Genotoxicidade in vitro das frações orgânica e solúvel em água de material particulado de ar em três locais do Estado de São Paulo / Genotoxicity in vitro of organic and soluble water fractions of airborne particulate matter in three sites of São Paulo State

O aumento na poluição ambiental é na atualidade uma das grandes preocupações em nível mundial. Especificamente, a poluição atmosférica por material particulado tem demostrado ser um fator determinante no desenvolvimento de doenças cardiopulmonares e câncer de pulmão nas populações expostas. O material particulado é constituído por uma mistura complexa de compostos orgânicos e inorgânicos, muitos dos quais possuem potencial mutagênico e genotóxico. As características destes compostos variam em função da suas propriedades físicas, químicas e em razão das condições meteorológicas prevalecentes. A maior parte dos estudos tem se focado em avaliar o potencial genotóxico da fração orgânica do material particulado e poucos estudos têm explorado a fração solúvel em água e a contribuição diferencial das diversas espécies químicas presentes nesta fração para o dano genotóxico. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos mutagênicos e genotóxicos in vitro da fração orgânica e da fração solúvel em água de material particulado (MP10) coletado em três locais diferentes do estado de São Paulo e estabelecer a relação entre a composição química e o efeito biológico observado. Para isto, realizou­-se a extração orgânica e solúvel em água de 12 amostras de MP10. A mutagenicidade e genotoxicidade foram avaliadas usando o ensaio de Salmonella/microssoma e o teste de micronúcleos (MN) em células A549 e 16 hidrocarbonetos Policíclicos Aromáticos (HPAs) e 15 metais hidrossolúveis presentes nas amostras foram determinados quimicamente. Adicionalmente, foi determinada a metodologia de extração da fracção solúvel em água e se avaliou a estabilidade química e biológica desta fração. Os resultados indicam que a extração assistida por micro-ondas é um método eficiente para a extração da fração solúvel em agua do MP e que um tempo superior a 60 dias de armazenamento e congelamento deste tipo de extrato tem um efeito significativo sobre os resultados analíticos e a resposta biológica. Foi demonstrado ainda que as duas frações de MP estudadas são responsáveis pela indução do dano ao DNA e que não existe uma relação direta entre a concentração de MP e o efeito genotóxico observado, confirmando a importância do uso de bioensaios na avaliação da genotoxicidade de misturas complexas como o MP. Os HPAs prevalecentes nas amostras de PM10 foram fluorantene e benzo(ghi)perileno. Nos extratos solúveis em água, as maiores concentrações de metais foram determinadas para zinco, ferro e cobre. Confirmou-se que a indução de MN e o ensaio de Salmonella/microssoma representam uma poderosa ferramenta na avaliação da polução atmosférica e que as análises químicas por si só não são suficientes para a proteção e predição dos efeitos biológicos em populações expostas

The increase of environmental pollution is today one a major concern worldwide. Specifically, air pollution by particulate matter has been shown to be a determining factor in the development of cardiopulmonary disease and lung cancer in exposed populations. The particulate material consists of a complex mixture of organic and inorganic compounds, many of which have mutagenic and genotoxic activity. The characteristics of these compounds vary according to their physical and chemical properties and also to the prevailing weather conditions. Most studies have focused on evaluating the genotoxic potential of the organic fraction of particulate material, but few studies have explored the water­-soluble fraction, and the differential contributions of different chemical species present in this fraction to genotoxic damage. The aim of this study was to evaluate the in vitro mutagenic and genotoxic effects of organic and water-soluble fractions of 12 samples of particulate matter (PM10) collected at three different sites in the state of São Paulo and establish the relationship between the chemical composition and the biological effect observed. The mutagenicity and genotoxicity were evaluated using the Salmonella/microssome test and the micronucleus assay (MN) in A549 cells and 16 Polycyclic Aromatic Hydrocarbons (PAHs) and 15 water-soluble metals present in the samples were chemically determined. Additionally, the extraction method of water- soluble fraction was determined and the chemical and biological stability of this fraction evaluated. The results indicate that the microwave­-assisted extraction is an efficient method for the extraction of the water-soluble compounds of PM and that the freezing and storage of the extract over 60 days has a significant effect on the mutagenic and analytical results of PM samples. It was demonstrated that the two PM fractions studied are responsible for the induction of DNA damage and that there is no direct relationship between the MP concentration and the genotoxic effect observed, confirming the importance of using bioassays in the genotoxicity evaluation of complex mixtures as PM. The PAHs prevailing in our samples were fluoranthene and benzo(ghi)perylene. In the water-soluble extracts, highest concentrations of the elements studied were found for zinc, iron, and copper in the three places of sampling. We confirmed that MN induction and Salmonella/microsome assay represents a powerful tool to evaluate the atmospheric air pollution and that the total concentration of PM and the chemical analyses alone would not be sufficient for the prognosis of biological effects in exposed populations

Indicadores bacterianos en los mejillones Perna perna (Linné, 1758) y P. viridis (Linné, 1758) y en las aguas de extracción de bivalvos procedentes de la costa norte y sur del estado Sucre Venezuela / Bacterial indicators in the mussels, Perna perna (Linné, 1758) and P. viridis (Linné, 1758) and in bivalve extraction waters, from the northern and southern coasts of Sucre state Venezuela

Se evaluó la calidad sanitaria de los mejillones Perna perna y P. viridis, así como de las aguas de extracción en tres zonas de producción del estado Sucre, Venezuela. Se realizaron doce muestreos entre agosto 2003 a agosto 2004. En las muestras de agua se determinó la carga (NMP/100 ml) de coliformes totales (CT) y coliformes fecales (CF), mientras que a los mejillones se les realizó recuento en placa de aerobios mesófilos (AM), carga de CF (NMP/g) y Escherichia coli, además de la detección de Salmonella spp. In situ se midió la temperatura superficial del agua, salinidad y oxígeno disuelto. El agua de las zonas de Bahía Iglesia y Punta Patilla cumplió con los criterios de CT y CF (legislación venezolana y FDA-EUA), no así la procedente de la Ensenada La Chica, en donde se obtuvo para los meses de noviembre y diciembre, valores máximos de los mismos grupos, que fueron comparativamente con los límites establecidos. Los recuentos de AM en mejillones cumplieron con los criterios microbiológicos para su comercialización establecidos por la FDA-EUA. Los mejillones procedentes de la Ensenada La Chica mostraron contaminación, ya que los CF y E. coli mostraron la cifra de los 230 NMP/g (limite permitido). Solo en una oportunidad (marzo 2004) en Bahía Iglesia, se encontraron altas cargas bacterianas en el mejillón (1,1x104 NMP/g de CF y E. coli). Se detectó Salmonella en la Ensenada La Chica solamente en octubre. No se encontró correlación entre las variables físico-químicas y las poblaciones bacterianas evaluadas. Se recomienda realizar monitoreos mensuales del agua y los mejillones para que estas zonas de producción de mejillones puedan ser clasificadas y certificadas correctamente.

The sanitary quality of the mussels, Perna perna and P. viridis, was evaluated, as well as that of the water in three zones of extraction in Sucre State, Venezuela. Twelve samplings were made between August 2003 and August 2004. In water samples, the total coliforms (TC) and fecal coliforms (FC) load were determined (MPN/100 ml), while in mussel samples a plate count of aerobial mesophils (AM), load of FC (MPN/g) and Escherichia coli were made, besides detection of Salmonella spp. In situ, the surface water temperature, salinity and dissolved oxygen were measured. Waters from Bahía Iglesia and Punta Patilla met the criteria for TC and FC (according to the Venezuelan legislation and FDA-USA), but that from Ensenada La Chica during November and December did not, since the maximum values for these two groups were comparatively higher than the allowed limits. The bacterial counts of mussels from the former two areas met the microbiological criteria for commercialization, but those from Ensenada La Chica showed an elevated contamination, since FC and E. coli surpassed the value of 230 MPN/g (allowed limit). Only in one opportunity (March, 2004) at Bahía Iglesia there was high bacterial load in mussels (1.1x104 MPN/g of FC and E. coli). Salmonella was only detected in Ensenada La Chica in October. No relationship was found between the physical and chemical variables and the evaluated bacterial loads. A periodical monitoring of water and mussels is recommended in order to have a correct classification and certification of the mussel extraction zones.

Correlación de la citología de moco fecal con el coprocultivo en niños con diarrea aguda / Correlation of fecal mucus citology with coproculture in children with acute diarrhea

Se realizó un estudio retrospectivo en el Hospital Infantil Privado de la Ciudad de México del 1 de enero al 31 de diciembre de 1997, con el objetivo de determinar la utilidad de la citología de moco fecal en el diagnóstico de diarrea aguda en niños y su relación con el germen identificado en el coprocultivo. Se incluyeron 170 niños con diagnóstico de diarrea aguda en niños y su relación con el germen identificado en el coprocultivo. Se incluyeron 170 niños con diagnóstico de diarrea aguda con una mediana de edad entre 12 y 120 meses. A todos los pacientes se les realizó citología de moco fecal y coprocultivo, encontrándose 11 casos de citología de moco fecal positivo (6.5 por ciento) y 159 negativos (87.6 por ciento); en el coprocultivo el agente etiológico se identificó en 21 casos (12.3 por ciento), de los cuales ocho correspondieron a E. coli (4.7 por ciento), ocho a Salmonella (4.7 por ciento) y cinco a Shigella (2.9 por ciento). La relación de la citología de moco fecal y el agente identificado en el coprocultivo no fue significativo, ya que mostró p=0.13 mediante la prueba de Fisher