de embriões em sete novilhas em cada época. Foram obtidos os dados climáticos, a temperatura retal e a frequência respiratória das doadoras. No verão, observou-se maior índice de temperatura e umidade (ITU) às 6h, 12h e 18h, bem como maior (P0,05) na média de estruturas recuperadas (20,14±17,47 vs. 8,57±9,40), embriões viáveis (14,57±11,91 vs. 7,14±7,24) e congeláveis (13,28±11,39 vs. 6,57±6,24) obtidos no inverno e no verão, respectivamente. Sob as condições estudadas, novilhas da raça Holandês podem ser utilizadas para a produção de embriões F1, tanto no verão, quanto no inverno.

In vivo embryo production (embryo transfer) is an alternative for F1 dairy herds formation and maintenance. The aim of this study was to evaluate the potential of utilization of grazing and supplemented Holstein heifers as embryo donors in summer or winter. Superovulation was performed in seven heifers on each season. Climatic parameters, as well as rectal temperature and respiratory rate of donors were measured. Temperature and humidity index (THI) was higher (p0.05). Holstein heifers can be used as embryo donors in both summer and winter, under the given conditions.

Comparação de diferentes técnicas de sincronização da emergência da onda folicular visando a superovulação em bovinos / Comparative technics of follicular wave emergence synchronization in the cattle superovulation

Foram avaliadas quatro técnicas de sincronização da onda folicular em protocolos de superovulação. Para tal, foram utilizadas 112 vacas doadoras, das raças Simental, Limousin e Red Angus, com escore corporal médio de 3,0. Os animais foram divididos aleatoriamente em cinco grupos experimentais de acordo com o método de sincronização da emergência da onda folicular. Foram realizadas 30 superovulações em cada grupo, considerando os seguintes protocolos: GI - grupo controle – animais superovulados entre o 8o e o 12o dia do ciclo estral (dia zero = estro); GII – animais que sofreram punção folicular no 9o dia (dia 0 = estro) e início do tratamento superovulatório no 11o dia; GIII – animais que sofreram punção folicular em fase não conhecida do ciclo estral, associada ao uso de um dispositivo intravaginal contendo progesterona (P4) e tratamento superovulatório iniciado 48h após a punção, GIV – animais que utilizaram implante intravaginal de progesterona colocadoem fase aleatória do ciclo estral, mantido por nove dias, associado à administração de 50 mg de P4 e de 2mg de benzoato de estradiol, sendo o tratamento superovulatório iniciado cinco dias após a colocação do dispositivo e GV – animais que receberam implante intravaginal de P4 colocado em fase aleatória do ciclo estral e mantido por oito dias, associado à administração de 50mg de P4 e 2mg de 17â-estradiol, sendo o tratamento superovulatório iniciado quatro dias após a colocação do dispositivo. Nos grupos I, II, III, IV e V o total de estruturas coletadas e de embriões viáveis foram, respectivamente (13,53±9,23 vs 13,87 ± 7,85 vs 18,70 ± 10,88 vs 9,03 ± 4,97 vs 13,60 ± 8,39) e (8,43±5,68 vs 8,27 ± 7,06 vs 10,47 ± 8,19 vs 5,37 ± 2,92 vs 7,23 ± 5,30). Os resultados observados no GIII foram superiores ao GI, GII, GIV e GV (P 0,05), enquanto o desempenho de GIV foi inferior (P<0,05). Os resultados permitem concluir que é possível sincronizar a emergência da onda folicular de vacas doadoras, com início da superovulação em qualquer momento do ciclo estral, e que o tratamento progestágeno associado à punção folicular oferece os melhores resultados.

We evaluated four different techniques of follicular wave synchronization by comparing total number of structures recovery, number of viable and degenerated embryos, number of oocytes recovery and cost of uterine flushing. One hundred twelve Simental, Limousin and Red Angus donators were randomly allocated in five treatment groups according to protocol used for follicular wave emergence synchronization. Thirty superovulations were performed in each group, the programs were: G1- Control, superovulation treatment between days 8 and 12 of the estrous cycle; G2- follicle aspiration on day 9 of the estrous cycle; G3- follicle aspiration plus intravaginal progesterone implant; G4- intravaginal progesterone implant plus estradiol benzoate and G5- intravaginal progesterone implant plus estradiol-17â. Artificial insemination was performed twice, 12 and 24 hours after detection of behavioral estrus. Embryo collection was performed on day 7 after inseminations. Total number of recovered structures (18,70 ± 10,88 vs 13,53 ± 9,23) and viable embryos (10,47 ± 8,19 vs 8,43 ± 5,68) were higher (P0,05) were detected amongst groups 2, 5 and 1, while performance of G4 was the lowest (P<0,05). Results demonstrate to be possible synchronize follicular wave emergence by initiating superstimulation at any time of the estrous cycle. Additionally we verified that the program using progesterone associated to follicular ablation had the best results in synchronizing follicular wave emergence aiming superstimulation in cattle.

Análisis de costos de esquemas de transferencia de embriones bovinos utilizados en Colombia / Custo análise de esquemas de transferência de embriões de bovinos utilizado na Colômbia / Cost analysis of protocols for transfer of bovine embryos used in Colombia

En el presente trabajo se presenta el análisis de los costos de tres esquemas de transferencia de embriones aplicados en Colombia, realizado con base en la cotización de los productos en las casa comerciales a precios actualizados del año 2008. Las fuentes de variación consideradas en el análisis fueron las siguientes:1) superovulación (SOV) de donadoras, 2) sincronización de las receptoras, y 3) mano de obra. Los esquemas comparados fueron:esquema 1 (E1), sincronización con implantes de progesterona, dosis constante de FSH y sincronización de la ovulación con GnRH, seguidas de la IA; esquema 2 (E2), sincronización con prostaglandinas, dosis constante de FSH, LH e inseminación; y esquema 3 (E3), sincronización con progesterona, dosis constante de FSH, prostaglandina, GnRH (36h), LH e IA. El costo por embrión transferible producido se calculó con base en 6.3, 6.6, y 10.3 embriones transferibles/lavado, para los esquemas 1, 2, y 3, respectivamente; cuatro lavados/donadora/año, y 50 o 100% de embriones implantados, para los tres esquemas. Los costos estimados por embrión transferible, asumiendo un 100% de tasas de gestación fueron:US 239.8 ($ 479.585.7), US 156 ($ 312.879.0), y US 115.1 ($ 230.186.5), para los esquemas E1, E2 y E3, respectivamente, sin diferencias estadísticas significativas (p>0.05) en los componentes de costos entre esquemas. Los costos aumentaron a US 359.7 ($719.378.6), US 234.7 ($ 469.318.4), y US 172.6 ($ 345.279.7), respectivamente, cuando se incluyeron las pérdidas por embriones transferidos no implantados (50%). En el trabajo se discuten otros costos fijos del proceso de TE que fueron invariables para los tres esquemas. Hasta donde se pudo consultar la literatura, este es el primer reporte que hace un análisis de costos de programa de TE en Colombia. Este trabajo aporta elementos del sistema de costos que se proponen para el cálculo de costos en programas de transferencia de embriones.

In this work an estimated calculation of the cost of three of the most common protocols for superovulation and embryo trasnsfer in Colombia is presented. Estimate costs were defined according to commercial avalilable products at december 2005, taking into account the following sources of costs: 1) Superovulation of donor cows, 2) sinchronization of receptor cows, and 3) personnel. Hormonal schedules that were analyzed included: schedule 1 (S1), sinchronization with progesterone implants, FSH (continuous dose) GnRH (synchronization of ovulation), and AI; schedule 2 (S2), sinchronization with two dose prostaglandins, FSH (continuous dose), LH source and insemination; and schedule 3 (S3), sinchronization with progesterone implants, FSH (continuous dose), prostaglandin, GnRH (36h) after, and AI. Costs were calculated on the basis of 6.3, 6.6, and 10.3 transferable embryos/flush, for schedule 1, 2 and 3, respectively; flushes/donor/year (n = 4), and global pregnancy rate (50 or 100%). The estimated costs for transferable embryo were US 239.8 ($ 479.585.7), US 156 ($ 312.879.0), y US 115.1 ($ 230.186.5) for S1, S2, and S3, respectively. No statistically significant differences (p>0.05) between schedules were found for cost components. Average costs/transferable embryo were increased to US 359.7 ($719.378.6), US 234.7 ($ 469.318.4), y US 172.6 ($ 345.279.7), respectively, when 50% of transferred embryo losses were included in the analysis. To our knowledge, this is the first report on estimated costs for embryo transfer in Colombia. In this work several cost components for calculating the cost of ET according to each hormonal schedule are provided.

Neste trabalho apresenta a análise dos custos de transferência embrionária três esquemas utilizados na Colômbia, feita com base no preço de produtos comerciais na casa dos preços em 2005. Os regimes avaliados hormônio-cio referência ao: esquema 1 (E1), sincronização com progesterona implantes, estável dose de FSH e de calendário da ovulação com GnRH, seguido pelo IA; esquema 2 (E2), sincronização com prostaglandinas, estável dose de FSH, LH e de inseminação; e esquema 3 (E3), sincronização com progesterona, estável dose de FSH, prostaglandina, GnRH (36h), LH e AI. As fontes de variação consideradas na análise foram as seguintes: 1) superovulação (SOV) da doadora, 2) sincronização do destinatário, ET 3) personel. Como fontes de variação na análise foram consideradas as seguintes: 6.3, 6.6 et 10.3 embriões transferibles produzidos/lavagem, lavados/doadora/ano (n = 4), e 50 o 100% taxa de gestação. Os custos estimados para a implantação do embrião para E1, E2 e E3, foram E.U. $ 239.8 ($ 479.585.7), E.U. 156 ($ 312.879.0), e E.U. 115.1 ($ 230.186.5), respectivamente, que passou a assumir as perdas embriões não implantados (50% aprox.) e receber o valor de E.U. $ 359.7 ($719.378.6), E.U. $ 234.7 ($ 469.318.4), e E.U. $ 172.6 ($ 345.279.7). No que diz respeito poderia consultar a literatura, este é o primeiro relatório que uma análise de custos TE programa na Colômbia. Este trabalho traz elementos do sistema de custos que são propostos para o cálculo dos custos de programas de transferência embrionária.

Racionalidad de los esquemas de superovulación y sincronización en la transferencia de embriones en bovinos: ¿terapéutica basada en la evidencia o ausencia de ética / Racionalidade dos esquemas de superovulação e sincronização na transferência de embriões em bovinos: terapêutica baseada em provas ou falta de ética / Rational of superovulation and synchronization protocols for bovine embryo transfer ¿Evidence-based therapeutics or lack of ethics

Desde el inicio del uso intensivo de la transferencia de embriones (TE) en Colombia, los esquemas hormonales para la inducción de la superovulación (SOV) en las donadoras y la sincronización de las receptoras (SR), se han aplicado de conformidad con los estudios realizados en otras partes del mundo. Una gran cantidad de variaciones en los esquemas está disponible en la literatura, cuya aplicación no ha obedecido al diseño de estudios clínicos completos, sino que se basan en el principio de la utilización de productos hormonales por su presumida farmacología, sin hacer seguimiento ni de su farmacocinética ni de los potenciales efectos colaterales adversos en la fertilidad. Los esquemas utilizados podrían tener efectos colaterales asociados de manera directa o indirecta con el uso incontrolado de hormonas exógenas, o con el tiempo durante el cual las donadoras o receptoras son sometidas a los tratamientos, olvidando aspectos fundamentales de la ética en la experimentación animal. La proliferación de esquemas de SOV y de SR busca mejorar las tasas de respuesta en la producción de embriones de calidad I y II (transferibles o congelables), y aumentar las tasas de gestación de los embriones transferidos, pero los resultados no han mejorado significativamente a lo largo de los últimos 20, situación común en todos los países del mundo. En el presente trabajo se hace una revisión sobre el uso de hormonas en los esquemas de SOV y sincronización de receptoras, con énfasis en la racionalidad del uso de las hormonas y los resultados obtenidos. Finalmente, se proponen varios elementos de juicio para plantear una discusión sobre la racionalidad y la bioética de los esquemas utilizados en la TE.

Since the beginning of the use of bovine embryo transfer (ET) in Colombia, hormonal protocols for superovulation (SOV) of donors and for synchronization of recipients (RS) have been used in accordance with protocols reported elsewhere. Several variations of ET protocols have been reported most of they not based in controlled clinical studies but in the supposed pharmacological mechanisms of action of the used hormones, neither with pharmacokinetic studies nor considering the potential collateral effects on cow’s fertility. Such collateral effects could be directly or indirectly related with the uncontrolled use of exogenous hormones, or with the time-related additional open days of donor and recipients, without considering the bioethics for animal experimentation. The huge proliferation of protocols for SOV and RS aims for improving both grade I and II (transferable or freezable embryos) embryo yield per transfer, and pregnancy rates for transferred embryos, without having achieved significant improvements during the last 20 years all around the world. In the present review we critic the use of exogenous hormones in bovine ET with emphasis in the rationality of indiscriminating use of exogenous hormones and embryo yield. Finally, we suggest several arguments on the bioethics of the protocols for SOV and RS in bovine ET.

Desde o início da transferência de embriãos (TE) na Colômbia, nos esquemas hormonais para a indução da superovulação (SOV) no dadora e sincronização do receptor (SR), foram executadas de acordo com estudos realizados noutras partes do mundo. Um lote de variações nos esquemas está disponível na literatura, cuja execução não tenha obedecido a concepção dos estudos clínicos completos, sem controlo ou a sua farmacocinética ou potenciais efeitos colaterais adversos sobre a fertilidade. Os esquemas utilizados poderiam ter efeitos secundários associados direta ou indiretamente com o uso descontrolado de hormônios exógenos, ou o tempo durante o qual o doador ou receptor são submetidos a tratamento, ignorando os aspectos-chave da ética na experimentação animal. A proliferação de esquemas SOV e SR pretendem melhorar as taxas de resposta na produção de embriões qualidade I e II (transferíveis ou congeladas) eu aumento das taxas de gravidez de embriões transferidos, mas os resultados não têm melhorado significativamente ao longo dos últimos 20, uma situação comum em todos os países do mundo. Neste documento é uma revisão sobre o uso de hormônios nas formas de SOV e sincronização de receptores, com ênfase na utilização racional das hormonais e os resultados obtidos. Por último, propomos vários elementos de juízo para levantar uma discussão sobre a racionalidade e bioética dos esquemas utilizados na TE.

Efeito do intervalo entre recrutamentos foliculares na superovulação de vacas da raça Holandesa não-lactantes / Effect of interval between follicular recruitments on superovulatory response in non-lactanting Holstein cows

Vacas da raça Holandesa não-lactantes, distribuídas em dois grupos, foram sincronizadas com o protocolo Ovsynch modificado. No dia sete (dia 0 = dia do segundo GnRH), o grupo 7 (G-7; n=19) recebeu CIDR usado previamente por cinco dias e 100mcg de GnRH, e o grupo 14 (G-14; n=21), CIDR e 25mg de PGF2alfa. No dia 14 foi aspirado o folículo dominante (FD), trocado o CIDR usado por um novo e foram aplicados 25mg de PGF2alfa. Iniciou-se o tratamento com FSH 36h depois, removeu-se o CIDR com o sétimo FSH e aplicou-se GnRH 36h depois. As inseminações foram feitas 12 e 24h depois. Recuperaram-se os embriões sete dias depois da inseminação artificial. O diâmetro do FD no G-7 foi 13,1±0,57mm no dia sete e 11,2±0,57mm no dia 14. O diâmetro FD persistente no G-14 aumentou de 12,6±0,55mm no dia sete para 16,4±0,55mm no dia 14 (P<0,001). O número de folículos >8mm, 48h após o início do tratamento com FSH, foi maior (P<0,05) no G-7 (15,6±0,05) que no G-14 (12,5±0,05). Não foi detectado efeito de tratamento sobre o número de corpos lúteos e de embriões. O menor intervalo entre recrutamentos foliculares aumentou o número de folículos recrutados, porém não alterou a quantidade e a qualidade dos embriões produzidos

Dry Holstein cows were synchronized by a modified Ovsynch protocol. On day 7 (day 0 = day of the second GnRH), group 7 (G-7; n=19) received an used CIDR and GnRH (100'g). Group 14 (G-14; n=21) received an used CIDR and PGF2alpha (25mg). On day 14, the dominant follicle (DF) was removed, by aspiration; the used CIDR was changed for a new CIDR plus PGF2alpha. Thirty-six hours later, the FSH treatment was initiated. On the seventh injection of FSH, the CIDR was removed. Thirty-six hours after, the cows received GnRH. Donors were inseminated 12 and 24h after the GnRH injection. Embryos were recovered seven days after AI. The DF diameter in G-7 was 13.1mm on day 7 and 11.2mm on day 14. The persistent DF in the G-14 increased from 12.6mm on day 7 to 16.4mm on day 14 (P<0.001). The number of follicles >8mm, 48h after the beginning of the FSH treatment, was 15.6 in G-7 and 12.5 in G-14 (P<0.05). No treatment effects were detected on number of corpus luteum and embryos. The shorter interval between follicular recruitment the higher the number of recruited follicles, but it did not have effects on the number or quality of embryos produced

Efeito da superovulação sobre o desempenho de bovinos doadores de embrião importados de clima temperado para clima tropical nos dois primeiros anos de adaptação

The results of a multiple ovulation and embryo transfer (MOET) program, obtained in its first two years, were evaluated. The donor heifers were imported already pregnant from Hungary to the North-East area of Brazil. Comparisons of the results obtained in 1996 and 1997 with superovulation programs with AUSA-Superov (FSH) and Folligon (eCG) were made. The number of CL found on both ovaries was 5.3 (FSH) and 4.2 (eCG) in 1996, and 8.2 (FSH) and 9.6 (eCG) in 1997, while the number of degenerated eggs and embryos was 2.8 (FSH) and 3.8 (eCG) in 1996, and 6.5 (FSH) and 7.4 (eCG) in 1997. The number of good quality embryos was 1.9 (FSH) and 2.3 (eCG) in 1996, and 5.5 (FSH) and 4.0 (eCG) in 1997. The embryo collection efficiency was 40% (FSH) and 35% (eCG) in 1996, and 85% (FSH) and 83% (eCG) in 1997. Significant differences were found for all results obtained in 1996 and 1997 (P 0.05). Two new commercial products were used in 1997, Pluset and Folltropin-V, both with FSHp. With Pluset therapy the number of unfertilized eggs and degenerated embryos harvested was 11.7 per retrieval, while the number of good quality embryos was 5.1 per retrieval. With Folltropin therapy the number was 4.5 and 1.9, respectively, showing that better results were obtained with Pluset (P 0.05).

Avaliou-se o desempenho de fêmeas bovinas doadoras de embrião nos primeiros dois anos de trabalho em um centro do programa multiple ovulation and embryo transfer (MOET). Utilizaram-se novilhas prenhes de recente importação de clima moderado para o Nordeste Brasileiro. Compararam-se os resultados de superovulação em 1996, primeiro ano de adaptação dos animais, e 1997 com AUSA-Superov (FSH) e Folligon (eCG). O número de CL contados no ovário foi 3,3 (FSH) e 4,2 (eCG) em 1996 e 8,2 (FSH) e 9,6 (eCG) em 1997, o de óvulos e embriões degenerados coletados de 2,8 (FSH) e 3,8 (eCG) em 1996 e 6,5 (FSH) e 7,4 (eCG) em 1997, o de embriões de boa qualidade de 1,9 (FSH) e 2,3 (eCG) em 1996 e 5,5 (FSH) e 4,0 (eCG) em 1997. A eficiência da coleta foi de 40% (FSH) e 35% (eCG) em 1996 e 85% (FSH) e 83% (eCG) em 1997. Todos os valores citados para 1996 e 1997 foram significativamente diferentes (P 0,05). Em 1997 foram utilizados dois produtos novos, Pluset e Folltropin-V, ambos à base de pFSH. Com Pluset o número de óvulos e embriões degenerados lavados foi de 11,7 unidades/doadora e o número de embriões de boa qualidade foi de 5,1 unidades/lavagem. Com Folltropin-V, o número foi de 4,5 unidades/lavagem e o de embriões viáveis de 1,9 unidades/doadora. Melhores resultados foram obtidos com Pluset (P 0,05).

Effect of différente gonadotrophins on the follicular development and ovulation in guinea pig (Cavia porcellus) / Efeito de diferentes gonadotrofinas sobre o crescimento folicular e a ovulação na cobaia (Cavia porcellus)

Superovulatory response in guinea pigs submitted to various gonadotrophins was studied in 60 females, equally divided in 10 groups with 6 animals each. In a first phase, each one of 6 groups received PMSG, FSH-p in a single dosis, FSH-p in 3 doses, FSH-h, HMG and NaCI 0.9% (control group), respectively. In a second phase, 4 groups received each one, 22 IU FSH-h, 15 IU FSH-h, HMG and NaCI 0.9% (control group), respectively. Three experimental groups of 2nd. phase also received PGF2alfa. Except for the 2 controls, all groups also received HCG. The 3 first groups of 1st phase presented blocked ovulation. The PMSG-treated group showed generalized luteinization of the ovaries, and the others hadearly folicular luteinization with entrapment of ova. In 2nd phase, a group showed an average number of ovulations - considered as normal for the species - and 2 animals had superovulations. It may be concluded that PGF2alfa takes part in the ovulation mechanism of guinea pigs and that it is possible to increase multiple follicular development by using FSH-h + HCG and HMG + HCG associated or not with PGF2alfa.

Para estudar a resposta superovulatória em cobaias, frente a vários esquemas de tratamentos com diferentes gonadotrofinas, foram utilizadas 60 fêmeas, divididas em 10 grupos de 6 animais cada um. Em uma 1a fase, formada por 6 grupos, cada grupo recebeu um dos seguintes tratamentos: PMSG; FSH-p em dose única; FSH-p em 3 doses; FSH-h; HMG e solução de NaCI 0,9% (grupo controle), respectivamente. Numa 2ã fase, constituída por 4 grupos, cada um recebeu 22 Ul de FSH-h, 15 Ul de FSH-h; HMG e solução de NaCI 0,9% (grupo controie), respectivamente. Nos 3 grupos experimentais da 2a fase foi aplicada também PGF2alfa. Todos os grupos, com exceção dos 2 controles, receberam também HCG. Os 3 primeiros grupos da 1a fase tiveram ovulação bloqueada, sendo que a PMSG causou luteinização generalizada dos folículos e as demais gonadotrofinas induziram luteinização folicular precoce com aprisionamento dos óvulos. Na 2a fase, obteve-se um número médio de ovulações em um grupo e a superovulação de 2 animais. Concluiu-se que a PGF2alfa particpa dos mecanismos de ovulação na cobaia e que é possível obter aumento do crescimento folicular múltiplo com o emprego de FSH-h + HCG e HMG + HCG, associados ou não à PGFsalfa.

Biotecnologia de embriões: III - Otimização do momento da inseminação artificial em fêmeas bovinas superovuladas, para programas de transferência de embriões / Embryos' Biotecnology: III - Optimizing of the Moment of Artificial lnsemination in Superovulated Cows in Embryos Transfer Programs

O objetivo do presente trabalho foi comparar diversos esquemas de inseminação artificial (IA) utilizados em fêmeas bovinas de diferentes raças, doadoras de embriões, de forma a identificar o momento correto da inseminação em programas de transferência de embriões. Computou-se um total de 101 tratamento de indução à superovulação, com FSH-P e sincronização do estro pela aplicação da PGF 2. Os animais foram divididos em quatro grupos para estabelecer-se os esquemas da IA. A partir da detecção do estro, dois grupos de fêmeas sofreram três inseminações com 12h de intervalo (grupo 1) ou duas inseminações com 12h de intervalo (grupo 2), respectivamente esquema 1 e 2. Nos outros dois grupos, onde não se considerou a detecção do estro, as fêmeas sofreram três inseminações, 48, 60 e 72h após a aplicação do agente luteolítico (grupo 3), ou duas inseminações, 48 e 60h após a aplicação do mesmo agente (grupo 4), o que caracterizou os esquemas 3 e 4, respectivamente. A análise das estruturas embrionárias coletadas no 7º dia após a IA, demonstrou não haver diferença significativa (P > 0.05) entre os quatro esquemas de inseminação utilizados, em relação ao número total de embriões recuperados, ao número de embriões transferíveis, ao percentual de embriões degenerados, de não fecundados e de transferíveis. Esses achados indicam que, não foram necessárias mais do que duas inseminações nas fêmeas doadoras superovuladas, para obter-se até 54,98 ± 35,26% de embriões transferíveis, e que o momento da aplicação da PGF 2 pode ser utilizado como um parâmetro confiável, para determinar-se o momento correto da Inseminação Artificial.

The aim of this study was to compare differents artificial insemination (AI) scheduoles used in donors cows, in arder to get the optimun moment of insemination in embryo transfer programs. lt was done 101 treatments of induction to superovulation with FSH-p and estrus sincronization with PGF2. The females were divided in four groups in order to establish artificial insemination schedules. From estrus detection, two groups of donor females were inseminated three times (group 1) or twice (group 2) at 12th intervals, respectively schedule 1 and 2. In the others two groups wich the estrus detection was not considered, the donors were inseminated at 48, 60 and 72h (group 3) or twice, at 48 and 60h (group 4), after luteolitic agent administration, respectively schedules 3 and 4. The statistical analysis of recovered strutuctures on day 7 after AI showed no significant differences (P>0.05) in the four schedules in relation to total number of recovered embryos, transferable embryo number, degenerated embryos, no fertilized and transferable embryo rate. These results indicated that only two A. I. were enough to obtain 54.98 ± 35.26% of transferable embryos and the moment of PGF2 administration may be used as a trustworthy parameter in arder to establish the good time for artificial insemination on cattle.