Identificación de genes de Mycobacterium tuberculosis que se expresan bajo condiciones de estrés anaeróbico / Identification of Mycobacterium tuberculosis gen differentially expresed during anaerobic stress conditions

Objetivo: identificar genes de M. tuberculosis que se inducen bajo condiciones de limitación de oxigeno para estudiar su posterior efecto sobre la viabilidad del patógeno. Materiales y métodos: se crecieron cultivos de la cepa no patógena M. smegmatis mc²155 en cajas de microcultivo bajo condiciones de estrés anaeróbico. Se construyó una biblioteca genómica de M. tuberculosis H37Rv en el plasmado pGFP, la cual fue introducida dentro de M. smegmatis. A partir de observación de las células de M. smegmatis recombinantes bajo luz UV se identificaron clones que indujeran la expresión del gen reportero bajo condiciones de limitación de oxígeno. Los plásmidos recombinantes de estos clones fueron aislados y los insertos secuenciados. Las secuencias obtenidas fueron analizadas comparándolas con el genoma completo de M. tuberculosis. Resultados: Se estandarizaron las condiciones in vitro para realizar estudios por estrés anaeróbico usando la micobacteria M. smegmatis. El tamizaje de la genoteca de M. tuberculosis dentro de M. smegmatis llevó a la identificación de 3 posibles fragmentos genómicos que inducen la expresión de gfp en condiciones de estrés anaeróbico. La secuencia de estos insertos reveló que contenían posibles secuencias reguladoras, dos de ellas corriente arriba de los genes para las proteínas hipotéticas Rv2603 y Rv3267 de M. tuberculosis y la otra para un marco abierto de lectura no identificado. Conclusiones: Utilizando librerías genómicas y una micobacteria no patógena como M. smegmatis es posible identificar genes de M. tuberculosis posiblemente involucrados en resistencia a condiciones de estrés

Utilidad de la biopsia pulmonar abierta en pediatría 11 años de experiencia en el Hospital Santa Clara

Mediante una revisión retrospectiva se evaluó la utilidad de la biopsia pulmonar abierta (BPA) sobre el diagnóstico y tratamiento de las neumopátias crónicas en los niños. Se recolectaron 33 registros de Historia Clínica. La edad promedio de los pacientes fué de 4.16 años con predominio del sexo masculino (4.1). La mayoría de los pacientes tenía síntomas respiratorios crónicos que no pudieron encasillarse en un diagnóstico adecuado utilizando pruebas menos invasivas. Cerca del 40 por ciento de los casos tenía infiltrados readiológicos de tipo intersticial. Una proporción significativa de pacientes no tenía una valoracion paraclínica satisfactoria, en especial sobre su estado inmunológico y sobre métodos para descartar patología infecciosa. La BPA permitió un cambio en el diagnóstico en el 48.5 por ciento de los casos y generó una modificación terapéutica en un porcentaje similar de pacientes, aunque estas variaciones no estuvieron asociadas a una franca mejoría, dado que solamente el 36.4 por ciento de los pacientes evolucionó satisfactoriamente. La frecuencia de complicaciones alcanzó un 12.1 por ciento las cuales fueron superadas rápidamente y no se registraron casos de mortalidad. La BPA en nuestro medio es un procedimiento quirúrgico seguro, sin embargo, no siempre aporta los resultados esperados para definir un diagnóstico certero