Genomic diversity of vaccinia virus strain Cantagalo isolated in southeastern Brazil during the early years of the outbreak, 1999-2006

Outbreaks of a vesiculopustular disease in dairy cattle and milkers have been frequently reported in Brazil since 1999 when the vaccinia virus strain Cantagalo was first isolated in the State of Rio de Janeiro. However, the genomic diversity of the viral isolates associated with these outbreaks is not well known, particularly in the southeastern states that represent the focal point of virus spread to other regions. Here, we report the genomic sequences and an analysis of the polymorphic site profiles and genotypic diversity of four clinical isolates of vaccinia virus strain Cantagalo collected from 1999 to 2006 in southeastern Brazil.

Evaluation of modified vaccinia virus Ankara expressing VP2 protein of infectious bursal disease virus as an immunogen in chickens

A recombinant modified vaccinia Ankara (MVA) virus expressing mature viral protein 2 (VP2) of the infectious bursal disease virus (IBDV) was constructed to develop MVA-based vaccines for poultry. We demonstrated that this recombinant virus was able to induce a specific immune response by observing the production of anti-IBDV-seroneutralizing antibodies in specific pathogen-free chickens. Besides, as the epitopes of VP2 responsible to induce IBDV-neutralizing antibodies are discontinuous, our results suggest that VP2 protein expressed from MVA-VP2 maintained the correct conformational structure. To our knowledge, this is the first report on the usefulness of MVA-based vectors for developing recombinant vaccines for poultry.

Infecção em humanos por varíola bovina na microrregião de Itajubá, Estado de Minas Gerais: relato de caso / Human infection by the cowpox virus in the microregion of Itajubá, state of Minas Gerais: case report

Os autores relatam três casos de varíola bovina em humanos, ordenhadores manuais em vacas infectadas, na microrregião de Itajubá, MG. As técnicas diagnósticas foram: isolamento de amostra semelhante ao vírus vaccinia de secreções das lesões cutâneas, reação em cadeia de polimerase, microscopia eletrônica e anticorpos para Orthopoxvirus no sangue dos pacientes.

The authors report three human cases of cowpox infection, among farm workers who were manually milking infected cows, in the microregion of Itajubá, Minas Gerais. The diagnostic techniques used were: isolation of samples similar to the vaccinia virus, from skin lesion secretions; polymerase chain reaction; electronic microscopy; and antibodies for Orthopoxvirus in the patients' blood.

Expression and localization of human papillomavirus type 16 E6 and E7 open reading frame proteins in human epidermal keratinocyte

Over 60 different types of human papillomavirus (HPV) have been identified, and they are classified into high and low risk groups based on the risk for malignant progression of HPV associated lesions. HPVs belonging to a high risk group have been shown to express two major transforming proteins, E6 and E7. With respect to the transforming activity of these proteins, many investigators have reported the location of these proteins in the cell, but their results are still controversial. In the present study, HPV type 16 E6 or E7 open reading frame (ORF) proteins were expressed and localized in human epidermal keratinocytes (RHEK-1) using the vaccinia virus as an expression vector. Immunofluorescence detection using monoclonal antibodies against E6 or E7 ORF proteins revealed that E6 or E7 proteins of HPV type 16 were located in the cytoplasm of RHEK-1 cells. These results suggest that E6 and E7 proteins bind to the tumor suppressor counterparts, thereby preventing transport of these proteins into the nucleus. These antioncogene products that fail to be rapidly transported out of the cytosol may be degraded by certain proteases such as the ubiquitin dependent system. In this way, the precise function of antioncogene products in the regulation of cell growth could be destroyed, and abnormal cell growth could occur.

Los virus de la viruela y de la vaccinia / The pock virus and of the vaccinia virus

La eliminación mundial del virus de la viruela con el virus de la vaccinia fue un proceso que duró poco más de siglo y medio, que se desarrolló en varias etapas según la aceptación del procedimiento, de los adelantos técnicos y del esfuerzo colaborativo de las autoridades internacionales de salud con los representantes en cada uno de los países del mundo. El virus de la vaccinia es asimétrico y está recubierto por una membrana obtenida cuando el virus maduro sale de la célula infectada. Tiene la forma de un ladrillo y es muy resistente a los efectos de los inactivadores físicos y químicos. La certificación definitiva de la erradicación mundial de la viruela fue hecha por la Asamblea Mundial de la Salud en mayo de 1980; con esto el virus de la vaccinia parecía también haber quedado condenado a la extinción. Sin embargo, la comunidad científica se volvió a fijar en él a consecuencia del desarrollo de la tecnología del DNA recombinante, cuando surgió la posibilidad de romper la barrera genética de los organismos y se logró la recombinación de genomas de cualquier especie. Si el agente infeccioso no es patogénico y el gene proviene de otro agente que si lo es, entonces ese vector de expresión se puede utilizar con una vacuna prácticamente ideal, ya que puede inmunizar al sujeto contra ese patógeno, sin peligro para la salud. Uno de los más lógicos candidatos a servir como vector fue el virus de la vaccinia, debido a que sus cualidades inmunogénicas y de seguridad son excelentes ya que su genoma puede incorporar una cantidad importante de DNA, por lo menos 25,000 pares de bases, sin por ello perder su inefectividad. El virus de la vaccinia cuenta ahora con enormes posibilidades para continuarse usando, ya no como medida profiláctica, específica o no, sino como un vehículo seguro y eficiente de material genético de otros agentes infecciosos

Expresión del antígeno de superficie del virus de la hepatitis tipo B por un virus Vaccinia recombinante / Expression of hepatitis B surface antigen by a recombinant Vaccinia virus

El virus Vaccinia ha sido empleado como vector para la fabricación de vacunas recombinantes vivas, entre las cuales se ha reportado la fabricación de un virus recombinante capaz de expresar el antígeno de superficie del virus de la hepatitis tipo B (HBSAg) durante el proceso de replicación del virus. En nuestro laboratorio se construyó un virus Vaccinia recombinante, también capaz de expresar el HBSAg. Los transcriptos específicos de HBSAg fueron caracterizados. La propiedad del virus Vaccinia recombinante de expresar el HBSAg, fue probada en ratones y conejos, obteniéndose en estos animales títulos de anticuerpos contra el HBSAg después de haber sido inoculados con los virus recombinantes