Enzymatic cleavage of cell surface proteins of pig and cow erythrocytes and its effect on concanavalin-mediated agglutinability.

Study was carried out to understand and compare architecture of the proteins of erythrocyte cell surface of some mammals viz., Homo sapiens (human), Sus scorfa domestica (pig) and Bos taurus domestica (cow). In this study, we investigated the action of proteinases viz., trypsin and chymotrypsin and neuraminidase on the erythrocyte surface proteins and erythrocyte agglutination tendency with a lectin (concanavalin A). The electrophoretic pattern of membrane proteins and glycophorins (analyzed by SDS-PAGE and visualized by Coomassie brilliant blue and periodic acid-schiff stains, respectively) and concanavalin A (Con A) agglutinability revealed that: (i) There were variations in the number and molecular weights of glycophorins in human, pig and cow, (ii) trypsin action on pig and cow erythrocyte membrane proteins was similar, unlike human, (iii) glycophorins degradation by trypsin and chymotrypsin was not similar in pig, as compared to that of human and cow, (iv) erythrocytes agglutination with Con A was significantly different due to differences in membrane composition and alterations in the surface proteins after enzyme treatment, (v) a direct correlation was found between degradation of glycophorins and Con A agglutinability, and (vi) removal of erythrocyte surface sialic acids by neuraminidase specifically indicated an increase in Con A agglutinability of pig and cow erythrocytes, similar to human.

Antiviral effect of dietary germanium biotite supplementation in pigs experimentally infected with porcine reproductive and respiratory syndrome virus

Germanium biotite (GB) is an aluminosilicate mineral containing 36 ppm germanium. The present study was conducted to better understand the effects of GB on immune responses in a mouse model, and to demonstrate the clearance effects of this mineral against Porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) in experimentally infected pigs as an initial step towards the development of a feed supplement that would promote immune activity and help prevent diseases. In the mouse model, dietary supplementation with GB enhanced concanavalin A (ConA)-induced lymphocyte proliferation and increased the percentage of CD3+CD8+ T lymphocytes. In pigs experimentally infected with PRRSV, viral titers in lungs and lymphoid tissues from the GB-fed group were significantly decreased compared to those of the control group 12 days post-infection. Corresponding histopathological analyses demonstrated that GB-fed pigs displayed less severe pathological changes associated with PRRSV infection compared to the control group, indicating that GB promotes PRRSV clearance. These antiviral effects in pigs may be related to the ability of GB to increase CD3+CD8+ T lymphocyte production observed in the mice. Hence, this mineral may be an effective feed supplement for increasing immune activity and preventing disease.

Regulation of histamine secretion in a mast cell line

La interacción del alergeno con su lg-E específica anclada en la superficie externa de la membrana plasmática del mastocito desencadena la liberación de histamina de dicha célula. Este proceso requiere la presencia de calcio extracelular y de energía bajo la forma de ATP proveniente fundamentalmente de glicólisis donde el lactato es el producto final. La heterogeneidad de los mastocitos ha sido previamente descrita en diversos tejidos de diferentes especies animales. Así, esta línea celular tumoral en ratones LAF1 mostró propiedades similares a las descritas para los mastocitos presentes en la cavidad peritoneal de la rata. Las respuestas metabólicas relacionadas a la secreción de histamina también fueron estudiadas en esta línea de mastocinoma, que exhibieron un comportamiento diferente dependiendo del secretagogo utilizado. En este sentido, una fuerte estimulación de la glicólisis fue observada la presencia de Concanavalina-A en comparación con la estimulación inducida por el A-23187 y el compuesto 48/80. En este modelo experimental se logró establecer relaciones entre la liberación de histamina con el consumo de glucosa, la produción de lactato y la carga adenílica bajo la forma de ATP

Mechanism of host cell membrane modification by tumour: a model for paraneoplastic syndromes.

A not well-appreciated but clinically important aspect of malignant tumours is their effects on distantly located host cells. The effects, termed paraneoplastic syndromes, also pose an intriguing mechanistic problem: how do malignant cells influence properties of host cells not in contact with them? Erythrocytes from the circulation of rats bearing intraperitoneal Yoshida ascites sarcoma exhibit higher agglutinability with concanavalin A (Con A) than the cells from normal animals. Since the tumour and the red cells are not in contact, the enhanced agglutinability of the latter is a paraneoplastic effect. The mechanism by which the tumour brings about this effect is investigated as a model for paraneoplastic syndromes. The cell-free ascites fluid is able to impart high agglutinability on cells from normal animals in vitro. Also, when injected intraperitoneally in normal animals, the ascites fluid is able to enhance the agglutinability of erythrocytes in circulation. Apparently the tumour produces a substance(s) that appears in the ascites fluid and is able to diffuse into circulation, explaining the mechanism by which it can reach distant sites. From the cell-free ascites fluid three fractions have been isolated that are active in vitro. Of these, only one showed activity in vivo. From this fraction, a glycoprotein has been purified to homogeneity that confers maximal Con A-agglutinability on normal erythrocytes at 8 x 10(-7)M, at which concentration 6,400 molecules bind per cell. The protein has a molecular weight of 600 kDa in the native state and a pI of 5.35. It is made up of 4 identical subunits of Mr 170,000. It is detected in the plasma of tumour-bearing but not normal rats.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)

Interaction of concanavalin A with sugar residues of collagen from different tissues

Particularidades topoquímicas da reaçäo de diferentes tipos de estruturas contendo colágeno, com Cancanavalina A (Con A) näo tem sido considerados até agora. A presença de disponibilidade de resíduos de glicose em moléculas de colágeno de intestino, fígado, cartilagem e tendäo säo verificados usando Con A e peroxidase de rábano silvestre (HRP). Em cortes de intestino, cartilagem e tendäo, o método usando Con A-HRP só foi significativamente positivo quando os cortes eram submetidos a um tratamento prévio com papaína sugerindo a presença de glicoproteínas e proteoglicanas da matriz extracelular (ECM), interagindo com resíduos laterais de carboidratos das moléculas de colágeno ou causando algum bloqueio estérico como ocorre em regiöes com alto estado de compactaçäo

Mitogen induced LIF-production in T-lymphocyte subpopulations

El método de rosetas con eritrocitos de pollo recubiertos de IgG se ha utilizado junto con separación por flotación en ficoll-hypaque para obtener subpoblaciones de células enriquecidas o disminuidas de linfocitos T con receptor para Fc de IgG (Tg). Estas poblaciones celulars se han utilizado para determinar producción de LIF a diferentes concentraciones de los mitógenos, utilizando un método en microgota de agarosa. De esta manera, hemos podido observar una respuesta semejante en las diferentes poblaciones celulares hacia concanavalina A y una respuesta diferencial hacia fitohemaglitinina donde por lo general se observa una respuesta negativa de la población enriquecida con células Tg mientras que las poblaciones de linfocitos totales o aquellas en las que se han eliminado las Tg dan una respuesta positiva al segundo mitógeno

A simple method for assessing the binding of concanavalin A to mononuclear cell surfaces: no interference of visceral leishmaniasis serum on this binding

Descrevemos um método simples para determinaçäo da ligaçäo da Concanavalina A na superfície de células mononucleares do sangue periférico humano. A ligaçäo é revelada por método imuno-enzimático utilizando imunoglobulina, conjugada à peroxidase, obtida de soro de coelho anti-ConA

Effects of Naloxone on pituitary gonadotropins throughout sexual maturation in male and female rats

Con el objeto de conocer los mecanismos por los cuales el sistema opioíde endógeno (SOE) modula la actividad de la unidad hipotálamo-hipofisiaria, se analizaron los efectos de la administración de clorhidrato de naloxona (NAL) sobre la dinámica gonadotrópica de la hipófisis anterior de la rata macho y hembra durante diferentes estadios de la maduración sexual. A ratas Wistar de ambos sexos (de 5 a 50 días de edad) se les administró NAL por vía subcutánea (10 mg/Kg peso) en 0.05 ml de solución salina. Se utilizaron de 5 a 10 animales por grupo de edad incluyéndose igual número de grupos control los cuales recibieron únicamente 0.05 ml de solución salina. Posterior a una hora de la administración de la NAL, los animales fueron sacrificado colectándose la sangre, así como el hipotálamo y las glándulas hipofisiarias. Las concentraciones en suero y contenido hipofisiario de LH y FSH se determinaron por radioinmunoanálisis específicos. El contenido de receptores hipofisiarios de la hormona liberadora de las gonadotropinas (GnRH) se determinó utilizando el análogo sintético del GnRH, D-Ser(TBu6) -des- Gli10 -GnRH-N- etilamida, el cual fue marcado radiactivamente con I-25 utilizando la técnica enzimática de Lactoperoxidasa. Los cambios producidos por la administración de NAL sobre el procesamiento (cambios post-traduccionales) de FSH hipofisiaria fueron estudiados por cromatografía en concanavalina-A obteniéndose la relación libre y unida de FSH a la lectina. Los resultados demostraron que la inhibición del SOE durante etapas prepuberales induce el incremento de las concentraciones en suero de LH y FSH. Este efecto fue estadísticamente significativo únicamente para el caso de las ratas hembras no observándose efectos importantes en ratas del sexo masculino. El incremento de ambas gonadotropinas estuvo acompañado de la depleción de receptores hipofisiarios para GnRh y del incremento de la fracción libre de la hormona folículo estumulante a nivel hipofisiario...