Gene therapy: light is finally in the tunnel

After two decades of ups and downs, gene therapy has recently achieved a milestone in treating patients with Leber's congenital amaurosis (LCA). LCA is a group of inherited blinding diseases with retinal degeneration and severe vision loss in early infancy. Mutations in several genes, including RPE65, cause the disease. Using adeno-associated virus as a vector, three independent teams of investigators have recently shown that RPE65 can be delivered to retinal pigment epithelial cells of LCA patients by subretinal injections resulting in clinical benefits without side effects. However, considering the whole field of gene therapy, there are still major obstacles to clinical applications for other diseases. These obstacles include innate and immune barriers to vector delivery, toxicity of vectors and the lack of sustained therapeutic gene expression. Therefore, new strategies are needed to overcome these hurdles for achieving safe and effective gene therapy. In this article, we shall review the major advancements over the past two decades and, using lung gene therapy as an example, discuss the current obstacles and possible solutions to provide a roadmap for future gene therapy research.

Avaliaçäo da biopotência dos isômeros 9-cis e 13-cis do ß-caroteno / Evaluation of biopower of isomers 9-cis and 13-cis ofÿß-carotene

O ß-caroteno é o mais importante dentre os carotenóides pró-vitamínicos A, por possuir 100 por cento de atividade vitamínica. Ele é formado por uma mistura de isômeros trans e cis, sendo que as formas cis possuem menor atividade que as formas tran. Dados da literatura, sobre as atividades pró-vitamínicas dos isômeros cis säo antigos e controversos. Assim, nos propusemos a verificar as reais atividades vitamínicas A dos isômeros 9 e 13-cis do ß-caroteno. O estudo foi baseado no modelo de esgotamento das reservas de vitamina a hepáticas em ratos. O ensaio biológico foi dividido em duas etapas: depleçäo e testes. Os grupos formados foram: grupos água e óleo, ambos sem vitamina A, grupos vitamina A, ß-caroteno todo-trans, 9-cis, 13-cis, ß-caroteno todo-trans+9-cis e ß-caroteno todo-trans+13-cis. A quantidade de vitamina A ou de ß-caroteno e seus isômeros fornecidos aos animais foi baseada nas necessidades diárias de vitamina A. Ao final do período de testes todos os animais foram sacrificados e os fígados, sangue e fezes recolhidos para análise em cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Dos resultados obtidos, pode-se verificar que ocorreu isomerizaçäo do isômero trans em cis e de cis em trans. E, que as biopotências do isômero 9-cis foi de 37,2 por cento e a do 13-cis foi de 45,6 por cento