Caracterização morfológica dos hemócitos do Aedes aegypti e do Aedes albopictus e a resposta imune dos hemócitos do Aedes aegypti após a infecção pelo Dengue virus / Morphological characterization of the hemocytes of Aedes aegypti and Aedes albopictus and immune response of Aedes aegypti hemocytes after infection by Dengue virus

Os insetos possuem mecanismos imunes que fornecem proteção contra diversos microorganismos. Estas barreiras anatômicas e fisiológicas incluem as respostas de defesa celulares e humorais. A maior parte dos estudos de imunidade de insetos concentra-se na resposta humoral. Entretanto, os hemócitos são também conhecidos por estarem envolvidos nas respostas imunes celulares contra muitos tipos de microorganismos. Inicialmente, nós caracterizamos os hemócitos dos mosquitos Aedes aegypti e Aedes albopictus revelando seis diferentes subpopulações celulares: prohemócito, adipohemócito, granulócito, plasmatócito, oenocitóide e trombocitóide. Nós demonstramos que estes mosquitos têm aproximadamente 3.000 hemócitos/μl de hemolinfa e eles exibem diversos padrões no reconhecimento de diferentes lectinas (Bandeiraea simplicifolia, Canavalis ensifonnis, Helix pomatia, Arachis hypogea, Ulex europaeus, Triticum vulgaris, Limulus polyphemus, Ricinus communis).

Os ensaios de endocitose demonstraram que, em A. albopictus, o granulócito e o plasmatócito apresentaram atividade fagocítica contra as partículas de látex. Além disso, nestas células e no oenocitóide foi observada a presença de diversos lisossomos através da utilização de anticorpos específicos. Em A. aegypti, o prohemócito, o granulócito e o oenocitóide foram os tipos celulares que endocitaram a albumina. Entretanto, o plasmatócito e o oenocitóide foram as células marcadas como possuindo lisossomos. Os estudos de interação do A. aegypti com Dengue virus demonstraram que no 5º e 7º dia após a alimentação oral houve um aumento significante no número total de hemócitos onde os plasmatócitos, oenocitóides e granulócitos foram os tipos celulares que aumentaram neste período. Os estudos por microscopia exibiram alterações morfológicas características nos plasmatócitos e nos oenocitóides de A. aegypti devido à presença do vírus na hemolinfa. Entretanto, os plasmatócitos, oenocitóides e granulócitos estão hábeis para endocitar os vírus, como demonstrado pela imonumarcação específica visualizada na microscopia confocal.

Caracterização morfológica dos hemócitos do Aedes aegypti e do Aedes albopictus e a resposta imune dos hemócitos do Aedes aegypti após a infecção pelo Dengue virus

Os insetos possuem mecanismos imunes que fornecem proteção contra diversos microorganismos. Estas barreiras anatômicas e fisiológicas incluem as respostas de defesa celulares e humorais. A maior parte dos estudos de imunidade de insetos concentra-se na resposta humoral. Entretanto, os hemócitos são também conhecidos por estarem envolvidos nas respostas imunes celulares contra muitos tipos de microorganismos. Inicialmente, nós caracterizamos os hemócitos dos mosquitos Aedes aegypti e Aedes albopictus revelando seis diferentes subpopulações celulares: prohemócito, adipohemócito, granulócito, plasmatócito, oenocitóide e trombocitóide. Nós demonstramos que estes mosquitos têm aproximadamente 3.000 hemócitos/μl de hemolinfa e eles exibem diversos padrões no reconhecimento de diferentes lectinas (Bandeiraea simplicifolia, Canavalis ensifonnis, Helix pomatia, Arachis hypogea, Ulex europaeus, Triticum vulgaris, Limulus polyphemus, Ricinus communis).

Os ensaios de endocitose demonstraram que, em A. albopictus, o granulócito e o plasmatócito apresentaram atividade fagocítica contra as partículas de látex. Além disso, nestas células e no oenocitóide foi observada a presença de diversos lisossomos através da utilização de anticorpos específicos. Em A. aegypti, o prohemócito, o granulócito e o oenocitóide foram os tipos celulares que endocitaram a albumina. Entretanto, o plasmatócito e o oenocitóide foram as células marcadas como possuindo lisossomos. Os estudos de interação do A. aegypti com Dengue virus demonstraram que no 5º e 7º dia após a alimentação oral houve um aumento significante no número total de hemócitos onde os plasmatócitos, oenocitóides e granulócitos foram os tipos celulares que aumentaram neste período. Os estudos por microscopia exibiram alterações morfológicas características nos plasmatócitos e nos oenocitóides de A. aegypti devido à presença do vírus na hemolinfa. Entretanto, os plasmatócitos, oenocitóides e granulócitos estão hábeis para endocitar os vírus, como demonstrado pela imonumarcação específica visualizada na microscopia confocal.

Ultra-estrutura dos hemócitos de Aedes aegypti (Linnaeus, 1762) (Diptera, Culicidae) / Hemocytes ultrastructure of Aedes aegypti

O sucesso dos insetos em explorar diversos ambientes é devido, em grande parte, à habilidade em se defender contra patógenos e parasitas. Nos insetos, os principais mecanismos de defesa são desempenhados pelos hemócitos. A classificação dos tipos de hemócitos presentes na hemolinfa ainda é bastante controversa. A biodiversidade desses organismos tem proporcionado modelos importantes para o estudo de suas estratégias antimicrobianas, as quais podem fornecer informações relevantes para o combate a diversas doenças, bem como para o estudo da imunologia geral. O objetivo do presente estudo foi caracterizar a resposta imune celular de Aedes aegypti sob o ponto de vista morfológico, funcional e ultra-estrutural através da microscopia óptica e eletrônica de transmissão. Em nossos estudos identificamos seis tipos morfológicos de hemócitos circulantes na hemolinfa de Ae. aegypti através da microscopia de luz, eletrônica de transmissão e contraste de interferência diferencial, são eles: prohemócitos, adipohemócitos, granulócitos, plasmatócitos, oenocitóides e trombocitóides. Os prohemócitos foram as menores células encontradas na hemolinfa. Sua principal característica é a presença de um citoplasma ocupando uma pequena área em torno do núcleo. Os adipohemócitos foram os mais abundantes tipos celulares presentes e exibiam grandes inclusões lipídicas preenchendo praticamente todo o citoplasma. Os granulócitos possuem um citoplasma contendo diversos grânulos elétron-densos. Os plasmatócitos exibiram morfologia bastante polimórfica e diversos filopódios e pseudópodes. Os oenocitóides possuem citoplasma homogêneo com poucas organelas. Os trombocitóides são raros e possuem características similares aos oenocitóides com organelas pouco desenvolvidas. Os hemócitos responsáveis pela resposta imune contra partículas de látex conjugadas a FITC foram identificados através da microscopia laser confocal, assim como as lectinas que marcam os hemócitos. Os granulócitos foram as únicas células envolvidas na fagocitose de alvos abióticos in vitro e in vivo. As lectinas BSI, ConA, HPA, LCA, PNA, UEA e WGA marcaram os hemócitos com variações na intensidade. A WFA e LPL não marcaram hemócitos de Ae. aegypti .