Genotypic identification of Cryptosporidium spp. isolated from hiv-infected patients and immunocompetent children of São Paulo, Brazil / Identificação genotípica de Cryptosporidium spp. isolados a partir de pacientes com HIV e crianças imunocompetentes de São Paulo, Brasil

Cryptosporidium isolates identified in fourteen stool samples, collected from five HIV-infected patients and nine immunocompetent children, living in the Sate of São Paulo, Brazil, were submitted to a molecular analysis using a nested PCR followed of restriction fragment length polymorphism (RFLP), for genetic characterization. The analysis was based on digestion with RsaI restriction enzyme of a DNA fragment amplified from the Cryptosporidium oocyst wall protein (COWP) gene. Based on this analysis, four samples were identified as Cryptosporidium parvum, eight as Cryptosporidium hominis and two presented a profile that correspondedto Cryptosporidium meleagridis when compared to the standards used in the analysis. The use of molecular methods can be helpful to identify source of infections and risk factors related to Cryptosporidium infection in our communities.

Isolados de Cryptosporidium identificados em quatorze amostras de fezes, coletadas de cinco pacientes com infecção por HIV e de nove crianças imunocompetentes, residentes no estado de São Paulo, Brasil, foram submetidos a análise molecular por Nested-PCR, seguido da caracterização genética por polimorfismo do tamanho do fragmento de restrição (RFLP). A análise foi baseada na digestão, com a enzima de restrição RsaI, de um fragmento de DNA amplificado do gene que codifica a proteína de parede do oocisto de Cryptosporidium (COWP). Baseado nesta análise, quando comparadas aos padrões utilizados, quatro amostras foram identificadas como Cryptosporidium parvum, oito como Cryptosporidium hominis e duas apresentaram um perfil correspondente ao de Cryptosporidium meleagridis. O uso de métodos moleculares pode ser útil para identificar a fonte das infecções e os fatores de risco relacionados à infecção por Cryptosporidium em nossas comunidades.

Detecção de Cryptosporidium meleagridis em amostras fecais de pacientes HIV positivos no Brasil / Detection of Cryptosporidium meleagridis in fecal samples of HIV-infected patients from Brazil

Amostras fecais de indivíduos portadores de HIV, e com Aids, foram submetidas ao diagnóstico laboratorial de criptosporidiose. Do total de 29 amostras, 15 apresentaram oocistos de Cryptosporidium sp no exame parasitológico, 13 foram reativas em ELISA para detecção de coproantígenos e em 16 foram obtidos produtos de amplificação por Nested-PCR. Foi realizada caracterização genotípica em cinco destes produtos amplificados, por meio de PCR-RFLP com a enzima de restrição AfaI (RsaI). Dois isolados foram identificados como Cryptosporidium hominis, um como Cryptosporidium parvum e dois apresentaram perfil eletroforético correspondente a Cryptosporidium meleagridis. Esses achados trazem evidências de que diferentes espécies de Cryptosporidium circulam no ambiente, traduzindo-se em risco tanto para humanos quanto para outros animais.

Detecção de Cryptosporidium em amostras fecais por técnica de Nested-PCR e comparação com métodos imunológico e parasitológico / Detection of Cryptosporidium in fecal samples tested by Nested-PCR and comparison between immunologic and parasitologic methos

A criptosporidiose é causada por protozoários do gênero Cryptosporidium. A doença se caracteriza por diarréia aguda no homem e em outros animais. O diagnóstico laboratorial é feito pela detecção do parasito por métodos parasitológicos, imunológicos ou moleculares. Amostras fecais de 29 pacientes portadores de HIV e com AIDS analisadas pelos métodos parasitológico (Kinyoun) e imunológico (ELISA) foram submetidas ao método molecular (Nested-PCR). Destas, 15 amostras foram positivas para Cryptosporidium sp no exame parasitológico e 14 negativos para Cryptosporidium, mas positivos para outras espécies parasitárias ou bacilos álcool-acido-resistentes. Pela Nested-PCR foram encontradas 16 amostras positivas, e destas, 11 apresentaram resultados concordantes com o exame parasitológico e cinco não. Essas cinco amostras discordantes foram também negativas pelo ELISA. Das 15 amostras positivas pelo exame parasitológico, duas foram negativas pelo Nested-PCR e por ELISA. Os métodos moleculares podem-se constituir em importante ferramenta diagnóstica nos casos com suspeita clínica de criptosporidiose nos estudos epidemiológicos, permitindo a caracterização genotípica do parasito e auxiliando na investigação das rotas de transmissão. As discordâncias observadas entre os diferentes métodos precisam ser mais bem investigadas

Vírus do papiloma hamano(HPV) em sangue periférico de mulheres tratadas de câncer de mama e neoplasias intra cervical / Human papillomavirus(HPV) in treated women's of breast cancer peripheral blood and neoplasms intra-cervix

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