Hematological and biometric traits of tuvira Gymnotus inaequilabiatus (Valenciennes, 1839) (Gymnotiformes: Gymnotidae) from the Brazilian Pantanal

ABSTRACT This study describes the hematological and biometric characteristics of male and female Gymnotus species from the Pantanal, Mato Grosso do Sul state, Brazil. Fifty adult specimens of Gymnotus inaequilabiatus were weighed, measured, and then euthanized. Blood was collected by puncturing the celiac mesenteric vein to determine the hematocrit, hemoglobin content, number of erythrocytes, mean corpuscular volume, mean corpuscular hemoglobin concentration, glucose level, absolute value of leukocytes, and relative value of leukocytes and thrombocytes. Body weight and relative condition factor did not differ (P > 0.05) between the sexes, as well as erythrogram and the blood glucose values. Hematocrit ranged from 18.0% to 54.0%; hemoglobin from 1.1 to 14.7 g dL-1; number of erythrocytes from 0.2 × 106 to 3.8 ×106 µL-1; MCV from 24.2 to 321.7 fL; and MCHC from 4.2 to 44.5 g dL-1. In the differential count were identified thrombocytes, lymphocytes, neutrophils, monocytes, basophils, immature leukocytes, and PAS-positive granular leukocyte (PAS-GL). Females had a higher percentage of immature leukocytes (P < 0.05) than males. Glucose levels, erythrogram, leukogram, and the morphology of defense cells are comparable to other fish species of the Pantanal. Thrombocytes were the most frequent defense cells, followed by lymphocytes and neutrophils.

Caracterización hematológica de hicoteas (Trachemys callirostris Gray, 1856) en Córdoba, Colombia / Hematological Characterization of Hicotea Turtles (Trachemys callirostris Gray, 1856) in Córdoba (Colombia) / Caracterização hematológica de hicoteas (Trachemys callirostris Gray, 1856) em Córdoba, na Colômbia

Se recolectaron 69 muestras de Trachemys callirostris en condiciones ex situ e in situ, para determinar sus parámetros hematológicos, comparar estos valores (considerando sexo, edad y condición) y establecer la morfología de sus células. A los animales se les extrajo sangre de la vena yugular. Se determinaron hematocrito, concentración de hemoglobina, recuentos total de eritrocitos, leucocitos y trombocitos e índices eritrocitarios (volumen corpuscular medio, hemoglobina corpuscular media y concentración de hemoglobina corpuscular media). En extendidos sanguíneos se realizaron el conteo diferencial de leucocitos y la descripción de la morfología de las células encontradas. Los valores promedio encontrados para todos los individuos fueron: hematocrito (29,9% ± 5,1), hemoglobina (4,0 ± 1,0 g/dl), VCM (327 ± 15,3 fl), HCM (45 ± 17,5 pg), CMHC (14 ± 6%), conteo total de trombocitos (15,0 ± 5,4 X 10³ µL), conteo total de eritrocitos (0,92 x 10(6)/µL ± 0,12), conteo total de leucocitos (12,10 ± 5,0 x 10³ µL). Al aplicar el análisis de varianza se encontró que no existe diferencia estadísticamente significativa (p < 0,05) entre Trachemys callirostris de distintos pesos (500 a 2000 g). Sin embargo, existen diferencias significativas (p < 0,05) y altamente significativas (p < 0,01) de la mayoría de las variables hematológicas entre sexos y entre hicoteas mantenidas en condición in situ y ex situ. De esta forma, las diferencias encontradas entre individuos, dependiendo su peso, sexo y condición de mantenimiento (in situ o ex situ), sirven como referencia para el establecimiento de protocolos de manejo de la especie en cautiverio.

69 samples from Trachemys callirostris were collected in situ and ex situ, to determine their hematological parameters, to compare these values (considering sex, age, and condition), and to establish the morphology of their cells. Blood was collected from the jugular vein of the animals. Hematocrit, hemoglobin concentration, total counts of erythrocytes, leukocytes and thrombocytes, and red cell indices were determined (mean corpuscular volume, mean corpuscular hemoglobin, and mean corpuscular hemoglobin concentration). Differential leukocyte count was performed, and the morphology of cells found in blood smears was described. The average values found for all individuals were: hematocrit (29.9% ± 5.1), hemoglobin (4.0 ± 1.0 g / dl), MCV (327 ± 15.3 fL), MCH (45 ± 17.5 pg), MCHC (14 ± 6%), total count of thrombocytes (15.0 ± 5.4 x 10³ µL), total count of erythrocytes (0.92 x 10(6) µL ± 0.12), and total count of leukocytes (12.10 ± 5.0 x 10³ µL). Analysis of variance showed no statistically significant difference (p < 0.05) between Trachemys callirostris of different weights (500 to 2000 g). Nevertheless, it showed significant (p <0.05) and highly significant differences (p <0.01) for most hematologic variables between sexes and hicotea turtles maintained in situ and ex situ. Thus, differences found between individuals, depending on weight, sex and condition of maintenance (in situ or ex situ), serve as a reference to establish protocols for maintaining turtles in captivity.

Coletaram-se 69 amostras de Trachemys callirostris em condições ex situ e in situ, para determinar seus parâmetros hematológicos, comparar estes valores (considerando sexo, idade e condição) e estabelecer a morfologia de suas células. Aos animais lhes foi extraído sangue da veia jugular. Determinara-se hematócrito, concentração de hemoglobina, recontagens total de eritrócitos, leucócitos e trombócitos e índices eritrocitários (volume corpuscular médio, hemoglobina corpuscular média e concentração de hemoglobina corpuscular média). No sangue estendido foi realizada a contagem diferencial de leucócitos e a descrição da morfologia das células encontradas. Os valores médios encontrados para todos os indivíduos foram: hematócrito (29,9% ± 5,1), hemoglobina (4,0 ± 1,0 g/dl), VCM (327 ± 15,3 fl), HCM (45 ± 17,5 pg), CMHC (14 ± 6%), contagem total de trombócitos (15,0 ± 5,4 x 10³ µL), contagem total de eritrocitos (0,92 x 10(6) µL ± 0,12), contagem total de leucócitos (12,10 ± 5,0 x 10³ µL). Ao aplicar a análise de variância se encontrou que não existe diferença estatisticamente significativa (p < 0,05) entre Trachemys callirostris de diferentes pesos (500 a 2000 g). Porém, existem diferenças significativas (p < 0,05) e altamente significativas (p < 0,01) da maioria das variáveis hematológicas entre sexos e entre hicoteas mantidas em condição in situ e ex situ. Desta forma, as diferenças encontradas entre indivíduos, dependendo seu peso, sexo e condição de manutenção (in situ ou ex situ), servem como referência para o estabelecimento de protocolos de manejo da espécie em cativeiro.

Ecotoxicity and hematological effects of a natural insecticide based on tobacco (Nicotiana tabacum) extract on Nile tilapia (Oreochromis niloticus) / Ecotoxicidade e efeitos hematológicos de um inseticida natural de extrato de tabaco (Nicotiana tabacum) em tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus)

Natural insecticides from plant extracts represent an alternative to the highly toxic synthetic products in order to reduce environmental contamination; however some might also be toxic for non-target organisms. The present study determined the 50% lethal concentration (48h; LC50) for adults Nile tilapia (Oreochromis niloticus) exposed to the natural insecticide Fumydro®, based on the tobacco plant (Nicotiana tabacum), and evaluated its effect on hematological variables. After preliminary tests, adult specimens of O. niloticus were exposed to four Fumydro® concentrations (200, 300, 400 and 500 µL L-1). The 48h; LC50 of Fumydro® was determined at 370 ± 50 µL L-1. The surviving fish after exposure to Fumydro® showed an increase in the number of red blood cells, hemoglobin concentration, mean corpuscular hemoglobin and mean corpuscular hemoglobin concentration. The number of thrombocytes and leukocytes has not changed, unlike the differential leukocyte count that presented an increased percentage of neutrophils. The results indicated that the insecticide Fumydro® is highly toxic to Nile tilapia and changes in erythrocyte variables suggested the induction to hypoxemia with low effect on the immune system.

Inseticidas naturais produzidos a partir de extratos de plantas pode ser uma alternativa para diminuir a contaminação do ambiente por agrotóxicos sintéticos e altamente tóxicos, embora alguns deles possam também ser tóxicos para organismos não alvos. O presente estudo determinou a concentração letal 50% (CL50; 48h) para tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) expostas ao inseticida natural Fumydro®, produzido a base de planta de tabaco (Nicotiana tabacum) e analisou o seu efeito nas variáveis hematológicas. Após testes preliminares, exemplares adultos de O. niloticus foram expostos a quatro concentrações de Fumydro® (200, 300, 400 e 500 µL L-1). A CL50; 48h foi estimada em 370 ± 50 µL L-1. Os peixes sobreviventes a exposição ao Fumydro® apresentaram aumento no número de eritrócitos, concentração de hemoglobina, hemoglobina corpuscular média e concentração de hemoglobina corpuscular média. O número de trombócitos e de leucócitos não foi alterado, mas ocorreu alteração na contagem diferencial de leucócitos ocorrendo um aumento na porcentagem de neutrófilo nos peixes expostos a 200, 300 µL L-1 de Fumydro®. Estes resultados indicaram que o inseticida Fumydro® é extremamente tóxico para tilápia do Nilo e as alterações nas variáveis eritrocitárias sugerem que causa hipoxemia, mas tem pouca ação sobre o sistema imune.

Comparative Study of Platelet Count in Different Trimesters of Pregnancy and in Non- Pregnant Women of Same Age Group.

Thrombocytes are essential for hemostasis. Increase as well as decrease in platelet count has been reported to affect the outcome of pregnancy in various studies. This study was done to find if there was any variation in the total count of platelets in the peripheral blood in different trimesters of pregnancy, when compared to the nonpregnant individuals of same age group in the local population. Peripheral blood samples were taken from pregnant women of 18-36 years of age. 20 subjects of each trimester were tested. Samples were collected from 20 non-pregnant subjects of comparable age group for control. Platelet count was done by Brecher and Cronkite method. In the non-pregnant group, the mean platelet count was 208500 per cu mm of blood (±50157). The mean platelet counts per cu mm of blood in the three consecutive trimesters were: 255900, 274800 and 283900 respectively. All the values were significantly higher (p<0.001) when compared to the non-pregnant group. Our study shows there is a definite rise in the total platelet count as pregnancy progresses towards completion. But the count does not exceed the reference values as per international standard.

Acute aerocistitis induced by thioglycolate, lipopolysaccharide and inactivated Aeromonas hydrophila in Piaractus mesopotamicus: hematological effects / Aerocistite aguda induzida por tioglicolato, lipolisacarídeo e Aeromona hydrophila inativada em Piaractus mesopotamicus: efeitos hematológicos

The effects of swim bladder injection with thioglycolate, Escherichia coli lipopolysaccharide (LPS) and heat-inactivat ed Aeromonas hydrophila were assessed on hematological responses in pacu, Piaractus mesopotamicus (Characidae). A quantitative assessment was done on erythrocytes, thrombocytes e leucocytes at 6, 24, and 48 h pos-injection of the inflammatory agents and compared with fish injected with saline solution (control). Fish injected with inactivated A. hydrophila showed a reduction of erythrocytes and hemoglobin, whereas the hematocrit increased 6 h pos-injection. The results show that thioglycolate and LPS also induced a reduction on hemoglobin and an increase on the hematocrit. The thrombocytes count decreased 6 h post A. hydrophila injection, whereas increased 48 hours post LPS injection. The leukocytes count increased after 6 h post A. hydrophila injection, while the lymphocytes and PAS-positive granularleukocytes (PAS-LG) count decreased after 24 h post injection. In fish injected with thioglycolate or with LPS showed an increase in the LG-PAS counts when compared to A. hydrophila or control groups. The monocytes count was not affected by the different inflammatory agents.

Os efeitos da injeção de tioglicolato, lipolissacarídio de Escherichia coli e Aeromonas hydrophila inativada na bexiga natatória de pacus, Piaractus mesopotamicus (Characidae) foram avaliados quanto às respostas de células vermelhas, leucócitos e trombócitos do sangue. Ensaios quantitativos de eritrócitos, leucócitos e trombócitos foram realizados 6, 24 e 48 h após os estímulos e comparados com peixes que receberam solução salina 0,65% pela mesma via. Peixes inoculados com A. hydrophila apresentaram redução do número de eritrócitos e da taxa de hemoglobina enquanto o hematócrito aumentou 6 h após o estímulo. Os resultados mostraram que o tioglicolato e o LPS também induziram redução da hemoglobina e aumento do hematócrito. A contagem de trombócitos diminuiu 6 h após a inoculação de A. hydrophila inativada e aumentou 48 horas após a injeção de LPS. A contagem de leucócitos aumentou 6 h após a inoculação de A. hydrophila enquanto a de linfócitos a leucócitos granulares PAS positivos (PAS_LG) diminuiu 24 h depois. Peixes injetados com tioglicolato o LPS apresentaram aumento do número de LG_PAS em relação aos inoculados com A. hydrophila inativada ou grupo controle. A contagem de monócitos não foi afetada pelos diferentes agentes.

Methodological limitations of counting total leukocytes and thrombocytes in reptiles (Amazon turtle, Podocnemis expansa): an analysis and discussion / Limitações metodológicas de contagens de leucócitos e trombócitos totais em répteis (tartaruga da Amazônia, Podocnemis expansa): uma análise e discussão

The aim of this paper is to compare three different methods for counting white blood cells [WBC] (Natt and Herrick method, estimation with 1,000 and 2,000 erythrocytes) and three methods for counting total thrombocytes [TT] (Wojtaszek method, estimation with 1,000 and 2,000 erythrocytes) in a South American freshwater turtle species, Podocnemis expansa, Schweigger 1812 (Reptilia, Pelomedusidae). Direct WBC counts using the Natt and Herrick method showed limitations, which are discussed here. The WBC and TT counts using 1,000 erythrocytes from blood smears are not recommended for Amazon turtles nor other reptilian species, since wide variation in counts can be observed. Estimation methods for determining WBC and TT based on 2,000 erythrocytes of blood smears were most acceptable because they allow a differentiation between leukocytes and thrombocytes and also had a smaller variation. The methods investigated here for the Amazon turtle, which have been widely used in other reptile species, provided evidence that the most acceptable method is not that of using diluted stains and a hemocytometer.

O objetivo deste estudo foi comparar três diferentes métodos para contar leucócitos totais [LT] (método de Natt & Herrick, de estimação em 1000 e 2000 eritrócitos) e três métodos para contar trombócitos totais [TT] ( método de Wojtaszek, de estimação em 1000 e 2000 eritrócitos) em uma espécie de tartaruga de água doce da América do Sul, Podocnemis expansa, Schweigger 1812 (Reptilia, Pelomedusidae). As contagens diretas de LT usando o método de Natt & Herrick mostraram limitações que são aqui discutidas. As contagens de LT e TT usando estimativa em 1000 eritrócitos na extensão sanguínea não são recomendadas para tartaruga-da-Amazônia nem para outras espécies de répteis, pois houve ampla variação nestas contagens. Os métodos para determinar LT e TT baseados em 2000 eritrócitos nas extensões sanguíneas foram mais aceitáveis porque eles permitem uma diferenciação entre leucócitos e trombócitos, além disso, teve uma variação menor. Os métodos aqui investigados para tartaruga-da-Amazônia, os quais são amplamente usados em outras espécies de répteis, proveram evidências de que o método mais aceitável não é o que usa corantes diluentes e um hemocitômetro.