Frequency of indeterminate results from an interferon-gamma release assay among HIV-infected individuals / Taxa de resultados indeterminados de ensaio de liberação de interferon-gama entre pessoas infectadas pelo HIV

ABSTRACT Objective: To evaluate the frequency of and factors associated with indeterminate interferon-gamma release assay (IGRA) results in people living with HIV/AIDS (PLWHA). Methods: We tested 81 PLWHA in the central-west region of Brazil, using the tuberculin skin test and an IGRA. Information on sociodemographic and clinical variables was gathered through the use of questionnaires and from medical records. The association of those variables with indeterminate results was analyzed by calculating the adjusted ORs in a multivariate logistic regression model. Concordance was evaluated by determining the kappa statistic. Results: Among the 81 patients evaluated, the tuberculin skin test results were positive in 18 (22.2%) of the patients, and the IGRA results were positive in 10 (12.3%), with a kappa of 0.62. The IGRA results were indeterminate in 22 (27.1%) of the patients (95% CI: 17.8-38.1%). The odds of obtaining indeterminate results were significantly higher in smokers (adjusted OR = 6.0; 95% CI: 1.4-26.7) and in samples stored for less than 35 days (adjusted OR = 14.0; 95% CI: 3.1-64.2). Patients with advanced immunosuppression (CD4+ T-cell count < 200 cells/mm3) were at a higher risk for indeterminate results (OR adjusted for smoking and inadequate duration of sample storage = 4.7; 95% CI: 0.91-24.0), although the difference was not significant. Conclusions: The high prevalence of indeterminate results can be a major limitation for the routine use of IGRAs in PLWHA. The need to repeat the test increases its costs and should be taken into account in cost-effectiveness studies. The processing of samples can significantly alter the results.

RESUMO Objetivo: Avaliar a frequência de resultados indeterminados de um interferon-gamma release assay (IGRA, ensaio de liberação de interferon-gama) e os fatores relacionados com esses resultados em pessoas vivendo com HIV/AIDS (PVHA). Métodos: Foram avaliadas 81 PVHA na região Centro-Oeste do Brasil, por meio do teste tuberculínico e de um IGRA. Informações a respeito de variáveis sociodemográficas e clínicas foram obtidas por meio de questionários e prontuários médicos. A relação entre essas variáveis e os resultados indeterminados foi avaliada por meio do cálculo da OR ajustada em um modelo de regressão logística multivariada. A concordância foi avaliada por meio do coeficiente kappa. Resultados: Os resultados do teste tuberculínico e do IGRA foram positivos em 18 (22,2%) e 10 (12,3%), respectivamente, dos 81 pacientes avaliados (κ = 0,62). O resultado do IGRA foi indeterminado em 22 (27,1%) dos pacientes (IC95%: 17,8-38,1%). A chance de resultados indeterminados foi significativamente maior em fumantes (OR ajustada = 6,0; IC95%: 1,4-26,7) e em amostras armazenadas durante menos de 35 dias (OR ajustada = 14,0; IC95%: 3,1-64,2). Pacientes com imunossupressão avançada (contagem de células T CD4+ < 200 células/mm3) apresentaram maior risco de resultados indeterminados (OR ajustada para tabagismo e tempo inadequado de armazenamento das amostras = 4,7; IC95%: 0,91-24,0), embora a diferença não tenha sido significativa. Conclusões: A alta prevalência de resultados indeterminados pode ser um grande obstáculo ao uso rotineiro de IGRAs em PVHA. A necessidade de repetir o teste aumenta seu custo e deve ser levada em conta em estudos da relação entre custo e eficácia. O processamento das amostras pode alterar significativamente os resultados.

Accuracy of the QuantiFERON-TB Gold in Tube for diagnosing tuberculosis in a young pediatric population previously vaccinated with Bacille Calmette-Guerin / Precision del quantiferon-tb gold in tube en el diagnostico de tuberculosis en una poblacion pediatrica joven previamente vacunada con Bacille Calmette-Guerin / Acurácia do QuantiFERON-TB Gold in Tube no diagnóstico de tuberculose em uma população pediátrica jovem previamente vacinada com Bacille Calmette-Guérin

Objective: To evaluate the accuracy of an interferongamma release assay (QuantiFERON-TB Gold in Tube) for diagnosing Mycobacterium tuberculosis infection in a young pediatric population. Methods: 195 children previously vaccinated with BCG were evaluated, being 184 healthy individuals with no clinical or epidemiological evidence of mycobacterial infection, and 11 with Mycobacterium tuberculosis infection, according to clinical, radiological, and laboratory parameters. A blood sample was obtained from each child and processed according to the manufacturer's instructions. The assay performance was evaluated by a Receiver Operating Characteristic (ROC) curve. Results: In the group of 184 non-infected children, 130 (70.6%) were under the age of four years (mean age of 35 months). In this group, 177 children (96.2%) had negative test results, six (3.2%) had indeterminate results, and one (0.5%) had a positive result. In the group of 11 infected children, the mean age was 58.5 months, and two of them (18%) had negative results. The ROC curve had an area under the curve of 0.88 (95%CI 0.82-0.92; p<0.001), disclosing a predictive positive value of 81.8% for the test (95%CI 46.3-97.4). The assay sensitivity was 81.8% (95%CI 48.2-97.2) and the specificity was 98.8% (95%CI 96-99.8). Conclusions: In the present study, the QuantiFERON-TB Gold in Tube performance for diagnosing M. tuberculosis infection was appropriate in a young pediatric population. .

Objetivo: Evaluar la precisión de una prueba de liberación de interferón gama (QuantiFERON-TB Gold in Tube) para el diagnóstico de la infección por el Mycobacterium tuberculosis en una población pediátrica. Métodos: Se evaluaron 195 niños previamente vacunados con BCG, siendo 184 niños sanos sin evidencia clínica o epidemiológica de infección por el M. tuberculosis, y 11 niños con infección, definida conforme a criterios clínicos, radiológicos y laboratoriales. Se obtuvo una muestra de sangre de cada niño, que fue procesada conforme a las instrucciones del fabricante. El desempeño del ensayo fue evaluado mediante una curva de características operacionales (curva ROC). Resultados: En el grupo de 184 niños no infectados, 130 (70,6%) tenían menos que cuatro años (promedio de 35 meses). En este grupo control, 177 niños (96,2%) tuvieron un resultado negativo de la prueba, mientras que 6 niños (3,2%) presentaron resultado indeterminado, y un niño (0,5%) tuvo un resultado positivo. En el grupo de 11 niños con infección, el promedio de edad era de 58,5 meses, y 2 niños (18%) presentaron resultado negativo. La curva ROC determinó un área bajo la curva de 0,876 (95%IC 0,82-0,92; p<0,001), evidenciando un valor predictivo positivo del 81,8% para la prueba (95%IC 46,3-97,4). La sensibilidad de la prueba fue de 81,8% (95%IC, 48,2-97,2) y la especificidad de 98,8% (95%IC, 96-99,8). Conclusión: En el presente estudio, el desempeño del QuantiFERON-TB Gold in Tube para el diagnóstico de la infección por el M. tuberculosis fue adecuado cuando utilizado en una población pediátrica joven. .

Objetivo: Avaliar a acurácia de um teste de liberação de interferon-gama (QuantiFERON-TB Gold in Tube) para diagnosticar a infecção pelo Mycobacterium tuberculosis em uma população pediátrica. Métodos : Avaliaram-se 195 crianças previamente vacinadas com BCG, sendo 184 sadias, sem evidência clínica ou epidemiológica de infecção pelo M. tuberculosis, e 11 com infecção, definida de acordo com critérios clínicos, radiológicos e laboratoriais. Obteve-se uma amostra de sangue de cada criança, processada conforme as instruções do fabricante. Avaliou-se o desempenho do ensaio por meio de uma curva de características operacionais (curva Receiver Operating Characteristic - ROC). Resultados : No grupo de 184 crianças não infectadas, 130 (70,6%) eram menores de quatro anos (média de 35 meses). Nesse grupo, 177 crianças (96,2%) tiveram resultado negativo do teste, seis (3,2%) apresentaram resultado indeterminado e uma (0,5%) teve resultado positivo. No grupo de 11 crianças com infecção, a idade média era de 58,5 meses e duas (18%) apresentaram resultado negativo. A curva ROC determinou uma área sob a curva de 0,88 (IC95% 0,82-0,92; p<0,001), evidenciando um valor preditivo positivo de 81,8% para o teste (IC95% 46,3-97,4). A sensibilidade do teste foi de 81,8% (IC95% 48,2-97,2) e a especificidade, de 98,8% (IC95% 96-99,8). Conclusões: No presente estudo, o desempenho do QuantiFERON-TB Gold in Tube para o diagnóstico da infecção pelo M. tuberculosis foi adequado quando utilizado em uma população pediátrica jovem. .

Perfil de células natural killer e dendríticas em casos de soroconversão espontânea e infecção crônica pelo vírus da Hepatite C / Profile of natural killer and dendritic cells in cases of spontaneous clearance and chronic infection with Hepatitis C virus

INTRODUÇÃO: O fato do vírus da Hepatite C (HCV) estabelecer uma infecção crônica persistente, na maioria dos casos, mesmo sendo reconhecido e alvejado pelos sistemas imune inato e adaptativo sugere que o mesmo tenha desenvolvido estratégias eficazes para driblar a ação desses sistemas. O HCV interfere na fase inicial de ativação da resposta imune adaptativa alterando a função das células dendríticas (DCs), o que provavelmente leva a uma ativação deficiente das células natural killer (NKs) e de linfócitos T. Portanto, a realização de estudos sobre DCs e NKs na infecção pelo HCV se torna de fundamental importância para a compreensão da patogênese e persistência desta infecção. MÉTODOS: Foram selecionados indivíduos com resolução espontânea da infecção pelo HCV, indivíduos com infecção crônica e indivíduos saudáveis. A técnica de citometria de fluxo foi utilizada para a determinação da frequência e do fenótipo de células dendríticas e NKs nesses indivíduos. Além disso, foi avaliada a atividade citotóxica das células NKs sob estímulo de IL-12 e IL-18, e também da linhagem K-562. RESULTADOS: A frequência de DC mielóides (mDC) expressando CD86, nos indivíduos crônicos, foi elevada e uma correlação positiva com a carga viral foi observada. Na análise do ensaio funcional foi observado que as populações de células NKs CD7+ CD57+ apresentaram maior expressão da molécula CD107a e baixa produção de IFNy nos indivíduos com infecção crônica. A constante exposição das células imunes ao IFN-alfa, induzido durante a infecção pelo HCV, resulta na polarização do fenótipo citotóxico, caracterizado por células NK ativadas com elevado poder de degranulação, mas com deficiente produção de IFN-y. CONCLUSÕES: As frequências das células DCs e NKs eram semelhantes em todos os indivíduos. A expressão da molécula CD86 na superfície das mDCs pode ter sido induzida pela presença do HCV, uma vez que foi observada correlação positiva com a carga viral...

INTRODUCTION: Hepatitis C virus (HCV) develops a chronic persistent infection in most of the cases, even being recognized and targeted by the innate and adaptive immune systems, suggests that the virus have developed effective strategies to circumvent the action of these systems. HCV interferes in the initial activation of the adaptive immune response by altering the function of dendritic cells (DCs), which probably leads to a deficient activation of natural killer cells (NK) and T lymphocytes. Therefore, studies of DCs and NK in HCV infection are very important for understanding the pathogenesis and the persistence of this infection. METHODS: We selected subjects with spontaneous resolution of HCV infection, with chronic infection and healthy subjects. Flow Cytometry was used to determine the frequency and phenotype of dendritic cells and NK cells of these individuals. In addition, we evaluated the NK cell cytotoxic activity in response to stimulation of IL-12 and IL-18 and in co-cultivation with the cell line K-562. RESULTS: In individuals with chronic infection, the frequency of myeloid (m) DC cells expressing CD86 was elevated and a positive correlation between these cells and viral load was observed. It was observed in chronic infected individuals that NK cells co-expressing CD7 and CD57 showed higher expression of CD107a and low production of IFN gamma. The constant exposure of immune cells to IFN-alfa induced during HCV infection results in the polarization of cytotoxic phenotype characterized by activated NK cells with high power degranulation, but with impaired production of IFN-y. CONCLUSIONS: The frequency of DCs and NK cells were similar in all individuals. The expression of CD86 molecule on the surface of mDCs may have been induced by the presence of HCV, since a positive correlation was observed with viral load. Cytotoxic NK cells, highly differentiated and unable to produce IFN-y, were the most frequent in chronic HCV infection...