Status of allele frequency and diversity of Plasmodium falciparum msp1, msp2 and glurp before implementation of an artemisinin-based combined therapy in Northwestern Colombia / Estado de la frecuencia alélica y la diversidad de Plasmodium falciparum msp1, msp2 y glurp antes de la implementación de terapia combinada con artemisina en el Noroccidente de Colombia

Introduction: The status of msp1, msp2 and glurp allele frequency and the diversity of Plasmodium falciparum in Northwestern Colombia before the implementation of an artemisinin-combined therapy have been explored only by a few authors and in a relatively small number of samples from this highly endemic region. Objective: To evaluate the frequency of msp1, msp2, and glurp alleles and the diversity of P. falciparum in two Colombian regions before the use of an artemisinin-combined therapy. Methods: This study was part of a major anti-malarial efficacy trial designed as a random, clinically-controlled study for which 224 subjects were recruited. Region 2 of msp1 and msp2 (central region) were amplified by a nested PCR; glurp (region R2) was amplified by a semi-nested PCR. Results: For msp1, five genotypes were observed, representing the K1, MAD20, and RO33 allelic families. All samples corresponded to a MAD20 150 bp allele. For msp2 (IC family), two alleles were detected and for glurp, eight were observed. A total 33 haplotypes were detected. Conclusions: Analysis of glurp can be used to successfully genotype parasite populations in the new studies in Colombia aimed at exploring Plasmodium spp population dynamics. In addition, analysis of msp1 and msp2 can also be of value for comparisons with past studies, but not when the objective is to study parasites obtained from the same patient in a reduced period of time; for instance, during treatment efficacy studies.

Introducción: La frecuencia alélica y la diversidad de msp1, msp2 y glurp de Plasmodium falciparum en el Noroccidente de Colombia antes de la introducción de la terapia combinada con artemisinina, han sido exploradas por pocos autores y en números relativamente bajos de muestras clínicas de esta región de alta endemicidad. Objetivo: Evaluar la frecuencia alélica y la diversidad de msp1, msp2 y glurp de P. falciparum en dos regiones colombianas antes del uso de la terapia combinada con artemisinina. Métodos: El estudio fue parte de un ensayo mayor sobre la eficacia de la terapia antimalárica con un diseño clínico aleatorio controlado, en el cual 224 sujetos fueron reclutados. La región 2 de msp1 y msp2 (región central) se amplificaron por medio de una PCR anidada; glurp (región RII) fue amplificada con una PCR semi-anidada. Resultados: En msp1, se observaron 5 genotipos que representaron las familias alélicas K1, MAD20, y RO33. Todas las muestras correspondieron al alelo 150 bp de MAD20. En msp2 (familia IC), se detectaron 2 alelos y en glurp, se observaron 8. Un total de 33 haplotipos fueron detectados. Conclusiones: El análisis de glurp puede ser utilizado para genotipificar exitosamente poblaciones parasitarias en nuevos estudios en Colombia con el objeto de explorar la dinámica de las poblaciones de Plasmodium spp. Adicionalmente, el análisis de msp1 y msp2 puede también ser de valor para comparar con estudios pasados, pero no cuando el objetivo es estudiar parasitos obtenidos de un mismo paciente en un periodo reducido de tiempo, por ejemplo, durante estudios de eficacia terapéutica.

Malaria mixta: revisión general / Mixed malaria: overview Background

Introducción: los aspectos clínico-epidemiológicos de la infección plasmodial mixta y la malaria mixta se conocen poco; en América es casi nula la información. Objetivo: revisar y resumir la información sobre infección plasmodial y malaria mixta. Metodología: búsqueda de información en Pubmed y Lilacs con diferentes expresiones. Resultados y conclusiones: la información específica recuperada fue escasa, dispersa y difícil de hallar. La infección plasmodial y malaria mixta con frecuencia variable pero relativamente alta, se subestima al usar microscopía de luz. Es frecuente la aparición de una especie plasmodial luego del tratamiento exitoso de la infección por otra especie. Las coinfecciones plasmodiales son mutuamente supresivas, con P. falciparum dominando a P. vivax y este atenuando la gravedad de la infección por P. falciparum. El cuadro clínico y la parasitemia de cada especie en la infección plasmodial y malaria mixta no están suficientemente estudiados y su comportamiento epidemiológico es muy variable en función de la intensidad y la estabilidad de la transmisión, la influencia de los ciclos de lluvia, la edad de las personas y la fauna anofelina. No hay bases suficientes para orientar el tratamiento de la infección plasmodial y malaria mixta, pero se sugiere que debe darse tratamiento simultáneo para las diferentes especies.

Mixed malaria: overviewBackground: clinical and epidemiological aspects of mixed plasmodial infection and mixed malaria are poorly understood; in America this information is almost absent. Objective:review information about mixed plasmodial infection and mixed malaria and collect and organize Colombian data. Methodology: different expressions were used to find information in PubMed and Lilacs. Results and conclusions: information retrieved was little, dispersed and difficult to find. Mixed plasmodial infection and mixed malaria frequency is variable and relatively high but is underestimated by microscopy. New plasmodial species often is detected after successful treatment of other species. Plasmodial coinfections are mutually suppressive; P. falciparumdominating on P. vivax and P. vivax attenuating severity of P. falciparum. Clinical and parasitemia of each species in mixed plasmodial infection and mixed malaria are not sufficiently studied; its epidemiological behavior is very variable and depends on transmission intensity and stability, rain cycles, age of patients and anopheline fauna. There is insufficient basis to guide the mixed plasmodial infection and mixed malaria treatment, but it is suggested a simultaneous treatment of the different species.

Contribución de las causas de muerte evitable a la esperanza de vida en el Valle de Aburrá sin Medellín (Colombia) / Contribuição das causas de morte evitável à esperança de vida no Vale de Aburrá sem Medellín (Colômbia) / Preventable death causes contribution to life expectancy in the Valle de Aburra without Medellin (Colombia)

Objetivo. Describir la contribución de las causas de muerte evitable a la esperanza de vida en los municipios del Valle de Aburrá sin Medellín entre 1979 y 2004. Metodología. Las causas de muerte se clasificaron según el Inventario de Causas de Mortalidad Evitable. Para el cálculo de la esperanza de vida y su descomposición se estandarizaron las tasas según la población de Colombia 2005 del DANE. En la descomposición de la esperanza de vida se siguió el método de Arriaga. Resultados. En el Valle de Aburrá sin incluir Medellín, la esperanza de vida al nacer para los años 1979-2004 fue de 73.23 años. Para el período 1979- 1995, se perdieron 15.30 años de esperanza de vida, siendo la pérdida de 12.58 años de 1996-2004. Se destacó que las causas de muerte prevenibles relacionadas con la vacunación en las mujeres (0.0105 años) fueron relevantes por su aporte negativo a los años de esperanza de vida ganados. Conclusión. La estructura de mortalidad evitable del Valle de la Aburrá sin Medellín se afectó principalmente por las enfermedades constituyentes de los grupos de vacunación o tratamiento preventivo. Es necesario priorizar intervenciones en salud pública en las enfermedades con más alto aporte de los grupos de vacunación o tratamiento preventivo con el fin de evitar un cambio negativo significativo en los perfiles de mortalidad de los municipios y conocer cómo afectan la estructura de la mortalidad por causas y cómo ellas definen perfiles de mortalidad específicos.

Objective. To describe the contribution of preventable death causes to life expectancy in the Valle de Aburra municipalities without Medellin between 1979 and 2004. Methodology. Death causes were classified according to the inventory of Avoidable mortality Causes. For life expectancy calculations and its decomposition, rates were standardized according to DANE’s 2005 Colombian Invest Educ Enferm 2010;28(3) / 455 population. Arriaga’s method was followed in life expectancy decomposition. Results. In the Valle de Aburra not including Medellin, life expectancy at birth for the years 1979-2004 was of 73.23 years. 15.30 years of life expectancy were lost for the period between 1979 and 1995, loss being of 12.58 years for the period between 1996 and 2004. It was stressed that preventable death causes related with vaccination in women (0.0105 years) were important for their negative contribution to the gained life expectancy years. Conclusion. Avoidable mortality structure from the Valle de Aburra without Medellin was mainly affected by the vaccination group constituent diseases or preventive treatment. It is necessary to prioritize public health interventions in the diseases with a greater contribution to the to the vaccination groups or preventive treatment to avoid a significantly negative change in the mortality profiles in the municipalities and know how they affect mortality structure by causes and how they define specific mortality profiles.

Objetivo. Descrever a contribuição das causas de morte evitável à esperança de vida nos municípios do Vale de Aburrá sem Medellín entre 1979 e 2004. Metodologia. As causas de morte se classificaram segundo o Inventário de Causas de Mortalidade Evitável. Para o cálculo da esperança de vida e sua decomposição se estandardizaram as taxas segundo a população de Colômbia 2005 do DANE. Na decomposição da esperança de vida se seguiu o método de Arriaga. Resultados. No Vale de Aburrá sem incluir Medellín, a esperança de vida ao nascer para os anos 1979-2004 foi de 73.23 anos. Para o período 1979-1995, perderam-se 15.30 anos de esperança de vida, sendo a perda de 12.58 anos de 1996-2004. Destacou-se que as causas de morte prevenibles relacionadas com a vacinação nas mulheres (0.0105 anos) foram relevantes por seu aporte negativo aos anos de esperança de vida ganhados. Conclusão. A estrutura de mortalidade evitável do Vale da Aburrá sem Medellín se afetou principalmente pelas doenças constituintes dos grupos de vacinação ou tratamento preventivo. É necessário priorizar intervenções em saúde pública nas doenças com mais alto aporte dos grupos de vacinação ou tratamento preventivo com o fim de evitar uma mudança negativa significativo nos perfis de mortalidade dos municípios e conhecer como afetam a estrutura da mortalidade por causas e como elas definem perfis de mortalidade específicos.

Efecto de la infección submicroscópica o policlonal de Plasmodium falciparum sobre la madre y el producto de la gestación: revisión sistemática / Effect of submicroscopic or polyclonal Plasmodium falciparum infection on mother and gestation product: systematic review

ANTECEDENTES: La malaria gestacional es causa importante de morbi-mortalidad materno-infantil y puede transcurrir con parasitemias no detectadas con microscopía; además, por la diversidad genética parasitaria, es común encontrar infecciones policlonales. OBJETIVOS: Conocer la frecuencia de infecciones submicroscópicas (ISM) y/o policlonales (IP) durante la gestación y analizar el impacto que tienen en la presentación clínica y el desarrollo de inmunidad y sus consecuencias en la madre y el producto de gestación. METODOLOGÍA: Se hizo búsqueda en Medline con los términos (MeSH) "pregnancy", "malaria", "PCR", "microscopy", "genotype", "clones". Se seleccionaron los estudios que diagnosticaron la infección por microscopía y PCR. RESULTADOS: Se incluyeron 16 estudios, todos realizados en África. El promedio ponderado (PP) de ISM en el total de mujeres fue del 36 por ciento y según fuese la infección microscópica (IM), submicroscópica o negativa, los PP de anemia materna y bajo peso al nacer (BPN) fueron 51 por ciento, 42 por ciento y 33 por ciento y 19 por ciento, 16 por ciento y 11 por ciento, respectivamente. Con referencia al grupo sin infección, los riesgos (OR) fueron: a) para anemia materna 2,12 en IM y 1,48 en ISM; b) para BPN 1,89 en IM y 1,56 en ISM. El PP de IP fue 75 por ciento y el promedio de clones por muestra fue tres. CONCLUSIONES: Las ISM y policlonales con P. falciparum son muy comunes durante la gestación, pero poco estudiadas y su impacto debe evaluarse en cada región, porque depende de la intensidad y estabilidad de la transmisión, la edad y paridad maternas, entre otras variables, que son influenciadas por las condiciones socioeconómicas y ambientales específicas.

BACKGROUND: Malaria in pregnancy causes substantial maternal and infant morbidity-mortality, even at submicroscopic parasite levels. In addition, the presence of polyclonal infections secondary to high parasite genetic diversity is a common finding. OBJECTIVES: To determine the frequency of submicroscopic and/or polyclonal plasmodial infection during pregnancy and to establish their impact on clinical presentation, immunity acquisition, and consequences on mother and gestation product. METHODS: A search on Medline was performed using key words (MeSH): pregnancy, malaria, PCR, microscopy, genotype, and clones. Studies on plasmodial infection diagnosed by microscopy and PCR were selected. RESULTS: A total of 16 studies were included, all carried out in Africa. The weighted mean (WM) of submicroscopic infection was 36 percent. According to type of infection (microscopic, submicroscopic or negative), the WM of maternal anemia and low birth weight (LBW) were 51 percent, 42 percent, 33 percent, and 19 percent, 16 percent, 11 percent, respectively. Risks (OR), using the negative group as reference, were: a) for maternal anemia 2.12 in microscopic infection and 1.48 in submicroscopic; b) for LBW 1.89 in microscopic and 1.56 in submicroscopic infection. The WM of polyclonal infection was 75 percent and the mean number of clones by sample was three. CONCLUSIONS: Submicroscopic and polyclonal P. falciparum infections during pregnancy are very common, but have been little studied and their impact must be assessed in each specific region because they depend on malaria transmission intensity and stability, maternal age and parity, among other variables, which are influenced by environmental and socio-economic conditions of each region.

Susceptibilidad in vitro de aislamientos colombianos de Plasmodium falciparum a diferentes antimaláricos / In vitro susceptibility of Colombian Plasmodium falciparum isolates to different antimalarial drugs

Introducción. Los estudios de susceptibilidad in vitro de Plasmodium falciparum a los antimaláricos son herramientas importantes para vigilar la utilidad de esosmedicamentos; tales estudios son escasos en Colombia.Objetivo. Evaluar la susceptibilidad in vitro de aislamientos colombianos de P. falciparum a cloroquina (CQ), amodiaquina (AQ), mefloquina (MQ), quinina (QN) yartesunato (AS).Materiales y métodos. Se obtuvieron aislamientos clínicos de P. falciparum en varias regiones colombianas. De cada antimalárico se probaron siete diluciones dobles seriadas, por duplicado, con la técnica HRP-2 y las cepas FCB2 (cloroquina-resistente) y NF54 (cloroquina-sensible) como controles. Se utilizaron IC50>100, 80, 64, 500 y 10,5 nM como puntos de corte para clasificar la resistencia a CQ, AQ, MQ, QN y AS, respectivamente. Resultados. Veninticinco aislamientos evaluados (72 por ciento Urabá, 8 por ciento Bajo Cauca, 20 por ciento costa Pacífica). Las IC50 promedio de CQ, AQ, MQ, QN y AS fueron 422,9; 131,4; 56,3; 269,7 y 1,88 nM, respectivamente, y la proporción de aislamientos resistentes fue, en el mismo orden, 76 por ciento, 16 por ciento, 32 por ciento, 24 por ciento y 4 por ciento. Conclusiones. La baja sensibilidad a CQ concuerda con otros estudios in vitro y con la baja eficacia terapéutica in vivo. Aunque 96 por cientoR de los aislamientos fueron sensibles a AS, este y otros estudios han observado aislamientos con sensibilidad disminuida a artemisininas (IC50>10,5 nM), lo que sugiere que el uso indiscriminado de estos medicamentos pone en riesgo su efectividad y podría dejarnos sin opciones para el tratamiento de la malaria por P. falciparum.

Hemozoína intraleucocitaria como indicador de malaria complicada por Plasmodium falciparum / Intraleucocytic hemozoine as an indicator of malaria complicated by Plasmodium falciparum

Objetivo: evaluar la relación entre la presencia y cantidad de leucocitos con hemozoína (pigmento malárico) en sangre periférica y la gravedad malárica.Diseño: estudio descriptivo y transversal.Sujetos: 183 individuos distribuidos en cuatro grupos: 25 individuos sanos, seis pacientes con alteraciones hematológicas y hemólisis, 25 pacientes con enfermedades diferentes a malaria y sin hemólisis y 127 pacientes con malaria por Plasmodium falciparum (64 no complicados y 63 complicados).Mediciones: se realizó recuento de 100 polimorfonucleares neutrófilos (PMN) y 60 mononucleares (MN) en extendidos de sangre periférica usando microscopio de luz, para determinar la presencia de leucocitos con hemozoína.Resultados: el 35 porciento (44/127) de los pacientes maláricos presentaron células con hemozoína y el 25 porciento (32/127) tenían PMN positivos. Se observó una asociación estadísticamente significativa entre malaria complicada y presencia de PMN positivos. En forma similar, se observó una correlación lineal positiva entre la cantidad de PMN positivos y parasitemia (r=0.57; p<0.05 ). No se encontró asociación significativa entre la presencia de MN con hemozoína y complicación malárica. En ninguna de las 56 personas sin malaria se hallaron células con hemozoína.Conclusiones: aunque la frecuencia de pacientes con células positivas para hemozoína en nuestro medio es baja (35 porciento= 44/127), se puede concluir que existe una fuerte asociación entre malaria complicada y la presencia de PMN con hemozoína; por tanto, estos hallazgos sugieren que la presencia de dichas células en extendido de sangre periférica constituyen un signo de alerta y, en consecuencia, en estos casos se debe realizar una evaluación minuciosa del paciente con malaria.

Gametocitemia de Plasmodium falciparum según la respuesta terapéutica a sulfadoxina-pirimetamina y cloroquina en dos municipios de Antioquia, Colombia / Gametocyte levels in response to differing malaria treatments in two municipalities of Colombia

Se ha informado que el número de gametocitos circulantes de Plasmodium falciparum está influenciado por aspectos como el nivel de endemicidad de la zona, la clase de esquizonticidas sanguíneos usados y la respuesta terapéutica a ellos. En Colombia son muy pocos los trabajos que han evaluado estas relaciones. Mediante un diseño experimental, se evaluó la gametocitemia (variable efecto) en función del nivel endémico de dos municipios de Antioquia, del tratamiento (sulfadoxina-pirimetamina y sulfadoxina-pirimetamina más cloroquina) y de la respuesta terapéutica (adecuada y fallida). Se estudiaron 148 pacientes con malaria por P. falciparum no complicada. La gametocitemia varía en función del tiempo de padecimiento de la malaria actual (mayor en Turbo que en Zaragoza) y esta variable debe controlarse para eliminar la aparente diferencia en las gametocitemias por municipio. No se hallaron diferencias estadísticamente significativas en la gametocitemia (porcentaje de pacientes con gametocitos circulantes y cantidad de ellos por microlitro) según el tratamiento y la respuesta terapéutica, aunque los niveles de gametocitos son mayores en los pacientes tratados sólo con sulfadoxinapirimetamina, respecto a quienes recibieron sulfadoxina-pirimetamina más cloroquina. Tampoco hubo diferencias en la gametocitemia según el sexo ni la edad de los pacientes, ni se halló correlación de ella con la parasitemia asexual. La diferencia en el nivel de gametocitemia encontrada entre los municiios de Turbo y Zaragoza parece estar influida por el tiempo transcurrido entre el inicio de los síntomas y la instauración del tratamiento.

Plasmodium falciparum gametocyte levels are influenced by level of regional endemicity, the antimalarial treatment, and the therapeutic response of patients. Few previous studies have related these factors in Colombia. Here, gametocytaemia was evaluated with respect to two treatment schemes (sulfadoxine/pyrimethamine and sulfadoxine/pyrimethamine plus chloroquine), the patient response (adequate or failure), and the locality (two areas of varying case frequency). One hundred forty-eight residents of Turbo and Zaragoza (Antioquia), all with uncomplicated malaria, were evaluated. The gametocytaemia and the rates of clinical malaria at the beginning of treatment were greater in Turbo than in Zaragoza. No statiscally significant differences in the gametocytaemia by treatment schemes or therapeutic responses were noted, although the patients who received SP had more gametocytes than those treated with SP+CQ. Gametocytaemia was not correlated with asexual parasitemia or sex and age of patient. The difference in the level of gametocytaemia between Turbo and Zaragoza appears to be influenced by the time elapsed between the appearance of symptoms and the beginning of treatment.