Bioavailability of two oral formulas of secnidazole in healthy volunteers / Biodisponibilidade de duas fórmulas de secnidazol oral em voluntários saudáveis

Secnidazole is an antimicrobial agent used primarily in the treatment of amoebiasis. For this bioequivalence study of secnidazole, twenty-eight healthy female volunteers were enrolled in a randomized crossover study. Each volunteer was given a single oral dose of secnidazole test preparation and then the reference preparation, or vice versa, with a wash out interval of two weeks. The plasma concentrations of secnidazole were determined by HPLC, and the samples were extracted with tert-butyl-methyl-ether: dicloromethane (60:40, v/v). Secnidazole and its parent compound metronidazole were separated on a C18 column with water:acetonitrile (85:15, v/v) as the mobile phase, and monitored at 310 nm. The ratio of mean Cmax, AUC0-t and AUC0-∞ values for the test and reference products were within the predetermined range established by ANVISA, demonstrating that the two formulations are bioequivalent in rate and extent of absorption.

Secnidazol é um agente antimicrobiano utilizado principalmente no tratamento da amebíase. Para este estudo de bioequivalência de secnidazol em voluntários saudáveis, foram incluídos vinte e oito voluntárias mulheres no estudo randomizado cruzado. Cada voluntária recebeu uma única dose oral de secnidazol do produto teste e referência para comparação, com um intervalo de wash-out de duas semanas. As concentrações plasmáticas de secnidazol foram determinados por CLAE, as amostras foram extraídas com terc-butil-metil-éter: dicloromethano (60:40, v/v). O secnidazol e seu padrão interno metronidazol foram separados em uma coluna (C18 ) com fase móvel água ultra-pura:acetonitrila (85:15, v/v) e monitorado em 310 nm. As razões entre as médias geométricas de Cmáx, ASC0-t e ASC0-∞, encontraram-se dentro do estabelecido pela ANVISA, demonstrando que as formulações são bioequivalentes quanto à taxa e extensão de absorção.

Comparison of physiological, cytopathogenic and immunological properties between two environmental isolates of Acanthamoeba spp.

The aim of this study was to determine whether pathogenic and less-pathogenic isolates of environmental Acanthamoeba exhibit differences in adhesion to human erythrocytes. Based on physiological properties of temperature, tolerance, and rapid growth, Acanthamoeba were divided into pathogenic and less-pathogenic isolates. Acanthamoeba were tested for their ability to produce cytopathic effects (CPE) using two human cell lines, HEp-2 and KB cells. Both ameba isolates caused CPE to both cell lines with the same pattern without significant difference. Human erythrocytes from 20 healthy volunteers were used to study the erythrocyte reactivity of Acanthamoeba by co-incubation with trophozoites. The pathogenic Acanthamoeba exhibited significantly higher erythrocyte adhesion as compared to the less-pathogens (p<0.05). Erythrocyte activity occurred in the presence of plasma in all blood samples, suggesting the role of plasmatic components and contact-dependent mechanisms to produce host cell cytotoxicity. The present results showed correlation between the physiological properties and erythrocyte reactivity of Acanthamoeba.

effect of breast feeding on amoebiasis, giardiasis, and cryptosporidiosis in children below the age of two years

To determine the effect of breast feeding on amoebiasis, giardiasis and cryptosporidiosis in infants in our region. Stool samples were collected from 180 children below 2 years of age who suffered from acute diarrhea. There were 81 breast fed, 49 bottle fed, and 50 mixed bottle and breast fed children. The direct smear method and then formalin-ether sedimentation were carried out to detect intestinal parasites. Fecal smears were prepared from the sediment and stained by the modified Ziehl-Neelsen method for the recovery of acid-fast oocysts of Cryptosporidium. Intestinal amoebiasis, giardiasis and cryptosporidiosis were found at the highest rates [53%, 55% and 64% respectively] among bottle fed children. Collectively, 16.3% of the bottle fed children with diarrhea tested positive for parasitic infections. Breast feeding appears to reduce the risk of these parasitic infections and should be encouraged

Concentraciones de IgE sérica en niños con amibiasis invasora / Seric IgE levels in invader amebiasis children

Con el fin de determinar si existe elevación de la IgE sérica en niños con amibiasis invasora en comparación con un grupo control, se realizó un estudio prospectivo, observacional y descriptivo, con 20 pacientes del grupo problema y 21 del grupo control, en los que descartando otro tipo de causas de elevación de la IgE se determinó este anticuerpo en suero y se comparó con las concentraciones medias normales reportadas para población mexicana y extranjera. Se encontró una notable elevación de la IgE sérica en ambos grupos estudiados, sin diferencias significativas entre los dos, no demostrándose que la IgE se encuentra elevada en el grupo problema como parte de la respuesta inmunológica en contra de E. histolytica

Does the eosinophil have a protective role in amebiasis?

While normal human eosinophils are destroyed in vitro by virulent Entamoeba histolytica, notwhistanding the presence of antibodies and complement, activated eosinophils promptly destroy the parasite although dying also at the end of the process. To study the possible in vivo participation of eosinophils in evasive amebiasis, we compared the induction of experimental amebic abscess of the liver (AAL) in gerbils (Meriones unguiculatus) previously made eosinophilic through Toxocara canis antigen injection and in normal control gerbils. After intraportal inoculation of 105 ameba trophozoites (6 and 24 hr), the ratio of gerbils with AAL, as well as the number and size of the microabscesses was comparable in eosinophilic and control gerbils. However, at 9 hr the number and size of the microabscesses were significantly smaller (p<0.05) in eosinophilic gerbils. On the other hand, the actuarial AAL survival curve up to 45 days post-amebic inoculation was sugnificantly (p<0.05) shifted to the right in controls. These results suggest that antigen-induced eosinophilia may exert a protective effect agaisnt AAL in gerbils.

Entamoeba histolytica: fecal antigen capture immunoassay for the diagnosis of enteric amebiasis by a monoclonal antibody

A amebiase mantem sua importancia epidemiologica em paises subdesenvolvidos onde sua prevalencia a converteu na parasitose de maior morbidade e mortalidade apos malaria e esquistossomose. Em regra, tanto o diagnostico clinico como os levantamentos epidemiologicos assentam na identificacao microscopica de cistos e/ou trofozoitos em extractos fecais. Este procedimento requer pessoal muito bem treinado, e laborioso, e frequentemente fornece resultados contraditorios. Para obviar estas dificuldades, no presente trabalho montamos uma tecnica de diagnostico imunoenzimatico baseado na captura de um antigeno de 96 kDa presente nas fezes de individuos infectados pela E. hystolytica (COPROELISA-Eh). Triplicatas de 117 amostras fecais processadas pelo metodo de concentracao formol eter foram definidas como positivas ou negativas por tres microscopistas especialistas em amebiase...

Historia natural de la infección amibiana durante el primer año de vida: estudio comparativo de cohortes / Natural history of amebic infection in infants: a cohort comparative study

Introducción. El mecanismo de transmisión intrafamiliar es uno de los más importantes en la infección amibiana; sin embargo el papel de la madre portadora no ha sido demostrado con objetividad y existe escasa información sobre la historia natural de la respuesta inmune humoral en los portadores asintomáticos. Fue objetivo de este estudio identificar el papel de la infección materna por Entamoeba hystolytica en la transmisión del parásito a sus hijos y su relación con la respuesta inmune humoral así como con la caracterización del tipo de zimodemo. Material y métodos. Se efectuó un estudio comparativo y prolectivo de cohortes madre-recién nacido caracterizado por la presencia (n= 21) o ausencia (n= 29) de madres portadoras del parásito, a las cuales se visitó cada 2 semanas durante un año, a partir del nacimiento de los hijos. En cada ocasión se obtuvieron muestras de heces del binomio para la identificación de E. histolytica por estudios coproparasitoscópicos y cultivo de Robinson. Cada 4 meses se colectó sangre venosa del binomio para hemaglutinación indirecta y Western-blot. Resultados. El 51 por ciento de las muestras fecales de las madres portadoras mantuvieron esta característica a lo largo del seguimiento, mientras que sólo en el 1.5 por ciento de las muestras de las madres no portadoras se idenificó al parásito P < 0.0001). La incidencia de infección amibiana durante el primer año de vida de los hijos índice fue de 10 por ciento (5/50), cuatro pertenecientes a la cohorte de madres portadoras y uno a la de no portadoras (P = 0.1). En los cinco niños infectados los títulos de anticuerpos antiamibianos fueron más altos que el resto de los hijos (P < 0.02) y el Western blot mostró que hay fracciones antigénicas que inducen anticuerpos séricos de clase IgG, IgA e IgM contra este parásito desde fases muy tempranas. Conclusiones. ninguno de los portadores, incluidos los cinco niños infectados, presento manifestaciones de enfermedad amibiana. El patrón de excreción de quistes de E. histolytica entre las madres fue diferente, a pesar de compartir las mismas características del medio ambiente. La respuesta inmunológica observada en los niños infectados, sugiere mecanismos de inducción de anticuerpos diferentes a los descritos para la amibiasis intestinal invasora

Entamoeba histolytica: detection of coproantigens by purified antibody in the capture sandwich ELISA

Foi desenvolvido um teste de ELISA de Captura usando anticorpos policlonais purificados obtidos em coelhos contra tres diferentes cepas axenicas de Entamoeba Histolystica(ICB-CSP and ICB-462 do Brasil e HM1 do Mexico)para deteccao de coproantigenos em amostras de fezes de individuos: a) sintomaticos, b)assintomaticos, c)com outros parasitos intestinais, e d)sadios. Imunoglobina G (IgG) contra E. histolystica foi isolada de imune soro de coelho, em duas etapas: cromatografia de afinidade em uma coluna contendo antigenos de E. histolystica unidos a Sepharose 4B, seguido por outra cromatogradia em Sepharose 4B Proteina A. O teste de ELISA usando anticorpos purificados, foi capaz de detectar ate um so trofozoito por lamina ou 70 ng de proteina de ameba por orificio, apresentando uma sensibilidade de 93 por cento e uma especificidade de 94 por cento. A combinacao do exame microscopico com o metodo ELISA de Captura teve uma concordancia e discordancia de 93,25 por cento e 6,75 por cento, respectivamente. Pode-se concluir que o teste de ELISA de Captura utilizando anticorpo purificado e altamente especifico para a deteccao de coproantigenos de E. histolystica em fezes de pacientes infectados, rapido, facil e mais sensivel que o exame microscopico.

An attempt at reversebility and increase of the virulence of axemic strains of Entamoeba hitolytica

Neste trabalho procuramos verificar se a interacao "in vitro" com bacterias e fragmentos de figado de hamster normal, modificaria o comportamento patogenico de cepas axenicas de E. histolytica avirulentas (ICB-32 e ICB-RPS); virulentas, porem atenuadas (ICB-CSP e HM1) e de media virulencia (ICB-462). Todas as tentativas de tornar virulentas, restabelecer ou aumentar a virulencia das cepas axenicas de E. histolytica utilizadas fracassaram.

Inmunoprofilaxia de la amibiasis / Inmunoprophilaxis of the amoebiaisis

La amibiasis es la infección producida por el protozoario parásito Entamoeba histolytica. A pesar de que el término amibiasis incluye a todos los casos humanos de infección producidos por este microorganismo, sólo una parte de los individuos infectados presentan síntomas imputables a la penetración de las amibas en los tejidos. A esta entidad nosológica se le conoce como amibiasis invasora y al grupo de personas infectadas asintomáticamente se les denomina portadores de E. histolytica y presentan amibiasis luminal. Los estudios sobre inmunidad protectora antiamibiana se encuentran todavía en etapa experimental; sin embargo, en animales de laboratorio los resultados obtenidos han sido en general satisfactorios. Los primeros intentos de inducción de protección antiamibiana, llevados a cabo por diferentes grupos, tuvieron éxito en general. Sin embargo, hay una gran falta de homogeneridad en las condiciones utilizadas por cada grupo de investigadores, y principalmente han consistido en el uso de diferentes dosis de antígenos, en los métodos de caracterización de las cepas amibianas utilizadas, las cantidades de inóculo administradas, las vías de inmunización y los modelos animales en que se aplicaron

Anti-amoebic antibody levels in gastro-intestinal disorders.

Serum anti-amoebic antibody levels were studied in 91 cases having clinical presentation of bowel disorders and 31 cases of control. Anti-amoebic antibody was positive in significant dilutions in 38 cases (31.15%) in total comprising 9 cases out of 22 cases showing presence of Ent histolytica cyst in stool, 13 cases who were positive for ova, parasite and cysts other than Ent histolytica in stool and 16 cases out of 70 cases with negative stool findings. It was positive in 5 cases out of 9 diagnosed cases of amoebic liver abscess. Assessment of immunoglobulin levels in amoebic liver abscess cases revealed high levels of immunoglobulin G and immunoglobulin M.

Funcion fagocitaria de leucocitos polimorfonucleares y subpoblaciones linfocitarias en pacientes con amibiasis / Phagocytic function of polymorphonuclear leukocytes and lymphocyte subpopulations in patients with amebiasis

Se inicia un proyecto piloto para la evaluación integral de la función fagocitaria de leucocitos polimorfonucleares y el análisis de subpoblaciones linfocitarias en pacientes con diversas formas de amebiasis. Se encontraron diferencias significativas en algunos parámetros tales como reducción del nitroazul de tetrazolio (NBT), relácion CD4/CD8, digestión de candida, expresión de la. Se plantea la necesidad de mayor investigación en el campo de los mecanismos de imunidad mediados por células en los pacientes con amibiasis. Es interesante también precisar los efectos que puddieran ejercer los medicamentos que se emplean, tales como el metronidazol sobre la función fagocitária de polimorfonucleares y en el comportamiento de subpoblaciones linfocitarias

Determination of antiamoebic IgG, IgM, IgA and IgG subclasses in sera from patients with amoebiasis by enzyme-linked immunosorbent assay.

The HK-9 strain of Entamoeba histolytica was cultured axenically. A crude extract of the trophozoites was used as antigen in the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the determination of antiamoebic IgG, IgM, IgA and IgG subclasses in sera of patients with E. histolytica infection. Sera from amoebiasis patients had significantly higher mean ELISA values for all classes and subclasses of immunoglobulins examined compared with healthy controls. The ELISA for IgG, IgM and IgA was positive for 76 (97.4%), 34 (43.6%) and 62 (79.5%) respectively of 78 amoebiasis sera. Analysis of IgG subclasses by ELISA showed that 76.7%, 25%, 33.3% and 66.6% of the patients were positive for antiamoebic IgG1, IgG2, IgG3 and IgG4 respectively. IgG1 and IgG4 were the dominant IgG subclasses involved in amoebiasis. The role of antiamoebic antibodies in amoebiasis is discussed.

Mechanism of innate immunity to amoebic infection in guineapigs.

The direct lymphocyte cytotoxicity and antibody dependent cell mediated cytotoxicity against Entamoeba histolytica was studied in 3-4 wk old and 8-10 wk old guineapigs. Both these parameters were significantly increased in splenic cells in the older animals. This might be due to maturation of the immune system or to natural infection by related parasite, leading to immunity.