Characterization of physicochemical markers for homeopathic medicines and biological supernatant samples

Solvatochromic dyes are probes to detect variations on the dipole moment of solvents after the insertion of homeopathic potencies. Recent studies have shown they can be useful tools in laboratory and field studies to detect the activity of homeopathic remedies.Objective: Determine whether solvatochromic dyes can be a diagnostic tool for cells infected by different agents and/or markers to identify the activity of homeopathic medicines. Methods: Ethilicum1cH, Siliceaterra6, 30, 200cH; Zincummetallicum6, 30, 200cH and Phosphorus6, 30 and 200cH were analyzed by pouring the samples (in a 1:60 rate) into a series of seven dyes (rhodamine, ET 33, ET 30, coumarin 7, NN DMIA, Nile red, methylene violet) diluted in absolute ethanol using pre-established working concentrations. Oscillations of dye absorbance were observed at visible light spectrophotometry according to the remedy and potency. Water and succussed water were used as controls. In a second moment, the absorbance profile of the remedies will be compared with those of biological samples (supernatants) and checked with the biological effect previously obtained from each treatment.Supernatants of RAW 264.7 macrophages stimulated by Calmette-Guérin bacilli (BCG) or infected with Encephalitozoon cuniculiwill be analyzed. Results: Preliminary results have shown that Siliceaterra6cH, Phosphorus30 and 200cH and Zincummetallicum6, 30 and 200cH reduced the absorbance of methylene violet (p=0.01). Repetitions and analysis of supernatants are expected to be performed in the next steps of the study. Future perspectives: Establish a pattern of reactivity of the studied medicines with different dyes and the putative relation with the corresponding supernatants, as an attempt to obtain a "physicochemical signature" for each kind of infection and/or treatment.

Valores normales de la prueba Sudan III en niños sanos menores de un año de edad / Normal range for Sudan III test in under children under one year of age

La esteatorrea es la pérdida de grasa en las heces. Se manifiesta clínicamente con heces fétidas, grasosas y abundantes. Se puede determinar por el método Van de Kamer, el esteatocrito acidificado y la tinción sudan III en heces. El objetivo del presente trabajo es precisar el valor normal de la prueba Sudan III en heces. Se incluyeron las muestras de heces de 2000 niños sanos (recién nacidos pre-término, recién nacidos a término, lactantes de 1-4 meses y de 5-12 meses de edad), 500 muestras por grupo. Se realizó en el Hospital Universitario de los Andes, en Mérida-Venezuela, durante los años 1999-2009. En la prueba se utilizó la tinción sudan III y el reactivo de Saathoff, con lente microscópico de 40 y se tomaron en cuenta las gotas grandes y medianas de grasa por campo. Es una investigación clínica con enfoque epidemiológico, observacional de tipo aleatoria. Del total de niños 53% fueron varones y 47% niñas. El promedio de evacuaciones por día fue de 3 en los recién nacidos, de 2 a 3 en los lactantes menores de 4 meses y de 1 a 2 en los de 5 a 12 meses de edad. El valor normal de la prueba Sudan III en heces varía dependiendo de la edad. En RN pre-término un promedio de 5.4 gotas (12-0 gotas)de grasa por campo, en RN a término 7.9 gotas (16-0), en lactantes menores de 4 meses de edad 4.3 gotas (10-0) y en los lactantes de 5-12 meses 3.8 gotas (6-0) de grasa por campo. La prueba Sudan III orienta en el diagnostico de esteatorrea en niños, en pacientes con mala absorción intestinal y en la evaluación del uso de enzimas pancreáticas. Es una técnica sencilla, económica y fácil de realizar. El conocer los valores normales dependiendo de la edad pediátrica permite al médico tratante plantear la existencia de esteatorrea patológica.Palabras claves: esteatorrea, prueba Sudan III en heces

Steatorrhea is the loss of fat through the stools. It becomes clinically apparent with the presence of increased amounts of foul and fatty stools. It can be determined through the Van de Kamer method, the acid steatocrit and the Sudan III stain test of stools. The objective of this paper is to specify the normal value of the Sudan III Stain Test of stools. 2000 healthy children stools samples were included. Age groups were preterm’s, newborns, and infants between 1-4 and 5-12 months of age, 500 samples were collected for every group. The study was performed at the Hospital Universitario de los Andes, in Mérida-Venezuela, during years 1999 through 2009. The Sudan III Stain Test and the Saathoff reactive were employed, as well as a highpower objective lens. The number of large and medium fat drops by field was considered for the classification. This is a prospective, observational, randomized clinical trial. For the total number of children (53% males and 47% females) the average of evacuations per day showed a total of 3 times inthe newborns, from 2 to 3 times in the infants between 1-4 months of age and from 1 to 2 times in the infants between 5 and 12 months of age. The normal value of the Sudan III Stain Test of stools varies according to age: in preterm newborns this test shows an average of 5,4 drops (12-0) of fat per field, in full term newborns 7,9 drops (16-0), in infants from 0 to 4 months 4,3 drops (10-0) and in infants between 5 and 12 months 3,8 drops (6-0) of fat per field. Sudan III Stain Test guides in the diagnosis of steatorrhea in children, in patients with intestinal malabsorption syndrome and in the evaluation of the indication of pancreatic enzymes. This is a cheap, simple and easy technique .To know the normal values in the different pediatric age groups, allows to establish the presence of steatorrhea

Epimastigogénesis de Trypanosoma cruzi en medio axénico: cambios peptídicos, glicopeptídicos y enzimáticos / Trypanosoma cruzi epimastigogenesis: peptidic, glicopeptidic and enzymatic changes

La epimastigogénesis de Tripanosoma cruzi es la transformación tripomastigota-epimastigota que ocurre en el tracto intestinal del insecto vector (Hemiptera, Reduvidae). Aún cuando se ha estudiado este fenómeno in Vitro en el insecto, poco se sabe los cambios morfológicos y moleculares que ocurren durante este proceso. En este trabajo se analizaron los perfiles peptídicos, glicopeptídicos y proteolíticos durante la simulación de este evento in vitro en un medio axénico. Se empleó tripomastigotas sobrenadantes de células (EPm clon6) incubados a tiempos variables (1/2 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 días) en medio LITB a 27º C. Se realizó recuento diferencial de parásitos en cámara Neubauer y láminas coloreadas (Giemsa). Los perfiles peptídico y glicopeptídico se analizaron mediante SDS-PAGE y coloraciones específicas. Los perfiles proteolíticos se caracterizaron mediante zimografía usando gelatina como substrato e inhibidores específicos de cisteín- y metalo-proteasas. Nuestros resultados indicaron cambios morfológicos a partir de las 12 horas de incubación, con aparición de formas en diferenciación y amastigotas. A partir del sexto día se registró una caída en el porcentaje de amastigotas con un aumento concomitante de epimastigotas. Los cambios moleculares coincidieron con los cambios morfológicos, con aparición de péptidos y glicopéptidos característicos de epimastigotas a partir del octavo día. La actividad proteolítica es significativamente mayor el octavo día, incrementándose progresivamente hasta el día 12 de la cinética, siendo mayor en epimastigotas que en tripomastigotas; existe expresión diferencial de proteasas, con aumento significativo de la actividad de cisteín proteasas durante el evento, mientras que las metaloproteasas sólo se expresaron a partir del día 10. Estos resultados indican una activación diferencia de proreasas durante la epimastigogénesis y sugieren la participación de estas enzimas durante el proceso

Análisis y resultados clinicocitogenéticos de fetos y recién nacidos con alteraciones cromosómicas durante un año en el Instituto Nacional de Perinatología / Analysis of clinical and cytogenetic studies fetus and new born with chromosomal anomalies during one year at the Instituto Nacional de Perinatología

Introducción: Las anormalidades cromosómicas son una causa frecuente de morbilidad y mortalidad en la población humana. Objetivo: Describir el número y tipo de las alteraciones cromosómicas numéricas y estructurales detectadas en estudios citogenéticos realizados prenatalmente y en recién nacidos en el Instituto Nacional de Perinatología (INPer) durante el periodo comprendido de enero a diciembre del 2003. Metodología: Realizar un estudio descriptivo de tipo retrolectivo de los pacientes revisados por el Departamento de Genética con defectos congénitos que presentaron anormalidades cromosómicas. Resultados: Durante el año 2003, 3.26% (189/5795) de los pacientes nacidos en el INPer presentaron defectos al nacimiento, de los cuales veintisiete pacientes mostraron un cariotipo anormal de los cuales 21 (77.7%) presentaron alteraciones cromosómicas numéricas; además, en seis (22.2%) se encontró una alteración cromosómica estructural, lo que representa 0.46% de los pacientes nacidos en el INPer. En seis casos el diagnóstico se realizó en etapa prenatal y se corroboró al nacimiento. Conclusiones: La mayoría de alteraciones cromosómicas se presentan con múltiples defectos al nacimiento y con alteración en el crecimiento y desarrollo mental. Es importante que ante la presencia de pacientes con múltiples defectos mayores estructurales se sospechen este tipo de alteraciones y se realicen los estudios necesarios a la familia para poder brindar un adecuado asesoramiento genético.

Introduction: Chromosomal anomalies are a frequent cause of human disease. Objective: Describe the numerical and structural chromosomal anomalies detected by cytogenetic studies done prenatally and in newborns found in the Instituto Nacional de Perinatología during the period between January and December 2003. Methods: Descriptive study of the patients with congenital defects seen by the Genetics Department who presented chromosomal anomalies. Results: During the year 2003, the 3.46% (189/5795) of the babies born at the INPer had structural anomalies. Twenty patients had a chromosomal anomaly of which 21 (77.7%) had a chromosomal numeric alteration and six (22.2%) a chromosomal structural anomaly which represented 0.46% of the newborns. In six cases the diagnosis was done prenatally and confirmed at birth. Conclusions: Most of the chromosomal anomalies present themselves with multiple congenital anomalies and retarded growth and development. It is very important to implement this type of studies in patients with congenital anomalies, complete the familiar study and provide an accurate genetic counseling to the parents.