Padronização de uma PCR para diagnóstico molecular de Microsporum canis em amostras de pelos e crostas de cães e gatos / Standardization of a pcr for molecular diagnosis of microsporum canis in samples of fur and crusts of dogs and cats

Objetivou-se neste estudo padronizar um protocolo de reação em cadeia da polimerase (PCR) para detecção de Microsporum canis em amostras de pelos e/ou crostas de cães e gatos. Foram selecionadas 48 amostras previamente identificadas por meio de cultura. Destas, 23 foram positivas para dermatófitos no cultivo. Padronizou-se a PCR a partir de primers desenhados para o alvo M. canis. Sessenta e um por cento (14/23) das amostras positivas para dermatófitos foram identificadas como M. canis em cultura. Desse total, 71,4% (10/14) apresentaram um fragmento de 218pb compatível com o esperado para a espécie fúngica alvo dessa reação. Observou-se uma sensibilidade de 71,4% e especificidade de 100% na PCR, além de uma boa concordância entre essas técnicas de diagnóstico (Kappa: 0,78; P<0,0001). O protocolo utilizado neste estudo apresentou alta especificidade na detecção de M. canis diretamente de amostras de pelos e/ou crostas de cães e gatos, viabilizando um diagnóstico mais rápido e específico, podendo esse protocolo ser empregado como um método confirmatório para agilizar a detecção de M. canis.(AU)

The aim of this study was to standardize a Polymerase Chain Reaction protocol (PCR) for the detection of Microsporum canis in fur and/or crusts of dogs and cats. 48 samples previously identified by culture were selected. Of these, 23 were positive for dermatophytes in culture. PCR was standardized from drawn primers whose target is M. canis. A total of 61% (14/23) of the dermatophyte positive samples were identified as M. canis in culture. Of this total, 71.4% (10/14) presented a fragment of 218bp compatible with that expected for the fungal species target of the reaction. A sensitivity of 71.4% and specificity of 100% in the PCR were observed, in addition to a good agreement between the techniques (Kappa: 0.78; P<0.0001). The protocol used in this study showed high specificity in the detection of M. canis directly from fur and/or crusts of dogs and cats, making possible a faster and more specific diagnosis. This protocol could be used as a confirmatory method, speeding the detection of M. canis.(AU)

Aislamiento de Microsporum canis y Microsporum gypseum en gatos asintomáticos del área metropolitana de Asunción / Isolation of Microsporum canis and Microsporum gypseum in asymptomatic cats from the metropolitan area of Asunción-Paraguay

Introducción: las mascotas generalmente son reservorios y diseminadores de hongos causantes de tiñas en humanos. Objetivo: aislar e identificar hongos dermatofitos en el pelaje de gatos asintomáticos del área metropolitana de Asunción. Materiales y métodos: se incluyeron 68 gatos asintomáticos del área metropolitana de Asunción, cuyas edades estaban entre 1 mes y 14 años. Las muestras de pelos fueron obtenidas por el método del tapete de Mariat y Tapia, se cultivaron en Agar Sabouraud con cloramfenicol y cicloheximida (agar Mycosel) y se incubaron 21 días a 28 ºC. La identificación se basó en las características macroscópicas y microscópicas de las colonias. Resultados: se aislaron hongos dermatofitos en 13 gatos: 10 (14,7%) tenían Microsporum canis y 3 (4,4%) Microsporum gypseum. No se encontró diferencias significativas en cuanto a la presencia del hongo y las variables sexo, edad, hábitat y contacto con otros animales. Conclusión: en gatos de Asunción se aislaron Microsporun canis (14,7%) y Microscporum gypseum (4,4%).

Introduction: pets are generally reservoirs and disseminators of fungi causing "tinea" in humans. Objective: to isolate and identify dermatophyte fungi in hair of asymptomatic cats of the metropolitan area of Asunción. Materials and methods: 68 asymptomatic cats were included from the metropolitan area of Asunción, whose ages were between 1 month and 14 years. The hair samples were obtained by the Mariat and Tapia mat method, they were cultivated in Sabouraud Agar with chloramphenicol and cycloheximide (Mycosel agar) and incubated 21 days at 28 ºC. The identification was based on the macroscopic and microscopic characteristics of the colonies. Results: dermatophyte fungi were isolated in 13 cats: 10 (14.7%) had Microsporum canis and 3 (4.4%) Microsporum gypseum. No significant differences were found regarding the presence of the fungus and the variables sex, age, habitat and contact with other animals. Conclusion: Microsporum canis (14.7%) and Microscporum gypseum (4.4%) were isolated of Asunción cats.