Characterization of digestive enzymes from captive Brazilian flounder Paralichthys orbignyanus / Caracterização de enzimas digestivas do linguado brasileiro de cativeiro Paralichthys orbignyanus

Abstract Knowledge of specific enzyme activity, along with animal habits and digestive capacity is essential in formulating an appropriate diet for any species. In this study, we evaluated and characterized the activity of digestive enzymes present in the liver, intestine, and stomach of Paralichthys orbignyanus. The effects of pH and temperature on enzyme activity were also evaluated via the use of specific substrates. The use of specific substrates and inhibitors showed strong evidence of the presence of trypsin (BApNA= 0.51 ± 0.2 mU mg-1), chimotrypsin (SApNA= 2.62 ± 1.8 mU mg-1), and aminopeptidases (Leu-p-Nan =0.9709 ± 0.83 mU mg-1) in the intestine. Optimum pH for the activity of trypsin, chemotrypsin, leucino aminopeptidase, amilase, and pepsin were 9.5, 9.0, 8.0, 7.5, and 3.5, respectively, while optimum temperatures were 50, 50, 50, 40, and 45 °C, respectively. These results provide additional information regarding the biology of Brazilian flounder and can be used as a basis for further studies regarding fish feeding physiology.

Resumo O conhecimento da atividade enzimática é essencial para formular uma correta dieta específica para espécie, além de estarem correlacionadas com o hábito da alimentação e capacidade digestive. Neste estudo determinamos e caracterizamos a atividade enzimática presente no intestino, estômago e fígado do linguado Paralichthys orbignyanus. Os efeitos da temperatura e pH sobre a atividade enzimática também foram avaliados utilizando substratos específicos. O uso de substratos e inibidores específicos mostrou uma forte evidência da presença da tripsina (BApNA = 0,51 ± 0,2 mU mg-1), quimotripsina (SAPNA = 2,62 ± 1,8 mU mg-1), e as aminopeptidases (Leu-p-Nan = 0,97 ± 0,83 mU mg-1) no intestino. O pH ótimo observado para a atividade de tripsina, quimotripsina, leucino aminopeptidase, amilase e pepsina foi 9,5, 9,0, 8,0, 7,5 e 3,5, respectivamente. A temperatura ótima observada foi 50, 50, 50, 40 e 45 °C, respectivamente. Estes resultados fornecem informações adicionais sobre a biologia do linguado brasileiro e pode ser usado como base para novos estudos sobre fisiologia alimentar.

Midgut of the diplopod Urostreptus atrobrunneus: structure, function, and redefinition of hepatic cells / Intestino médio do diplópodo Urostreptus atrobrunneus: estrutura, função e redefinição das células hepáticas

Abstract Diplopods are considered important macroarthropods the soil as part of its maintenance and balance. These animals usually do not occur in high densities, but population explosions caused by environmental disturbances, climate changes, and use of pesticides that eliminate possible competitors, have been reported. The millipede Urostreptus atrobrunneus Pierozzi and Fontanetti, 2006 have become a nuisance to humans in infestation sites in urban centers of the state of Sao Paulo, Brazil. As a contribution to the understanding of this potential pest, this study describes the histology, histochemistry, and ultrastructure of the U. atrobrunneus midgut, and presents the redefinition of hepatic cells somewhat controversial in the literature. The region of the midgut is characterized by the absence of a cuticular intima, and composed of a pseudostratified epithelium on a thick basal membrane, followed by a muscle layer, a layer of hepatic cells, lined by an external membrane. The morphology observed in U. atrobrunneus is similar to that reported for other species of diplopods. The hepatic cells have been previously described as randomly without forming a layer, however, the present results clearly demonstrate that these cells form a continuous layer over the whole midgut.

Resumo Diplópodos são considerados importantes macro-artrópodes do solo, uma vez que participam de sua manutenção e equilíbrio. Comumente estes animais não apresentam população numerosa, porém há relatos de explosões populacionais ocasionadas por desequilíbrios ambientais, mudanças climáticas e utilização de pesticidas que eliminam possíveis competidores. O milípede Urostreptus atrobrunneus Pierozzi e Fontanetti, 2006, têm apresentado pontos de infestação em centros urbanos, do estado de São Paulo, Brasil, causando muitos transtornos à população humana. Com objetivo de contribuir para o conhecimento desta potencial praga, este trabalho apresenta a descrição histológica, histoquímica e ultra-estrutural do intestino médio do milípede U. atrobrunneus, bem como apresenta a redefinição das células hepáticas, um tanto controversa na literatura pertinente. A região do intestino médio é caracterizada pela ausência da íntima cuticular, sendo formado por um epitélio pseudoestratificado, apoiado por uma membrana basal espessa, seguido de uma camada muscular, uma camada de células hepáticas, revestido por uma membrana externa. A morfologia observada neste trabalho assemelha-se bastante com as descrições de outras espécies de diplópodos estudadas até o momento. As células hepáticas foram previamente descritas como dispostas aleatoriamente sem a formação de uma camada, contudo, os presentes resultados demonstram claramente que estas células formam uma camada contínua ao longo de todo o intestino médio.

Characterization of digestive enzymes from captive Brazilian flounder Paralichthys orbignyanus

Abstract Knowledge of specific enzyme activity, along with animal habits and digestive capacity is essential in formulating an appropriate diet for any species. In this study, we evaluated and characterized the activity of digestive enzymes present in the liver, intestine, and stomach of Paralichthys orbignyanus. The effects of pH and temperature on enzyme activity were also evaluated via the use of specific substrates. The use of specific substrates and inhibitors showed strong evidence of the presence of trypsin (BApNA= 0.51 ± 0.2 mU mg-1), chimotrypsin (SApNA= 2.62 ± 1.8 mU mg-1), and aminopeptidases (Leu-p-Nan =0.9709 ± 0.83 mU mg-1) in the intestine. Optimum pH for the activity of trypsin, chemotrypsin, leucino aminopeptidase, amilase, and pepsin were 9.5, 9.0, 8.0, 7.5, and 3.5, respectively, while optimum temperatures were 50, 50, 50, 40, and 45 °C, respectively. These results provide additional information regarding the biology of Brazilian flounder and can be used as a basis for further studies regarding fish feeding physiology.

Resumo O conhecimento da atividade enzimática é essencial para formular uma correta dieta específica para espécie, além de estarem correlacionadas com o hábito da alimentação e capacidade digestive. Neste estudo determinamos e caracterizamos a atividade enzimática presente no intestino, estômago e fígado do linguado Paralichthys orbignyanus. Os efeitos da temperatura e pH sobre a atividade enzimática também foram avaliados utilizando substratos específicos. O uso de substratos e inibidores específicos mostrou uma forte evidência da presença da tripsina (BApNA = 0,51 ± 0,2 mU mg-1), quimotripsina (SAPNA = 2,62 ± 1,8 mU mg-1), e as aminopeptidases (Leu-p-Nan = 0,97 ± 0,83 mU mg-1) no intestino. O pH ótimo observado para a atividade de tripsina, quimotripsina, leucino aminopeptidase, amilase e pepsina foi 9,5, 9,0, 8,0, 7,5 e 3,5, respectivamente. A temperatura ótima observada foi 50, 50, 50, 40 e 45 °C, respectivamente. Estes resultados fornecem informações adicionais sobre a biologia do linguado brasileiro e pode ser usado como base para novos estudos sobre fisiologia alimentar.

Fungos aeróbios no intestino grosso de borregos e de ovelhas criados em pastagens tropicais / Aerobic fungi in the large intestine of lambs and ewes raised on tropical pastures

Fungi populations were evaluated in large intestine from sheep raised in the North of Minas Gerais, Brazil. The samples were from 39 Santa Inês crossbred ewes and 30 lambs raised on Tanzania grass (Panicum maximum cv. Tanzania), both supplemented with mineral mixtures. The clinical specimens were directly collected from rectal ampoule with sterile swabs. The development of fungal mycelium was observed in all lamb samples and positive cultures were observed in 34 ewe specimens (87.2 percent). After microculture of 40 colonies from lambs, 34 isolates of the genus Aspergillus, three of Paecilomyces spp., one Acremonium sp., and one Trichoderma sp. were identified. Out of the 39 isolates from ewes, 15 Paecilomyces spp., 11 Aspergillus spp., 11 Malbranchea spp., and one Onychocola sp. were identified. The results showed the predominance of the genus Aspergillus in the lambs, while the genus Paecilomyces, Malbranchea, and Aspergillus were predominant, in ewes.

Alterações do trato digestório de cães da raça Golden Retriever afetados pela distrofia muscular / Changes of the digestive tract of Golden Retriever dogs affected by muscular dystrophy

O modelo experimental canino Golden Retriever portador da Distrofia Muscular (GRMD) é o melhor substituto entre os modelos animais para estudar a Distrofia Muscular de Duchenne. Além da musculatura estriada, a doença pode afetar a musculatura estriada cardíaca e a musculatura lisa, e desta forma, o funcionamento do trato digestório, já que o músculo liso é o elemento primário dos órgãos tubulares. Através de estudo morfológico descritivo, o objetivo deste trabalho foi verificar se a distrofia muscular afeta a arquitetura geral do trato digestório e como se dispõe sua estrutura muscular em animais afetados. Foram realizadas avaliações descritivas macro e microscópicas com colorações de Hematoxilina-Eosina, Tricrômio de Masson e Picrosirius. Entre os resultados apresentados, verificou-se que o esôfago e o fígado dos animais afetados encontraram-se alterados, assim como o estômago não ocupava seu lugar habitual. O músculo diafragma apresentava-se atrofiado e diferenças histológicas foram encontradas na camada muscular do sistema gastrointestinal, em geral. Outras estruturas do tubo digestório de GRMDs apresentaram-se de maneira similar a de um animal normal.

The experimental canine model Golden Retriever carrier of Muscular Dystrophy (GRMD) is the best substitute of animal models to study Duchenne Muscular Dystrophy. Above striated muscle, the disease can affect the heart and smooth muscle, so the functioning of the digestive tract, as the smooth muscle is the primary element of tubular organs. Through morphological description, the purpose of this study was to determine whether the muscular dystrophy affects the overall architecture of the digestive tract and how is willing this muscular structure. Were evaluated macroscopic and microscopic optical description staining with hematoxylin-eosin, Masson's trichrome and Sirius. The esophagus and liver of affected animals were altered. The stomach of the animals did not occupy the usual space. The diaphragm muscle had atrophied. The general histological structure of the digestive tract presented in a manner similar to a normal animal. Changes and histological differences were found in the muscle layer.

Radiographic anatomy aspects and gastrointestinal transit time in Podocnemis unifilis troschel, 1848 (Testudines, Podocnemididae) / Aspectos anátomo-radiográficos e tempo de trânsito gastrintestinal em Podocnemis unifilis troschel, 1848 (Testudines, Podocnemididae)

The present study analyzed the radiographic anatomy and determined the gastrointestinal transit time of Podocnemis unifilis. We used ten animals belonging to LAPAS from the Federal University of Uberlândia, Uberlândia, Minas Gerais State, Brazil. The animals were orally fed with a barium sulphate suspension at 10 mL kg-1 mixed with mineral oil, at a ratio of 70% of barium sulphate for 30% of mineral oil. Afterwards, the animals underwent radiography in a dorsum ventriloquoal position, with the X-ray device adjusted at 72 Kv and 200 mA, in time intervals to follow the permanency of contrast in the organism. Five minutes after the contrast was supplied, the stomach was filled. After sixteen hours the contrast advanced to the small intestine. In 48 hours, the whole small intestine and part of the colon were fulfilled. On the 9th day the stomach was empty and the contrast advanced to the colon. On the 11th day, the colon was totally fulfilled, and the contrast was close to cloaca. On the 18th day all contrast was eliminated by the animal. Total time for contrast elimination was, in average, 17.6 ± 2.4 days, with the minimum of 12 and maximum of 22 days, with temperature at 27ºC. The digestion of the food was slower in the duodenum, and faster in the colon-rectum, which presents lower indices of repletion.

Avaliou-se aspectos anátomo-radiográficos bem como o tempo de trânsito gastrintestinal em Podocnemis unifilis. Foram utilizados 10 animais pertencentes ao Laboratório de Pesquisas em Animais Silvestres (LAPAS) da Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, Minas Gerais, Brasil. Aos animais foi administrada, por via oral, uma suspensão de sulfato de bário 10 mL kg-1 misturada com óleo mineral na proporção de 70% de sulfato de bário para 30% de óleo. Posteriormente, os animais foram radiografados dorso-ventralmente, com o aparelho de raios-X regulado para 72 Kv e 200 mA, em intervalos de tempo pré-estabelecidos. Em média, cinco minutos após a administração do contraste, a porção proximal do estômago estava preenchida. Após 16 horas, o contraste progrediu para o intestino delgado. Com 48 horas, todo o intestino delgado e parte do intestino grosso estavam preenchidos. No 9 dia o estômago apresentava-se vazio e o contraste progrediu para o cólon. No 11 dia, o contraste encontrava-se na região do reto e o duodeno encontrava-se vazio. No 14 dia, o intestino delgado já estava totalmente sem preenchimento. No 18 dia, todo o contraste foi eliminado. O tempo total de eliminação do contraste foi, em média, de 17,6 ± 2,4 dias, sendo o mínimo de 12 e o máximo de 22 dias em temperatura média de 27°C. A digestão do alimento foi mais lenta no duodeno e mais alta no cólon-reto, que alcançou menores índices de repleção.

Aspectos clínico-hematológicos e lesões vesicais na intoxicação crônica espontânea por Pteridium aquilinum em bovinos / Clinical and hematological aspects and urinary bladder lesions in chronic spontaneous poisoning by Pteridium aquilinum in cattle

Foram estudados casos espontâneos de intoxicação crônica por samambaia (Pteridium aquilinum) em bovinos nas formas clinicopatológicas de carcinoma de células escamosas (CCE) no trato alimentar superior (TAS) e de hematúria enzoótica bovina (HEB), provenientes da Mesorregião Centro Ocidental Rio-Grandense e encaminhados ao Laboratório de Patologia Veterinária da Universidade Federal de Santa Maria. Para o estudo clínico foram avaliados os sinais clínicos de bovinos com CCEs no TAS e com HEB e realizados hemogramas na fase terminal da doença. Os principais sinais clínicos nos bovinos com CCEs no TAS foram emagrecimento progressivo, atonia ruminal, tosse, disfagia, timpanismo e regurgitação. Nos bovinos com HEB, hematúria foi o principal sinal, observado em todos os casos, seguido de emagrecimento progressivo. No exame hematológico, 33,33 por cento dos bovinos com CCEs no TAS e 66,67 por cento dos bovinos com HEB apresentaram anemia arregenerativa. Alterações no leucograma ocorreram em alguns casos, mas linfopenia foi um achado infreqüente em ambas as formas de intoxicação. Para o estudo morfológico, foram avaliadas as bexigas de 46 bovinos com CCEs no TAS e de 11 bovinos com HEB. Macroscopicamente, 16/46 bexigas dos casos de CCEs no TAS apresentaram alterações macroscópicas, que consistiam nódulos vermelhos ou pálidos, hemorragia e papilomas; urina vermelha foi observada na necropsia de apenas três casos). Nos casos de HEB, os achados macroscópicos vesicais foram nódulos vermelhos, massas neoplásicas focalmente extensas, urina vermelha, papilomas, hemorragias e ruptura de bexiga; pielonefrite e hidronefrose foram observados em poucos casos. Histologicamente, 44/46 (95,65 por cento) bexigas de bovinos com CCEs no TAS apresentaram 22 tipos diferentes de alterações morfológicas, que foram classificadas em alterações neoplásicas (5/22) e alterações não-neoplásicas (17/22); essas últimas foram divididas em alterações epiteliais não-neoplásicas ...

Spontaneous cases of chronic poisoning by Pteridium aquilinum in cattle were studied. The clinical forms of the disease were squamous cell carcinoma (SCCs) of the upper digestive tract (UDT) and bovine enzootic hematuria (BEH). The cases were from the midland Region of the Midwest of Rio Grande do Sul State, Brazil, and were submitted to the Laboratório de Patologia Veterinária of the Universidade Federal de Santa Maria. Clinical signs and blood work were evaluated at terminal phase of disease. Cattle with UDT SCCs had progressive weigth loss, ruminal atony, cough, dysphagia, bloating, and regurgitation. In cattle with BEH, hematuria was observed in all cases, followed by progressive weight loss. Non-regenerative anemia was detected in 33.33 percent of the cattle with UDT SCCs form and in 66.66 percent of the cattle with BEH form. Changes in white blood count occurred in some cases but drop in lymphocyte numbers was uncommon in both forms of disease. For the morphological study, urinary bladders from 46 cattle with UDT SCCs and 11 cattle with BEH were analyzed. Grossly, 16/46 bladders from the UDT SCCs form had gross lesions (red or pale vesical nodules, hemorrhages, and papilomas; red urine was detected at necropsy of only three cases). In BEH form, the bladder had nodules, large neoplastic masses, red urine, papilomas, and hemorrhages. Pyelonephritis and hydronephrosis were seen in a few cases. Microscopically, in the UDT SCCs form, 44/46 (95.65 percent) bladders had 22 different types of morphological changes, characterized by neoplastic lesions (5/22) and non-neoplastic lesions (17/22); the latter were subdivided in non-neoplastic epithelial changes (6/17), general changes of the lamina propria (6/17), and inflammatory changes (5/17). The bladder changes in BEH form were of 19 different types, characterized by neoplastic lesions (5/19) and non-neoplastic lesions (14/19), which were subdivided in non-neoplastic epitelial changes (9/14), ...

Morbimortalidade dos ferimentos penetrantes toracoabdominais associados ao trauma diafragmático e do trato digestório / Morbimortality of penetrating thoracoabdominal injuries associated to diaphragmatic and digestive tract trauma

RACIONAL: A importância das lesões toracoabdominais resulta no incremento dos traumas originados por lesões penetrantes, acidentes automobilísticos e contusões nos dias atuais. A lesão diafragmática é incomum, mas é entidade clínica com potencial risco de vida e com alta incidência de lesões associadas. OBJETIVO: Comparar a lavagem pleural por toracotomia e a drenagem pleural simples nos pacientes vítimas de ferimentos toracoabominais com lesão diafragmática associada à injúria do trato gastrointestinal. MÉTODOS: Estudo realizado em pacientes admitidos entre abril de 2004 e setembro de 2006. Todos eram acima de 13 anos e vítimas de ferimento penetrante toracoabdominal associado à lesão diafragmática e do trato digestório. Os pacientes foram divididos em dois grupos segundo o tratamento cirúrgico da contaminação pleural pelas secreções gastrobileoentéricas: lavagem torácica por toracotomia e drenagem torácica. RESULTADOS: Noventa e dois pacientes foram selecionados sendo quatro do sexo feminino. A idade média foi 26,6 anos. Quanto à origem do ferimento, as agressões por arma de fogo superaram os de arma branca (73 x 19). O Escore de Trauma Revisado (RTS) variou de 7,28 a 7,55. Lavagem torácica por toracotomia ocorreu em 13 pacientes. Quarenta e seis pacientes (50 por cento) sofreram lesão no hemidiafragma direito, 37 (40,21 por cento) no hemidiafragma esquerdo e nove pacientes tiveram injúria diafragmática bilateral (9,78 por cento). Atelectasia, derrame pleural e mediastinite ocorreram com mais freqüência no grupo sem lavagem torácica. Insuficiência respiratória, encarceramento pulmonar e empiema pleural foi mais freqüente no grupo de lavagem pleural com toracotomia. O único óbito ocorreu no grupo sem lavagem torácica. CONCLUSÃO: Os pacientes com lavagem pleural através da toracotomia ântero-lateral evoluíram com maior morbidade, quando comparados com aqueles que realizaram apenas drenagem torácica sob selo d'água.

BACKGROUND: Diaphragmatic injury in trauma is uncommon, but it is a clinical entity with lifethreatening condition and high incidence of associated injuries. AIM: To demonstrate the effectiveness of thoracic washing through thoracotomy or thoracic drainage alone in wounds with diaphragmatic injury associated to gastrointestinal perforations. METHODS: Prospective study in patients admitted in the trauma unit of the Restauração Hospital (Recife PE, Brasil) between April /2004 and September/2006. All the patients were adult (> 13 years) and victims of penetrating wounds associated with digestive and diaphragmatic injuries. The patients were divided in two groups according to surgical treatment: thoracic washing through thoracotomy and simple thoracic drainage. RESULTS: Ninety-two patients were selected. The medium age was 26,6 years. There were 73 gunshot injuries and 19 stabs. The Revised Trauma Score (RTS) varied from 7,28 to 7,55. Thoracic washing was used in 13 patients. Forty-six patients (50 percent) suffered injuries in right hemidiaphragm; 37 (40.21 percent) in left and 9 bilateral (9.78 percent). Pulmonary atelectasis, pleural effusion and mediastinal infection were more frequent in the drainage group. Respiratory insufficiency, pulmonary imprisonment and pleural empiema were more frequent in washing group. CONCLUSIONS: Higher morbidity occurred with thoracic washing patients when compared to the ones submitted to simple drainage procedure.

Changes in gut gross morphology of traíra, Hoplias malabaricus (Teleostei, Erythrinidae) during long-term starvation and after refeeding

Adult traíra (Hoplias malabaricus) were submitted to different periods of food deprivation (from 30 to 240 days) and refed for 30 days after 90 and 240 days of starvation. Stomach length remained constant during all the experimental period. However, the intestine length was significantly reduced after 30 days of food deprivation. Normal length was not recovered after refeeding. The number of pyloric caeca did not change significantly. Conversely, caeca thickness decreased after 150 days of starvation and their length decreased after 180 days. After refeeding, however, the pyloric caeca recovered original thickness. In fish refed after 240 days of starvation the length of these structures seemed to present compensatory growth, becoming longer than in the control group.

Traíras (Hoplias malabaricus) adultas foram submetidas a diferentes períodos de privação de alimento (de 30 a 240 dias) e realimentadas por 30 dias após 90 e 240 dias de jejum. O comprimento do estômago permaneceu constante durante todo o tempo experimental. No entanto, o comprimento do intestino reduziu significativamente após 30 dias de jejum. O comprimento normal não foi recuperado após a realimentação. O número de cecos pilóricos não sofreu modificações significativas. Por outro lado, a espessura dos cecos diminuiu após 150 dias de privação de alimento e seu comprimento diminuiu após 180 dias. Após a realimentação, porém, os cecos pilóricos recuperaram a espessura original. Nos peixes realimentados após 240 dias de jejum, os comprimentos dessas estruturas aparentemente apresentaram crescimento compensatório, tornando-se mais longas que as do grupo controle.