Determinação de HbA1c por CLAE: interferência de variantes de hemoglobinas S e C e alta concentração de HbF / HbA1c determination by HPLC: interference of hemoglobin variants HbS, HbC and HbF high concentration

INTRODUÇÃO: O diabetes mellitus (DM) é considerado um problema importante de saúde pública; possui prevalência elevada e nos últimos anos observa-se aumento progressivo na sua incidência. OBJETIVO: verificar possíveis variações na concentração de hemoglobina (Hb) glicada (HbA1c) na presença de Hbs S e C e avaliar o impacto da redução da HbA1c na avaliação clínica e no monitoramento do paciente diabético. MATERIAL E MÉTODOS: Foram incluídos no estudo, 150 indivíduos diabéticos oriundos da cidade de Salvador, Bahia, de ambos os gêneros, com idade média de 56 anos. Foram determinadas a glicemia de jejum e a HbA1c por metodologia de oxidase-peroxidase e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), respectivamente. RESULTADOS: Foram observadas variações na concentração da HbA1c em função da presença de variantes de Hb, como 7,85%, AA; 7,30%, AS e 7,15%, AC. DISCUSSÃO E CONCLUSÃO: A metodologia analítica a ser utilizada para determinação de HbA1c deve ser escolhida com base nas características gerais da população atendida e nas comorbidades associadas, pois a presença de Hbs S e C ocasiona reduções significativas de glicação. Essa redução pode levar a interpretações clínicas inadequadas relativas ao controle glicêmico dos pacientes.

INTRODUCTION: Diabetes mellitus (DM) is considered an important public health problem. It is highly prevalent and its incidence has progressively increased in recent years. OBJECTIVE: To verify possible variations of glycated hemoglobin (HbA1c) concentration in the presence of Hb S and Hb C and to evaluate the impact of HbA1c reduction on clinical evaluation and monitoring of diabetic patients. MATERIAL AND METHODS: This study comprised 150 diabetic individuals from Salvador city, Bahia, from both genders and average age of 56 years old. Fast blood glucose and HbA1c were determined by oxidase-peroxidase and high-performance liquid chromatography (HPLC) methods, respectively. RESULTS: There were variations in the concentration of HbA1c in the presence of hemoglobin variants such as AA (7.85%), AS (7.30%), and AC (7.15%). DISCUSSION AND CONCLUSION: The analytical method used to determine HbA1c needs to be chosen according to the general population characteristics and associated comorbidities, since the presence of hemoglobin S and C causes significant reductions in hemoglobin glycation, which may lead to clinical misinterpretation of patients' glycemic control.

Clinical and molecular characteristics of sickle cell anemia in the northeast of Brazil

Beta S-globin gene (âS-globin) haplotypes, markers for severe sickle cell anemia (SCA), and the alpha-thalassemia 2 gene 3.7 kb deletion (-á2(3.7 kb) thal) along with demographic and clinical data were investigated in SCA outpatients (n = 125, 63 female and 62 male) in the Brazilian state of Bahia, which has a high prevalence SCA. PCR-RFLP showed that the Central African Republic/Benin (CAR/BEN, 51.2 percent) haplotype was most frequent, followed by the Benin/Benin (Ben/Ben, 28.8 percent). At least one CAR haplotype was present in every outpatient with a history of cerebrovascular accident. The Cameroon (Cam), Senegal (Sen) and Arab-India haplotypes occurred in small numbers, as did atypical haplotypes. Fetal hemoglobin (HbF, percent) was unevenly distributed. Compared to those > 18 y, those aged < 18 y had had fewer erythrocyte transfusions and high HbF levels (12.3 percent ± 7.01 to 7.9 percent ± 4.36) but a higher frequency of spleen sequestration and pneumonia. Compared with normal á - genes carriers values, the outpatients with -á2(3.7 kb) thal (determined by PCR analysis) had significantly higher mean hemoglobin concentration (Hb) (8.3 ± 1.34 g/dL, p = 0.018) and packed cell volume (PCV = 27.1 percent ± 4.26, p = 0.019) but low mean corpuscular volume (MCV = 86.1 fL = 10-15 L ± 9.56, p = 0.0004) and mean corpuscular hemoglobin (MCH = 26.6 percent ± 4.60, p = 0.039).

Hemoglobinopathies in newborns from Salvador, Bahia, Northeast Brazil

Hemoglobinopatias são alterações hereditárias na molécula de hemoglobina com prevalência mundial elevada. O Brasil apresenta prevalência de 0,1 a 0,3por cento para recém-nascidos com anemia falciforme e freqüência de 20,0 a 25,0 por cento para a ocorrência de heterozigotos da talassemia alfa sobrescrito 2 entre indivíduos afro-descendentes. O presente estudo investigou a presença de hemoglobinas variantes e talassemia alfa 2 subscrito 2 sobrescrito 3.7kb e alfa subscrito 2 sobrescrito 4.2Kb em recém-nascidos de Salvador, Bahia, Brasil. Analisamos o sangue do cordão umbilical de 590 recém-nascidos, sendo 57 (9,8 por cento) com padrão FAS; 36 (6,5 por cento) FAC; um (0,2 por cento) SF e cinco (0,9 por cento) FSC. Cento e catorze (22,2 por cento) apresentaram talassemia alfa 2 subscrito 2 sobrescrito 3.7kb, dos quais 101 (19,7 por cento) foram heterozigotos e 13 (2,5 por cento) homozigotos, mostrando significância estatística para os dados hematológicos entre recém-nascidos com genes a normais e portadores de talassemia alfa 2 subscrito 2 sobrescrito 3.7kb. A talassemia alfa subscrito 2 sobrescrito 4.2Kb não foi encontrada. As freqüências descritas neste trabalho confirmam que as hemoglobinopatias são um problema de Saúde Pública no Brasil, enfatizando a importância dos programas de triagem neonatal e aconselhamento genético.

Anemia falciforme em Salvador - Bahia: caracterização fenotípica, molecular e de sequências gênicas potencialmente importantes na expressão dos genes gama da hemoglobina fetal / Sickle cell anemia in Salvador - Bahia: phenotype and molecular characterization and search of specific gene sequences potentially important to gama gennes expression of the fetal hemoglobin

(...) O estudo investigou as características fenopíticas e os marcadores moleculares presentes em portadores da anemia falciforme de Salvador-BA, identificando seqüências gênicas potencialmente importantes para a expressão dos genes gama. O perfil de hemoglobinas e o nível de HbF foram determinados por cromatografia líquida de alta performance (HPLC). Informações sobre o perfil clínico dos pacientes foram obtidas através da análise de prontuários. A talassemia alfa2 3.7kb foi investigada pela reação em cadeia da polimerase (PCR) e os haplótipos ligados ao grupo de genes da globina betaS foram investigados por PCR e análise de sítios polimórficos utilizando endonucleases de restrição (RFLP) (...) Foram analisados 131 pacientes, dos quais 125 tiveram identificado o genótipo BetaS, tendo sido encontrado 64 (51,2 por cento) CAR/Ben; 36 (28,8 por cento) Ben/Ben; 18 (14,4 por cento) CAR/CAR; dois (1,6 por cento) Ben/Cam; um (0,8 por cento) CAR/Cam; um (0,8 por cento) Car/Arábia-India e um (0,8 por cento) Sen/Aty. A talassemia alfa2 3.7kb foi estudada em 110 pacientes, onde 30 (27,3 por cento) foram heterozigotos e dois (1,8 por cento) homozigotos. O uso de transfusão sanguínea foi maior em pacientes com HbF menor ou igual 10,0 por cento (p=0,009). Pacientes com genótipos alfa diferentes apresentaram diferenças para os valores de Hb (p=0,018); Ht (p=0,019); VCM (p=0,0004) e HCM (p=0,039). Os níveis de HbF foram maiores entre os pacientes Ben/Ben que entre os CAR/CAR (p=0,007) e CAR/Ben (p=0,013). A análise das seqüências do HS2-LCR de dez indivíduos demonstrou a substituição G-A na posição -10.677, presente apenas entre os portadores do haplótipo Ben com nível elevado de HbF, sugerindo uma possível associação entre este polimorfismo, a expressão dos genes y e a síntese da HbF. A análise da região promotora do gene yG demonstrou a substituição T-C na posição -157, que parece ser uma seqüência característica entre os pacientes estudados. Também foi encontrada a deleção de 4 pb na posição -222 a -225 no gene yG e relacionado ao haplótipo Cam. Os dados demonstraram um novo polimorfismo localizado no HS2-LCR e na região promotora do gene yG da globina, justificando a realização de estudos adicionais, associando os níveis de HbF, marcadores biológicos e mecanismos relacionados, visando esclarecer um possível papel no desenvolvimento do fenótipo da doença

C677T polymorphism of the MTHFR gene and variant hemoglobins: a study in newborns from Salvador, Bahia, Brazil

O polimorfismo C677T no gene da MTHFR tem sido associado ao aumento dos níveis séricos de homocisteína.total (tHcy), descrito como fator de risco para o desenvolvimento de doenças cardiovasculares. Oitocentos e quarenta e três recém-nascidos (RNs), de duas maternidades diferentes, uma pública e a outra privada, em Salvador, Bahia, Brasil foram triados para o polimorfismo C677T por PCR e RFLP. A freqüência do alelo T foi de 0,23 e as prevalências dos genótipos C/T e T/T foram de 36,2 por cento e 5,3 por cento, respectivamente. A freqüência do alelo T diferiu e a prevalência do genótipo T/T foi mais elevada entre os RNs da maternidade privada. O perfil de hemoglobinas (Hb) foi determinado por HPLC em 763 RNs. A freqüência de Hbs variantes foi mais elevada entre os RNs da maternidade pública Tsylla Balbino do que na maternidade privada do Hospital Santo Amaro. A associação do polimorfismo C677T e o perfil de Hbs foram estudados em 683 RNs, apresentando freqüência elevada da coexistência do alelo T e Hb variantes. Estes resultados podem ser utilizados como base para estudos futuros sobre riscos potenciais de eventos vaso-oclusivos nestes indivíduos.

Triagem neonatal: investigação de hemoglobinoparias em recém-nascidos da cidade do Salvador - Bahia / Neonatal screening: hemoglobinopathies investigation in newborns from Salvador - Bahia

As hemoglobinopatias apresentam freqüência mundial elevada. No Brasil, tem sido registradas freqüências elevadas para a HbS, estimando-se 0,1 a 0,3% de recém-nascidos (RN) com anemia falciforme (SS). A talassemia a apresenta freqüência de 20 - 23% entre algumas populações estudadas. Um total de 600 amostras de sangue de cordão umbilical foi investigada. Os RN foram provenientes da Maternidade Pública Tsylla Balbino (SESAB) e as amostras coletadas no período de fevereiro a junho de 2000. A análise de hemoglobinas foi realizada por eletroforese em fitas de acetato de celulose pH 8,9 e em ágar - citrato pH 6,0; os dados hematológicos foram obtidos através de contador de células eletrônico (Coulter Count T - 890). O DNA foi isolado dos leucócitos e utilizado para a investigação das talassemias α2 3.7Kb e α2 4,ZKb por PCR (Reação em Cadeia da Polimerase). Os dados referentes aos RN foram obtidos através de entrevista às mães, consulta aos prontuários médicos e observação do RN. A análise estatística foi realizada através do software EPI-INFO versão 6.04. Foram encontrados 538 (90,9%) RN com perfil de hemoglobinas normal (AF); 33 (5,6%) heterozigotos para a HbS (ASF), 19 (3,2%) heterozigotos para a HbC (ACF) e 02 (0,3%) homozigotos para a HbC (CF). O peso, gênero e idade gestacional não demonstraram associação com a presença de hemoglobinas anormais. Vinte e seis RN com perfil ASF foram distribuídos de acordo com a classificação racial: 11 (42,30%) foram mulatos, 08 (30,77%) pretos e 07 (26,90%) brancos. A análise hematológica entre os RN com padrão de AF e ASF não demonstrou diferenças estatisticamente significativas. A análise hematológica entre os RN AF e ACF apresentou diferenças significativas para os valores de Ht (p=0,008), Hm (p=0,017) e CHCM (p=0,0045). Os padrões SF e SCF não foram encontrados na análise da presente amostra. A talassemia α2 3,7 Kb foi detectada em 134 (22,71%) dos RN, entre os quais 120 (20,34%) foram heterozigotos e...