Autoantibodies in patients with insulin dependent diabetes mellitus and in their first degree relatives

The objective of this study was to determine the prevalence of autoantibodies against glutamic acid decarboxylase [GAD], insulin autoantibodies [IAA] and antibodies to IA2, main intracellular domain of tyrosine phosphatase in IDDM patients and their first degree relatives as a high risk group of the population. Serum samples were collected from 46 IDDM patients, 120 nondiabetic first degree relatives and 40 healthy volunteers. The results indicated that 12 IDDM patients had single autoantibody with the prevalence of GADA, IAAs and IA2A; while, six patients had combined autoantibodies [one patient had GADA+/DAA+, three patients had IA2A+/IAA+ and two patients had GADA+/IA2A+]. In conclusion, testing of antibodies for GAD, IA2 and IAA would provide a feasible and useful strategy for risk assessment of IDDM in high risk individuals

Cetoacidose diabética desencadeada por resistência imunológica à insulina / Diabetic ketoacidosis induced by immunologic insulin resistance

A cetoacidose diabética (CAD) é a emergência endocrinológica mais freqüente e de boa evoluçäo, na maior parte dos casos. Os autores apresentam evoluçäo atípica de três casos de CAD precipitada por resistência imunológica à insulina (RII). RELATO DE CASO. Três pacientes: H.M.L. (46 anos, diabetes mellitus (DM) tipo II, há 6 anos), D.R.J (39 anos, DM, secundário à pancreatopatia, há 11 anos) e D.L.S. (54 sanos, DM tipo II, há 9 anos) foram admitidos na Unidade de primeiro Atendimento do Hospital Säo Paulo em CAD: H.M.L. (glicemia: 716mg/dL, pH: 6,8), D.R.J. (glicemia: 684mg/dL, pH 6,.9) e D.L.S. (glicemia: 384mg/dL, pH: 7,2), todos apresentavam cetonúria. As necessidades de insulina para o controle metabólico foram: H.M.L.: 1.369UI, D.R.J.: 1.496UI, D.I.S. 1.369UI em, respectivamente: 212, 206 e 72 horas. Os anticorpos antiinsulina (AI) foram dosados por RE e ELISA: H.M.L.: 7.186nU/ml, 3,6IE; D.R.J.: 7,879nU/mL, 3,24IE; D.I.S: 8.377nU/mL, 2,88IE. O seguimento ambulatorial revelou queda progressiva dos níveis de AI:H.M.L.: 3.393nU/mL, 1,39, após dez meses da CAD; d.r.j.: 4,673Nu/Ml, 2,34 E d.i.s.: 1,510nU/mL, ambos após 18 meses da CAD. A queda nos níveis de anticorpos foi significativa nos três pacientes e foi acompanhada de melhor controle metabólico. Discussäo. A ausência de fator desencadeante, o elevado tempo, as altas doses de insulina empregadas para a compensaçäo metabólica levaram os autores à suspeita diagnóstica de RII. O diagnóstico foi confirmado pelos altos níveis séricos dos AI. O controle metabólico nestes pacientes foi obtido somente após a introduçäo de insulina na humanizada. CONCLUSAO. A resistência imunológica à insulina pode ser uma das causas de CAD sem fator precipitante aparente e má resposta às medidas terapêuticas habituais

Estudo comparativo, randomizado. duplo-cego e cruzado da eficácia clínica e imunogenicidade das insulinas de origem suína e humana no tratamento de diabéticos tipo I / Comparative study, randomized, double-blind and cross of clinical and immuno efficacy of the porcine and human insulin in diabetes type I treatment

Foi avaliado o comportamento imunológico de pacientes diabéticos tipo I frente a mudança do tratamento com insulina mista NPH para insulina suína ou humana semi-sintética (IHSS), comparando-se os níveis de anticorpos antiinsulina com o controle metabólico. 28 diabéticos do tipo I trocaram suas doses habituais de insulina mista por insulina suína ou IHSS em ordem aleatória, de maneira que o mesmo número de pacientes foi inicialmente exposto a cada uma das insulinas testadas. Após 90 dias foram dosados anticorpos IgG antiinsulina pelo método ELISA, Hb glicosilada, glicosúria de 24 horas e glicemia. Nesta ocasiao, cada paciente foi submetido à troca da insulina em uso pela insulina alternativa e ao final de 180 dias foram repetidas as mensuraçoes referidas. No grupo que iniciou com IHSS a média dos anticorpos diminuiu de maneira significativa (O,55 ñ O,11 para O,39 ñ O,07 índice de ELISA) nos primeiros 90 dias e permaneceu reduzida (O,37 ñ O,1O) na segunda fase do estudo, com insulina suína. Nos pacientes que iniciaram com insulina suína houve uma diminuiçao gradativa, porém nao significativa, dos títulos de anticorpos (basal = O,61 + O,41; 90 dias = O,57 ñ O,13 e 180 dias = O,47 ñ O,08 índice de ELISA). No primeiro grupo a Hb glicosilada variou de 8,80ñ O,79 para 7,30 ñ O,62 por cento enquanto no seguinte a variaçao foi de 8,80 ñ O,48 para 7,42 ñ O,38 por cento. As vantagens do uso de insulina humana e suína, em relaçao às insulinas com menor grau de purificaçao (mistas), prenderam-se a reduçao nos níveis de anticorpos. A longo prazo, nao houve correlaçao entre os títulos de anticorpos e o controle do diabetes, assim como nao houve diferença no tratamento com uso de insulina humana e suína monocomponente, visto que o grau de antigenicidade e a ocorrência de hipoglicemias com o uso de ambas foram semelhantes.

Método inmunoenzimático (ELISA) para la detección de anticuerpos anti-insulina / Enzyme immunoassay (ELISA) for detecting anti-insulin antibodies

Se describen los procedimientos empleados y los resultados obtenidos en la purificación del inmunógeno, anticuerpo específico y producción de conjugados, los cuales contaron con la calidad requerida. Se presentan los resultados del montaje y validación preliminar de un método inmunoenzimático para determinar anticuerpos anti-insulina en suero humano. Se evaluó la aplicación del método en la detección de anticuerpos en 130 muestras de sujetos normales y 55 de pacientes diabéticos y sus familiares, dada la importancia de dicha determinación para el mejor control y tratamiento de los diabéticos insulinodependientes. así como en la predicción del inicio clínico de la diabetes

Estudo multicêntrico comparativo da insulina bovina com formas mais purificadas de insulina suína e humana no tratamento de diabéticos do tipo I / Multicenter studies comparative of bovine insulin with forms more purified of swine and human insulin in treatment type 1 diabetes mellitus patients

Este trabalho mostra os resultados obtidos em um estudo multicêntrico, duplo-cego e randomizado, organizado com o intuito de analisar o comportamento dos níveis de anticorpos antiinsulina e do grau de controle metabólico em diabéticos do tipo I que passaram o seu tratamento de insulina bovina para insulina suína e insulina humana mais purificadas. Foram selecionados para o estudo 28 pacientes diabéticos do tipo I e que estavam sendo tratados com insulina bovina (pró-insulina < 3.000ppm). Destes pacientes, em um protocolo de seis meses, nove permaneceram com insulina bovina, nove trocaram para insulina suína monopico (pró-insulina < 10ppm) e dez para insulina humana monocomponente (pro-insulina < 1ppm). As preparaçöes de insulina fornecidas pelo Laboratório Biobras. Os anticorpos antiinsulina (IA) foram determinados pelo método de ELISA e o metabólico foi avaliado pelos níveis de glicemia de jejum, glicosúria de 24 horas e proteína glicosilada determinada pela cromatografia de afinidade. Após a troca de insulina, ocorreu diminuiçäo dos níveis de anticorpos nos pacientes que passaram a ser tratados com as insulinas suína e humana, enquanto que, nos pacientes que permaneceram com insulina, houve subida destes valores. Quanto ao controle metabólico, verificou-se aumento significativo dos níveis glicêmicos nos pacientes que passaram a ser tratados com a insulina humana. No início do estudo, encontrou-se ainda correlaçäo significativa negativa entre os IA e a glicosúria de 24 horas (rs = -0509; p = 0,006). Concluindo, näo houve melhora do controle metabólico, apesar da diminuiçäo dos níveis de anticorpos antiinsulina, em diabéticos do tipo I que passaram a ser tratados com formas menos imunogênicas de insulina

Caracterización de sueros antirreceptores de insulina: su aplicabilidad experimental y clínica / Characterization of insulin antireceptors serum: his application experimental and clinic

Se prepararon receptores de hígado de rata por centrifugación diferencial y cromatografía en Sepharosa CL-68 (purificación aproximada 1.000veces) y se inocularon con aquellos 4 conejos. La calidad de los receptores fue controlada por marcación con ATP-Y-32P, electroforesis en poliacrilamida y autorradiografía. Se observó en curvas dosis/respuesta con insulina-125I e IGF-I125I, que el aislamiento usado no excluía el receptor de IGF-I (insulina: 36 fmoles/ml, IGF-I:3,2 fmoles/ml), por lo cual se continuó la purificación en una cromatografía de afinidad de insulina-Sepharosa y posterior marcación con 125I. El antisuero seleccionado C21 demostró una inmunoprecipitación elevada con insulina y baja con IGF-I(insulina: 62,5+4,71%, IGF-I: 24,7+3,16%). En hepatocitos aislados este antisuero no compite con la insulina por su receptor y a una dilución de 1/200 tiene poca capacidad de convertir glucosa-14C a glucógeno-14C, ya que a esa dilución asocia el 50% de los receptores presentes (0,76+0,16 ng/ml, expresado en respuesta biológica equivalente a insulina). para determinar el sitio de unión del antisuero C21 se dirigial receptor de insulina con colagenasa (que digiere específicamente la subunidad B) y se observan estas condiciones la inmunoprecipitibilidad del antisuero C21 cae dramáticamente (receptor de insulina 75,6+2,04%, receptor de insulina digerido: 14,9+1,28%). Se determinó, además, la inmonorreactividad cruzada con receptores humanos para la insulina, observándose un débil cruzamiento a alta concentración (1/75: 1,95+1,32%). El estudio demuestra que el antisueroC21 es predominantemente inmunorreactivo con el receptor de insulina, al que une por su subunidad B, induciendo una escasa respuesta biológica en hepatocitos aislados.

Relationship between insulin antibodies and metabolic control in type I diabetes mellitus

1. The objective of the presente study was to investigate whether a change in insulin therapy from bovine to purified porcine insulin would result in a decreased level of insulin antibodies (IA) in type I diabetic patients and whether there would be better metabolic control. 2. Insulin antibodies were measured by ELISA. Fifteen type I diabetic patients were prospectively followed for 8 months with monthly evaluations after changing insulin therapy from bovine to purified porcine insulin. 3. Group I patient (N = 4) had > ou = 1.5 (value obtained by dividing the ELISA absorbande of the tested serum by the absorbance of a standard serum) at the beginning of the study. For group I patients, the modification of insulin therapy caused a 57% reduction in insulin antibody levels, and this reduction was correlated with a decrease in 24-hour glycosuria (rs = 0.66, P < 0.001) and glicated protein (rs = 0.65, P < 0.01). Group II patients (N = 8) had IA < 1.5 and > ou = 0.3 and group III (N = 3 had IA < 0.3. Insulin antiblody levels were unchanged during the follow-up period in both group II and group III. 4. We also studied endogenous insulin secretion, measured as fasting C-peptide, and its relationships with metabolic control and insulin antibody levels. Patient with residual insulin secretion (C-peptide > 60 pmol/l) showed lower levels of 24-h glycosuria, glycated protein and glycated hemoglobin. Furthermore, in this group of patients a negative correlation was found between C-peptide and insulin antibody levels (rs=0.36, P < 0.01). 5. We conclude that insulin antibodies could be one of the factors having a detrimental effect on metabolic control

Desenvolvimento de um método imunoenzimático para detecçäo de anticorpos antiinsulina / Development of an immunoenzimatic method for detection of insulin antibodies

O presente trabalho descreve um ensaio imunoenzimático em fase sólida (ELISA) para a medida dos anticorpos aintiinsulina. Os resultados foram expressos como um índice de ELISA (IE) e o ponto de corte de 0,3 foi estabelecido a partir dos valores encontrados em indivíduos normais e diabéticos do tipo II. Os valores médios encontrados em pacientes diabéticos do tipo I tratados com insulina NPH bovina foram mais altos do que os valores médios encontrados em pacientes tratados com insulina suína Monotard (Novo) e insulina suína lenta (Biobrás). Em pacientes com insulina NPH bovina houve uma queda de 40% dos anticorpos após o tratamento por seis meses com insulina suína (Biobrás). Os valores mais altos foram encontrados em pacientes diabéticos com resistência imunológica à insulina

Dimensiones moleculares de los complejos inmunes insulina-antiinsulina presentes en el suero de pacientes diabéticos / Molecular size of circulating immune insulinantiinsulin complex in diabetic patients

El tamaño de los complejos inmunes insulina: antiinsulina (CII:A) presentes en el suero de pacientes diabéticos tratados con insulina, se estudió mediante su marcación con mono 125I-insulina y separación cromatográfica en columna de Sepharose CL-6B. Dicho tamaño se comparó con el título de anticuerpos antiinsulina y con la concentración total de insulina de esos sueros. Se identificaron dos tipos de CII:A cuyos tamaños, expresados como Kav, fueron de 0,41 ñ 0,002 y 0,32 ñ 0,01 (equivalentes a PMs de 170 y 300 Kd, rspectivamente), los que indicarían asociaciones anticuerpos: insulina del tipo 1:1 (1:2) y 2:1, respectivamente. Los complejos del tipo 2:1 se encontraron en sueros de bajo títulos de anticuerpos, mientras que a los 1:1 (o1:2) se los halló en sueros con títulos medianos y altos.

Avaliaçäo da funçäo endócrina e estudo dos anticorpos antiinsulínicos na hemocromatose / Evaluation of endocrine function and study of anti-insulin antibodies in hemochromatosis

Foram estudados três pacientes do sexo masculino com hemocromatose, diagnosticada pelas evidências de aumento de ferro corporal, na ausência de doenças hematológicas e ingestäo excessiva de ferro, com antígeno de histocompatibilidade (HLA) A3 presente. A avaliaçäo da funçäo endócrina demonstrou, nos três pacientes, comprometimento da funçäo pancreática endócrina semelhante à encontrada no diabete melito idiopático. Dois pacientes apresentaram quadro clínico e laboratorial de hipogonadismo hipogonadotrófico. As demais funçöes endócrinas apresentaram-se íntegras. Níveis elevados de anticorpos antiinsulínicos foram detectados nos três pacientes, sendo que, no doente submetido a flebotomias semanais, houve melhora do controle do diabete e queda significativa dos níveis de anticorpos antiinsulínicos

Ensayo clínico controlado con insulinas porcina monocomponente y humana semisintética: influencia en los niveles de anticuerpos / A clinical trial controlled with single component swine insulin and semisynthetic human insulin: influence of antibody titers

Se estudiaron 20 pacientes diabéticos insulinodependientes, en edades comprendidas entre 16 y 39 años, que estaban recibiendo tratamiento con insulina porcina monocomponente y se distribuyeron al azar en 2 grupos de 10 pacientes cada uno; el grupo I utilizó insulina porcina monocomponente. Todos los pacientes fueron estudiados durante un año, y fue determinado el título de anticuerpos antiinsulina al inicio y a los 15 día, 2, 4, 6, 8, 10, y 12 meses de iniciada la investigación

Medición de la respuesta inmune anti-insulina en diabéticos mediante un ensayo radioinmunométrico normalizado / Measurement of insulin antibodies immune response from diabetic patients by a solid-phase radiocompetition assay

Se presenta un método simple y reproducible de radiocompetición en fase sólida para detectar anticuerpos anti-insulina en el suero de pacientes bajo terapia insulínica. El método utiliza un trazador de mono I-insulina purificada por electroforesis en gel de poliacrilamida. Este trazador tiene como característica una notable estabilidad que permite su uso por lapsos prolongados. El control de la constancia en la masa de trazador inmunorreactivo empleado en cada ensayo, evita la principal fuente de variación interensayo. Estas características del método permiten asegurar la comparación de los valores obtenidos en estudios longitudinales, en los cuales las determinaciones de anticuerpos se realizan en diferentes ensayos. Las propiedades mencionadas y la utilidad práctica del método se corroboraron determinando los anticuerpos específicos en el suero de 54 pacientes diabéticos tratados con distintos preparados farmacéuticos de insulina bovina y porcina

Auto-anticorpo contra ilhotas de Langerhans (ICA) em familiares de pacientes com diabete insulinodependente / Autoantibody against islands of Langerhans (ICA) in relatives of patients with insulin-dependent diabetes

Foi analisada a freqüência de ICA-IgG em 75 pacientes com diabete insulinodependente, e 129 parentes de 1§ grau. Trinta e seis por cento dos pacientes apresentaram reaçäo positiva. Na constelaçäo familiar, cerca de 7,6% dos pais e 9,8% dos irmäos, respectivamente, apresentaram reaçäo positiva. Constatou-se uma reaçäo positiva muito forte e forte no grupo de irmäos