RESUMO
ABSTRACT Background: Sporotrichosis, a cosmopolitan mycosis caused by dimorphic fungi of the Sporothrix complex, affects humans and animals. This study aimed to develop new molecular markers for Sporothrix genome detection in biological samples using PCR. Methods: A specific region of DNA sequences from the Sporothrix genus, publicly available in GenBank, was chosen for primer design. After testing the in silico specificity of these primers, in vitro specificity was evaluated using the PCR technique. Results: Three specific primers with 100% specificity for the Sporothrix genus were generated. Conclusions: PCR using the designed primers can be used to develop molecular diagnostics for sporotrichosis.
RESUMO
Introdução: a aspergilose invasiva (IA) é uma infecção fúngica grave causada por espécies do gênero Aspergillus e acomete principalmente pacientes leucêmicos,diabéticos e aqueles receptores de transplante de células-tronco, que apresentem neutropenia. Os esporos dos fungos que colonizam o epitélio pulmonar podem invadir as células endoteliais de revestimento e o acesso vascular e, assim, disseminar-se paraoutros órgãos através do sangue. A elevada mortalidade da doença está relacionada à imunossupressão grave, à rápida progressão da infecção e, principalmente, à ausência de um diagnóstico precoce e eficiente. Portanto, o diagnóstico na fase inicial da infecção é adequado, proporcionando uma terapia mais eficaz, o que pode reduzir a taxa de mortalidade da doença. Objetivo: o presente estudo teve em vista avaliar a aplicabilidadeda técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) no auxílio do diagnóstico de AI, em comparação com os resultados gerados pelo ensaio imunoenzimático de galactomanana (EIA-GM®), este já validado comercialmente. Métodos: foram analisadas 245 amostras de pacientes tratados no hospital Santa Casa de Belo Horizonte. Entre essas amostras, 16% (N = 39) foram positivos nos testes EIA-GM®. Em seguida, essas 39amostras positivas foram analisadas pela técnica de PCR. Resultados: de acordo com os resultados, a técnica de PCR apresentou taxa de 97,44% de sensibilidade, 97,96% de acurácia e 100% de especificidade, quando comparada ao método EIA-GM®. Conclusão:a técnica de PCR pode auxiliar no diagnóstico da AI, sempre associando os seus resultados à clinica do paciente e aos testes de imunoensaios.
Introduction: invasive aspergillosis (AI) is a serious fungal infection caused by species of the genus Aspergillus that primarily affects leukemic and diabetic patients and those recipients of stem cell transplants, which have neutropenia. The fungi spores that colonize the lung epithelium may invade the endothelial cell lining and vascular access and thus, spread to other organs through the blood. The high mortality of the disease is related tosevere immunosuppression, rapid infection progression, and especially lack of an early and efficient diagnosis. Therefore, the diagnosis in the initial infection phase is beneficial,providing a more effective therapy that can reduce the disease?s mortality rate. Objective:this study aimed at evaluating the applicability of the polymerase chain reaction (PCR) cheganin assisting the diagnosis of AI compared to the resultsgenerated by galactomannan enzyme immunoassay (EIA-GM®) that is already commercially validated. Methods: 245 samples from patients treated in the Santa Casa de Belo Horizonte hospital were analyzed. Among these samples, 16% (N = 39) were positive in EIA-GM®tests. Subsequently, these 39 positive samples were analyzedby PCR. Results: According to the results, the PCR technique showed 97.44% sensitivity, 97.96% accuracy, and 100% specificity compared to EIA-GM®. Conclusion:the PCR technique may aid in the diagnosis of AI,always associating the results to the patient's clinicaland immunoassay tests.