Técnica de separação da membrana de Descemet para transplante de células endoteliais da córnea: estudo experimental em coelhos / Technique for separating Descemet membrane for corneal endothelial cells transplantation: experimental study in rabbits

OBJETIVO: Avaliar a porcentagem de dano endotelial induzido por uma técnica cirúrgica para a separação da membrana de Descemet contendo endotélio sadio, analisar a viabilidade e eficácia desta técnica, e avaliar a porcentagem de dano endotelial causado pela inversão da córnea em câmara anterior artificial. MÉTODOS: As córneas de três grupos de 12 coelhos da linhagem Nova Zelândia foram avaliadas. O grupo 1 foi usado como controle; portanto, as córneas foram analisadas após coletadas e trepanadas. O grupo 2 foi analisado após a inversão da córnea (endotélio para cima na posição convexa), montada em câmara anterior artificial, para o cálculo da porcentagem do dano endotelial induzido por esta inversão. O grupo 3 foi avaliado após a separação entre a membrana de Descemet e o estroma com o uso de substância viscoelástica em córneas invertidas e montadas em câmara anterior artificial. O dano endotelial foi avaliado por meio de fotografias digitais tiradas no microscópio após impregnar o endotélio com vermelho de alizarina. Amostras do grupo 3 foram processadas para avaliação histopatológica. RESULTADOS: O grupo 3 (separação viscoelástica) apresentou um índice de lesão celular endotelial de 10,06 por cento, o grupo 2 apresentou um índice de 3,58 por cento e o grupo controle um índice de 0,18 por cento de lesão celular endotelial (p<0,05). A avaliação histológica das córneas do grupo 3 revelou que aproximadamente 120 µm de espessura estromal manteve-se aderido à membrana de Descemet. CONCLUSÃO: Esta técnica deve ser melhor investigada, pois é uma alternativa viável e eficaz de separação da membrana de Descemet para transplante celular endotelial, já que o porcentual de dano celular induzido é de 10,06 por cento. A porcentagem de dano celular causado pela inversão da córnea em câmara anterior artificial foi de 3,58 por cento.

PURPOSE: To evaluate the percentage of endothelial cell damage induced during a surgical technique of Descemet's membrane separation containing healthy endothelium, analyze the viability and efficacy of this technique, and evaluate the percentage of endothelial cell damage caused by inversion of the cornea on an artificial anterior chamber. METHODS: The corneas from three groups of 12 New Zealand rabbits were evaluated. The Group one was used as the control, so the corneas were analyzed after collected and trephinated. The Group two was analyzed after inversion of the cornea (endothelial side up at a convex shape) mounted on an artificial anterior chamber to calculate the percentage of endothelial cell damage caused by this inversion. The Group three was evaluated after the separation between the Descemet's membrane and the stroma using viscoelastic substance in corneas inverted and mounted on an artificial anterior chamber. The endothelial cell damage was analyzed by digital photographs taken under a microscope after staining the endothelium with alizarin red. Group three samples were processed for histologic evaluation. RESULTS: The Group three (viscoelastic separation) showed an index of endothelial cell damage of 10.06 percent, the Group two showed an index of 3.58 percent and the control group an index of 0.18 percent of endothelial cell damage (p<0.05). Histological evaluation of the Group three corneas revealed that approximately a 120 µm thickness of stroma remained attached to the Descemet's membrane. CONCLUSION: This technique should be better investigated because it is a viable and efficient alternative of Descemet's membrane separation for endothelial cells transplantation, since the percentage of induced cell damage is 10.06 percent. The percentage of endothelial cell damage caused by inversion of the cornea on an artificial anterior chamber was 3.58 percent.

Tomografia de coerência óptica na avaliação da camada de fibras nervosas peripapilar nos usuários de cloroquina / Optical coherence tomography to evaluate peripapillary retinal nerve fiber layer in chloroquine patients

OBJETIVO: Analisar a camada de fibras nervosas nos usuários de cloroquina com a tomografia de coerência óptica (OCT). MÉTODOS: A espessura da camada de fibras nervosas foi mensurada pelo Stratus OCT® através do protocolo scan rápido da camada de fibras nervosas em 94 olhos de 48 pacientes usuários de cloroquina a pelo menos um ano e sem alteração macular aparente. A dose cumulativa e dose diária máxima (mg/kg/dia) e o tempo de uso da cloroquina foram correlacionadas com a espessura da camada de fibras nervosas. Os dados formam comparados com um grupo controle de 30 pacientes não usuários de cloroquina. Todos os pacientes foram submetidos a um exame oftalmológico completo incluindo medida da acuidade visual, refração, pressão intraocular, fundoscopia, retinografia e medida da escavação de papila. RESULTADOS: Comparação entre a média da espessura da camada de fibras nervosas entre usuários do antimalárico (107,60 ± 13,25 µm) e o grupo controle (99,05 ± 13,08 µm) teve uma associação estatisticamente significativa (p=0,0137). Também foi encontrada essa associação entre os quadrantes temporal, superior e inferior da camada de fibras nervosas peripapilar dos dois grupos. Ao analisar a camada de fibras nervosas através das 12 h do relógio detectou-se pelo menos um defeito focal em mais de 50 por cento dos usuários da medicação. Nos pacientes com o defeito focal foi observado uma relação com a dose diária máxima (p=0,0120). CONCLUSÃO: A tomografia de coerência óptica demonstrouse eficaz na detecção da diminuição da camada de fibras nervosas em usuários de cloroquina sem alterações fundoscópicas aparentes. Dessa forma, a tomografia de coerência óptica pode contribuir para o diagnóstico mais precoce da retinopatia por cloroquina.

PURPOSE: To evaluated the retinal nerve fiber layer in chloroquine patients with optical coherence tomography (OCT). METHODS: Nerve fibers layer thickness was measured by a proprietary OCT Stratus® through the fast retinal nerve fiber layer protocol in ninety-four eyes of 48 patients exposed to chloroquine for at least one year with no apparent macular disorder. Cumulative dose, maximum daily dose (mg/kg/day) and time of chloroquine use were correlated with the retinal nerve fiber layer thickness. Data were compared with a control group of 30 patients who did not use chloroquine. All patients underwent a complete ophthalmologic examination including visual acuity, refraction, intraocular pressure, fundoscopy, angiography and measurement of cup-to-disc ratio. RESULTS: The average thickness of retinal nerve fiber layer between antimalaric users (107.60 ± 13.25 µm) and the control group (99.05 ± 13.08 µm) had a statistically significant difference (p=0.0137). Furthermore, a positive association of the peripapillary thickness measurements between temporal, upper and lower quadrants of both groups was found. Twelve clock hours retinal nerve fiber layer analysis detected at least one focal defect in more than 50 percent of the medication users. Particularly, a statistical correlation with the maximum daily dose was found in patients with focal defects (p=0.0120). CONCLUSION: Optical coherence tomography is effective in detecting nerve fiber layer loss in chloroquine patients without apparent fundus changes. Thus, optical coherence tomography may contribute to the early diagnosis of chloroquine retinopathy.