Proposal of an iELISA for Mycoplasma bovis diagnosis in dairy cattle and associated risk factors / [Proposta de um iELISA para diagnóstico de Mycoplasma bovis em bovinos leiteiros e fatores de risco associados]

Mycoplasma bovis is a highly contagious agent associated with several pathologies in cattle. The detection of reactive antibodies to M. bovis by Indirect Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (iELISA) identifies if there was an exposure to the microorganism. The current study aimed to optimize an iELISA from M. bovis total cell antigen, applying it to bovine serum samples, and to evaluate risk factors. Serum samples were obtained from 400 cows from 17 herds from Southeast Brazil. In the optimization of iELISA, the following was established: 2 µg/mL of antigen, sera dilution 1:300, and conjugate dilution 1:15000. The frequency was 62.3% (249/400) of reactive animals and 100% (17/17) of reactive herds. Risk factors were: herds with more than 100 animals (OR= 3.1; CI= 95%); Holstein breed (OR= 72.5; CI= 95%); cows (OR= 29.7; CI= 95%); intensive breeding system (OR= 3.3; CI= 95%); associated small ruminant production (OR= 4.4; CI= 95%); milk production above 500L (OR= 2.9; CI= 95%); no quarantine (OR= 1.5; CI= 95%); mechanical milking (OR= 5.5; CI= 95%) and cases of mastitis (OR= 5.5; CI= 95%). The proposed iELISA was able to detect antibodies reactive to M. bovis in bovine serum. Knowledge of these risk factors can assist in the implementation of prophylactic measures.(AU)

Mycoplasma bovis é um agente altamente contagioso relacionado a várias patologias em bovinos. A detecção de anticorpos reativos a M. bovis por Ensaio de Imunoadsorção Enzimática Indireto (iELISA) identifica se houve exposição ao microrganismo. O presente estudo teve como objetivo otimizar um iELISA de antígeno celular total de M. bovis, aplicando-o a amostras de soro bovino, bem como avaliar fatores de risco. Amostras de soro foram obtidas de 400 vacas de 17 rebanhos da Região Sudeste do Brasil. Na otimização do iELISA foram obtidos: 2µg/mL de antígeno, diluição dos soros 1:300 e do conjugado 1:15000. A frequência de animais reativos foi de 62,3% (249/400) e de 100% (17/17) para os rebanhos. Os fatores de risco foram: rebanhos com mais de 100 animais (OR= 3,1; IC= 95%); raça Holandesa (OR= 72,5;IC= 95%); vacas (OR= 29,7;IC= 95%); sistema intensivo (OR= 3,3; C= 95%); produção de pequenos ruminantes (OR= 4,4;IC=95%); produção de leite acima de 500L (OR= 2,9;IC= 95%); sem quarentena (OR= 1,5;IC= 95%); ordenha mecânica (OR= 5,5;IC= 95%) e casos de mastite (OR= 5,5;IC= 95%). O iELISA proposto foi capaz de detectar anticorpos reativos a M. bovis no soro bovino. O conhecimento desses fatores de risco pode auxiliar na implementação de medidas profiláticas.(AU)

Caracterização química e atividade biológica de extratos aquosos de Brunfelsiacuneifolia J. A. Schmidt (Solanaceae) / Preliminary chemical characterization and biological activity of aqueous extracts of Brunfelsia cuneifolia J. A. Schmidt (Solanaceae)

RESUMO O gênero Brunfelsia possui ainda poucas informações a respeito de sua composição química ou confirmações científicas de suas propriedades medicinais, apesar do uso na medicina tradicional pelos povos amazônicos. Este trabalho buscou caracterizar a espécie Brunfelsia cuneifolia, cultivada no estado do Rio Grande do Sul, quanto a sua composição química e atividade biológica. Foram obtidos extratos aquosos a quente, a frio, e por ultrassom, a partir de folhas frescas. A caracterização química realizada por CLAE determinou a presença dos compostos fenólicos: ácido ferúlico e rutina, em todos os extratos, sendo as maiores quantidades apresentadas pela extração a frio. A análise por EMAR identificou a fórmula molecular de nove substâncias nos diferentes extratos, incluindo a presença do alcaloide brunfelsamidina em todos os extratos obtidos. Para a atividade biológica, devido à similaridade de resposta e teor nas diferentes formas de extração, foi possível correlacionar a atividade antioxidante, avaliada através da redução do radical DPPH*, com o teor de compostos fenólicos totais obtidos pelo método de Folin-Ciocalteu. A toxicidade dos extratos avaliada pela utilização de Artemia salina revelou ausência de toxidez. Os resultados obtidos são os primeiros apresentados para a caracterização desta espécie, colaborando também para a pesquisa científica acerca dos usos popularmente atribuídos ao gênero.

ABSTRACT There is still not a lot of information about the Brunfelsiagenus. Its respective chemical composition and possible scientific proofs of its medicinal properties were not deeply researched, even though the use of the species is common in the traditional medicine of Amazonian populations. This study aimed to characterize the Brunfelsia cuneifolia species, grown in the state of Rio Grande do Sul, regarding its chemical composition and biological activity. Hot, cold and ultrasound aqueous extracts of fresh leaves were obtained. The chemical characterization performed by the HPLC determined the presence of phenolic compounds, ferulic acid and rutin in all extracts, with the largest amount presented by the cold extraction method. The HRMS analysis identified the molecular formula of nine substances in different extracts, including the presence of the alkaloid brunfelsamidina in all the extracts. For biological activity, it was possible to correlate the measured antioxidant activity through the reduction of DPPH * with the content of phenolic compounds obtained by the Folin-Ciocalteu method, which exhibited similar response and content in the different forms of extraction. The toxicity of the extracts evaluated through the use of Artemia salina was negative. The obtained results are the first ones presented for the characterization of this species, also contributing to scientific research on the popular applications related to this genus.

Principais alterações no leite por agentes causadores de mastite no rebanho caprino dos estados de Minas Gerais e Rio de Janeiro / Major changes in milk by mastitis causative agents in goat herd from the states of Minas Gerais and Rio de Janeiro, Brazil

A mastite subclínica caprina ocasiona prejuízos econômicos em decorrência do descarte, dos gastos com medidas terapêuticas e da redução da quantidade e qualidade do leite e seus derivados.Nesse estudo, 129 amostras de leite de cabra in natura, provenientes de 11 propriedades foram avaliadas pelo teste da caneca telada, California Mastitis Test (CMT), exame bacteriológico, pesquisa de Mycoplasma spp. e pela determinação dos parâmetros físico-químicos. No teste da caneca telada e no CMT, 3,1% e 4,6% das amostras foram positivas, respectivamente. No exame bacteriológico, 57,4% das amostras foram positivas e o patógeno mais frequente foi Staphylococcus coagulase negativa com 56% das cepas resistentes à penicilina e 100% de sensíveis à gentamicina. Mycoplasma spp. não foi identificado nas amostras. O diagnóstico da mastite subclínica pelo CMT e pelo exame bacteriológico diferiu de forma significativa e não houve associação entre o número de UFC/mL obtidas no exame microbiológico e o resultado do CMT (Qui-quadrado p 0,05). Com base nos resultados obtidos, recomenda-se a associação do exame bacteriológico quando na utilização do CMT para diagnóstico da mastite subclínica caprina.

Major changes in milk by mastitis causative agents in goat herd from the states of Minas Gerais and Rio de Janeiro, Brazil. Goat mastitis causes significant economic losses due to the discarding of milk, costs of drugs and veterinary care, reducing the quantity and quality of milk and dairy products. In this study, 129 raw milk samples from 11 goat farms were investigated by the Tamis test, California mastitis test (CMT), bacteriological exam, presence of Mycoplasma spp. and physicochemical parameters. Seven (4.6%) and four samples (3.1%) were positive by CMT and Tamis test respectively. Bacteriological exam was positive from 57.4% of samples and coagulase-negative Staphylococcus was the most frequent bacteria isolated showing 56% of the strains resistant to penicillin and no resistance to gentamicin. Negative results were obtained from traditional culture as well as by PCR for Mycoplasma spp. The diagnosis of mastitis, the bacteriological exam and the CMT results differed significantly and no association was observed (chi squared, p 0.05). The physicochemical parameters differed significantly (ANOVA, Tukey-Kramer, p < 0.05) among the herds. These results indicate the need to associate microbiological exam when the CMT is used for the diagnosis of goat mastitis.

Detection of caliciviruses associated with acute infantile gastroenteritis in Salvador, an urban center in Northeast Brazil

Acute gastroenteritis caused by viruses is one of the leading causes of infantile morbidity. The aim of the present study was to investigate the presence of human caliciviruses of the genera norovirus and sapovirus in children up to 3 years of age with acute gastroenteritis from low-income communities in the city of Salvador, Brazil. This study is an extension of previous work carried out to establish the profile of the most prevalent enteric pathogens present in these communities. In this report, 139 fecal samples, collected from July 2001 to January 2002 were analyzed by RT-PCR and 13 (9 percent) were positive for human caliciviruses. By sequencing, seven isolates were characterized as norovirus genogroup GII and one as sapovirus genotype GII/1. Sequencing of the previously detected group-A rotaviruses and human astroviruses was also performed and revealed the circulation of rotavirus group A genotypes G1P[8] and G9P[8], and human astrovirus genotypes 6, 7, and 8. No mixed infection was observed. Community-based studies provide geographically representative information on disease burden. However, there are only a few reports in developing countries concerning the genotypes of the most important gastroenteric viruses detected in such communities. The present findings demonstrate the wide diversity of genotypes of the most important viruses responsible for acute gastroenteritis circulating in low-income communities.

Epidemiologia do dengue em Salvador-Bahia, 1995-1999 / Epidemiology of dengue in Salvador-Bahia, 1995-1999

Since 1981, Brazil has registered dengue epidemic and simultaneous circulation of the DEN-1 and DEN-2 serotypes in over 2,700 municipalities. In Salvador- Bahia, located in the Northeastern region of the Country, two epidemic outbreaks occurred in the years of 1995 and 1996, with further endemic spread of the disease. This study analyses the incidence of the virosis within this municipal area, from 1995 to 1999, considering, among other variables, its distribution in the Sanitary Districts and density of Aedes aegypti. Registers of notified cases and the city's Vectorial Control Program were used as data source. The incidence rate of notified cases of dengue in 1995 and 1996, which were 691.4 and 393.5 per 100,000 inhabitants, respectively, decreased to 65 per 100,000 inhabitants in 1998. In the poorer Sanitary Districts, this index reached figures of over 800 per 100,000 inhabitants. The Premise Index for Aedes aegypti reached 54.1% in one of the Districts. Bearing in mind the relevance of the re-emergence of dengue in the world, the authors discuss the possible factors which condition the virus introduction, its epidemiological presentation over the course of four years, and the effectiveness of the vectorial combat (eradication) program.

Desde 1981, o Brasil tem registrado epidemias de dengue de grande magnitude e atualmente circulam simultaneamente dois sorotipos DEN-1 e DEN¾2, em mais de 2.700 municípios. Em Salvador - Bahia, situada na Região Nordeste do país, ocorreram duas epidemias nos anos de 1995 e 1996, e posterior endemização da doença. Este estudo analisa a incidência desta virose nesse município, no período de 1995 a 1999, considerando entre outras variáveis, sua distribuição nos Distritos Sanitários e a situação de densidade do Aedes aegypti. Utiliza como fonte de dados registros oficiais de notificação e do programa de combate vetorial da cidade. A taxa de incidência de dengue foi de 691,4 e 393,5 por 100.000 habitantes, respectivamente, em 1995 e 1996, reduziu-se para 65 por 100.000 em 1998. Nos Distritos Sanitários mais carentes, este indicador alcançou valores superiores a 800 por 100.000 habitantes. O Índice de Infestação Predial pelo Aedes chegou a atingir 54,1% em um dos seus bairros. Considerando a importância da reemergência do dengue no mundo os autores discutem os possíveis fatores que condicionaram a introdução do vírus, as suas apresentações epidemiológicas no curso de 4 anos, e a efetividade do programa de combate vetorial.

Prevalência e intensidade da infecção por parasitas intestinais em crianças na idade escolar na Cidade de Salvador (Bahia, Brasil) / Prevalence and intensity of infection by intestinal parasites in school-aged children in the City of Salvador (Bahia, Brazil)

As part of a major study to evaluate the relationship between environmental changes and occurrence of the infection, prevalence and intensity of infection by intestinal parasites was studied in a sample of school children aged 7 to 14 years living in the City of Salvador. The prevalence of infection by at least one species of protozoa or helminth was 66.1%. Prevalence of infection by helminths increased with age. For all helminth species male children presented the highest prevalence.

Como parte de um estudo para avaliar as relações entre mudanças ambientais e ocorrência de infecções, estudou-se a prevalência e intensidade de parasitas intestinais em uma amostra de crianças em idade escolar, residentes em Salvador. A prevalência de infectados por pelo menos um protozoário/helminto foi 66,1%. A prevalência da infecção por helmintos, se eleva com o aumento da idade das crianças, sendo os meninos mais intensamente infectados.

The effect of Schistosoma mansoni infection on child morbidity in the State of Bahia, Brazil. I - Analysis at the ecological level.

Esta investigacao foi levada a efeito em 10 pequenas cidades do Estado da Bahia (Nordeste do Brasil), escolhidas atraves de um processo amostral. O objetivo foi estudar as correlacoes entre as prevalencias de hepatomegalia e esplenomegalia, em diferentes areas, com a prevalencia e a intensidade da infeccao pelo S. mansoni nas mesmas areas. Nossas conclusoes: sao: a) a morbidade esquistossomotica (prevalencias de hepatomegalia e esplenomegalia) foi diretamente correlacionada com a prevalencia e a intensidade da infeccao; b) a intensidade da infeccao (medida pelo numero de ovos nas fezes) mostrou ser um bom indicador do grau de morbidade, explicando a variacao da morbidade entre as areas melhor que a prevalencia da infeccao; c) a prevalencia de esplenomegalia e o tamanho medio do figado abaixo do rebordo costal na linha medio-esternal sao bom indicadores da prevalencia e da intensidade da infeccao pelo S. mansoni na comunidade. Nossas conclusoes trazem a possibilidade da construcao de equacoes de regressao definitivas entre indicadores de morbidade e indicadores de infeccao, de tal forma que o valor de um possa ser usado para predizer o valor do outro