Paracoccidioidomicosis: crónica de una enfermedad olvidada / Paracoccidioidomycosis: chronicle of a neglected disease

La paracoccidioidomicosis (PCM) es una de las micosis sistémicas que son endémicas exclusivamente en América Latina. Está causada por hongos termodimorfos del género Paracoccidoides: P. brasiliensis (S1), P. americana (PS2), P. restrepiensis (PS3), P. venezuelensis (PS4) y P. lutzii. Paracoccidioides habita y produce conidios infecciosos en suelos de zonas subtropicales húmedas. En Argentina está presente al norte del paralelo 34.5° S. Poco se sabe sobre su nicho ecológico específico, lo que dificulta el diseño de medidas de control de la PCM. La infección ocurre en hospederos susceptibles cuando inhalan conidios aerosolizados. Los trabajadores rurales varones son el grupo más expuesto a contraer PCM. La primoinfección puede ser asintomática o causar un cuadro respiratorio leve; este, a su vez, puede autolimitarse o progresar a enfermedad, ya sea pulmonar o diseminada. Existen dos formas de presentación: (i) aguda/subaguda, en niños, adolescentes y personas con sistemas inmunes comprometidos; y (ii) crónica progresiva, en adultos. La cicatrización de las lesiones resulta en secuelas fibróticas que pueden causar disfagia, disfonía, insuficiencia suprarrenal y obstrucción intestinal. Aunque existen herramientas para su diagnóstico, la PCM es rara vez sospechada precozmente porque sus manifestaciones clínicas iniciales son inespecíficas. Sumados, el diagnóstico tardío y la baja adherencia a los efectivos pero largos tratamientos antimicóticos permiten el avance de la enfermedad y el desarrollo de fibrosis tisular extensa, lo que compromete gravemente la función respiratoria y suprarrenal, altera permanentemente la calidad de vida del paciente y puede causar su muerte.

Paracoccidioidomycosis (PCM) is among the systemic mycoses which are endemic only in Latin America. In Argentina, the vast majority of the cases are reported at north of latitude 34.5° S. The disease is produced by thermodimorphic fungi of the genus Paracoccidoides: P. brasiliensis (S1), P. americana (PS2), P. restrepiensis (PS3), P. venezuelensis (PS4) y P. lutzii. The natural habitat of members of this genus is the soil, where they produce infectious conidia. Little is known, however, about their specific ecologic niche(s), and this knowledge gap hampers the design of measures to control the infection. Rural male workers are the group most at risk of developing PCM. Infection occurs by inhalation of aerosolized conidia and may either be asymptomatic or cause mild respiratory symptoms. In turn, this primary infection may be self-limited or progress to severe pulmonary or disseminated disease. The disease has two clinical presentations: (i) acute or subacute (juvenile), frequent in children, adolescents and people with immunodeficiencies; and (ii) chronic progressive, in adults. Active lesions often resolve into fibrotic scars which can cause dysphagia, dysphonia, adrenal insufficiency, and intestinal obstruction. Although efficient tools are available for diagnosis and treatment, the nonspecific nature of PCM clinical manifestations frequently delay the diagnosis. In addition, the poor adherence to long antifungal treatments allows the advance of the disease and the development of extensive fibrosis compromising severely and permanently respiratory and adrenal functions, thus altering the patient´s quality of life and even causing his/her death.

High molecular mass fraction in clinical isolates of Paracoccidioides brasiliensis / Fração de alta massa molecular em isolados clínicos de Paracoccidioides brasiliensis

INTRODUCTION: Different serum levels of the IgG/IgE for Paracoccidioides brasiliensis high mass molecular (hMM) fraction (~366kDa) in the acute and chronic forms of the disease have been reported. Considering the nonexistence of hMM fraction investigation involving clinical isolates of P. brasiliensis, the present study aimed to investigate the presence of the hMM fraction (~366kDa) in cell free antigens (CFA) from P. brasiliensis clinical isolates. METHODS: CFA from 10 clinical isolates and a reference strain (Pb18) were submitted to SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) followed by gel image capturing and densitometer analysis. Additionally, CFA from 20 isolates and Pb18 were analyzed by capture ELISA (cELISA) using polyclonal (polAb) or monoclonal (mAb) antibodies to the hMM fraction. RESULTS: The presence of the hMM component was observed in CFA of all samples analyzed by SDS-PAGE/densitometry and by cELISA. In addition, Pearson's correlation test demonstrated stronger coefficients between hMM fraction levels using pAb and mAb (R = 0.853) in cELISA. CONCLUSIONS: The soluble hMM fraction was present in all the P. brasiliensis clinical isolates analyzed and the reference strain Pb18, which could be used as a source of this antigen. The work also introduces for first time, the cELISA method for P. brasiliensis hMM fraction detection. Analysis also suggests that detection is viable using polAb or mAb and this methodology may be useful for future investigation of the soluble hMM fraction (~366kDa) in sera from PCM patients.

INTRODUÇÃO: Diferentes níveis sorológicos de IgG/IgE contra a fração de alta massa molecular (hMM) (~366kDa) de Paracoccidioides brasiliensis têm sido encontrados na PCM aguda e crônica. Considerando a inexistência de investigação sobre esta fração em isolados clínicos de P. brasiliensis, o objetivo deste estudo foi investigar a presença da fração hMM (~366kDa) no preparado livre de células (CFA) de P. brasiliensis obtidos de isolados clínicos. MÉTODOS: CFA de 10 isolados e de cepa de referência (Pb18) foram submetidas à eletroforese em gel de SDS-poliacrilamida (SDS-PAGE) seguida de captura de imagem e análise por densitometria. Adicionalmente, CFA de 20 isolados e de Pb18 foram analisados por ELISA captura (cELISA) utilizando anticorpos policlonal (polAb) ou monoclonal (mAb) para fração hMM. RESULTADOS: A presença do componente de hMM foi observada em todas as amostras analisadas por SDS-PAGE/densitometria e por cELISA. Adicionalmente, o teste de correlação de Pearson demonstrou forte relação entre os níveis de fração hMM usando pAb e mAb (R = 0.853) no cELISA. CONCLUSÕES: Conclui-se que a fração hMM está presente em todos os isolados clínicos de P. brasiliensis analisados e no isolado referencial, sugerindo a possibilidade dos mesmos serem utilizados como fonte desta fração antigênica. Este trabalho também introduz pela primeira vez o método de cELISA para detecção da fração hMM de P. brasiliensis, sugerindo que detecção utilizando anticorpos polAb ou mAb é viável e essa metodologia poderá ser útil para investigação futura desta fração solúvel (~366kDa) em soros de pacientes com PCM.

Contribuiçäo para o estudo clínico-laboratorial e terapêutico da formaçäo juvenil da paracoccidioidomicose / Paracoccidioidomycosis: clinical and terapeutic study of the juvenil form of the disease

A paracoccidioidomicose é a micose sistêmica mais frequente na regiäo do Triângulo, no Estado de Minas Gerais. A maioria dos casos diagnosticados nesta localidade enquadra-se na forma adulta da moléstia (idade 30 anos), mas cerca de um terço (36,5 por cento ) do total de doentes corresponde a forma juvenil desta infecçåo (idade 30 anos), modalidade sabidamente de maior gravidade e com feiçöes clínico-laboratoriais bastante peculiares. No presente trabalho, realizou-se um estudo prospectivo com o objetivo de analisar detalhadamente os aspectos clínicos, laboratoriais e terapêuticos da forma juvenil desta micose, em 24 pacientes observados no período de fevereiro de 1982 a dezembro de 1987, no Hospital de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia. Este estudo permitiu ampla revisäo da literatura latinoamericana sobre o assunto e, com detalhes, destacou as características peculiares, como já referido, desta forma clínica, em particular: a) a raridade da doença na infância, notadamente, na primeira década de vida; b) a baixa proporçäo na incidência entre homens e mulheres (5/1) comparado com a relatada na forma adulta da moléstia (até 125/1); c) o elevado acometimento pelo fungo do sistema macrofágico-linfóide manifestado principalmente por linfadenopatia, localizada ou generalizada, hepatoesplenomegalia e envolvimento do tubo digestivo e do sistema ganglionar-mesentérico; d) a ocorrência menos frequente de lesöes cutâneo-mucosas, comumente vistas na forma adulta da micose; e) a presença de icterícia, ascite e massa abdominal palpável, alteraçÆes decorrentes do envolvimento quase constante do sistema linfático-abdominal; f) a raridade do acometimento pulmonar, habitualmente visto em pacientes de faixas etárias mais elevadas. O trabalho ainda salientou as alteraçöes laboratoriais decorrentes da doença, em particular a eosinofilia, e discutiu os resultados controversos das reaçÆes sorológicas específicas realizadas no decurso desta moléstia. O papel dos métodos de imagem, em particular, da ultrasonografia foi destacado, pelas importantes informaçÆes que trouxe em relaçåo ao acometimento extremamente frequente dos orgåos intra-abdominais pelo P. brasilienses, tendo sido recomendado sua utilizaçåo rotineira na avaliaçäo inicial e evolutiva destes pacientes. Finalmente, este estudo mostrou os resultados terapêuticos obtidos com os sulfamídicos, com a Anfotericina B e, particularmente com o Ketoconazol nesta modalidade da micose, enfatizando a excelente resposta observada com este derivado imidazólico, que permitiu alcançar remissÆes em curtos períodos de tempo e com mínimos efeitos colaterais, mesmo em forma relativamente graves desta doença

Relaçäo parasito-hospedeiro na paracoccidioidomicose: revisäo da literatura / Parasite-host relation in paracoccidioidomycosis: review of the literature

Realizou-se revisäo da literatura dos estudos sobre a relaçäo parasitahospedeiro na paracoccidioidomicose, visando correlacionar estes dados com a patogenia da doença. Inicialmente, foram revistas mecanismos de resistência do hospedeiro ao nível da porta de entrada; açäo dos estrógenos, interagindo com receptores do fungo, bloqueando a transformaçäo dos micélios as formas leveduriformes parasitárias; papel dos fagócitos e do complemento; açäo das células citotóxicas naturais. A seguir, discutiram-se os dados experimentais e humanos indicativos do papel do controle genético sobre resistência e suscetibilidade ao P. brasiliensis. Por fim, foi apresentado o papel da imunidade humoral e celular anti-P, brasiliensis nas defesas do hospedeiro, visando bloquear a divisäo e a disseminaçäo do fungo, e sua interrelaçäo com a morfogênese do granuloma