Phylogenetic analysis of Pneumocystis from pig lungs obtained from slaughterhouses in southern and midwestern regions of Brazil / Análise filogenética de Pneumocystis obtidos de pulmões de suínos provenientes de abatedouros da região sul e centro oeste do Brasil

The Pneumocystis genus is comprised of pathogens dwelling in the lungs of terrestrial, aerial, and aquatic mammals. Occasionally they induce severe pneumonitis, particularly in hosts with severe impairment of the immune system and progressively may fill pulmonary alveolar cavities causing respiratory failure. Molecular genetic studies revealed that Pneumocystis gene sequences present a marked divergence with the host species concerned. In the present study, the genetic diversity of Pneumocystis obtained from lungs of swines was examined by analyzing mitochondrial large subunit (mtLSU) and small subunit (mtSSU) rRNA sequences. The samples were obtained from two slaughterhouses located in two Brazilian states. Phylogenetic analysis demonstrated that genetic groupings within Pneumocystis organisms were in accordance with those of the corresponding hosts and that two clusters were formed. In conclusion, these data show that there are genetically distinct porcine Pneumocystis genotypes with at least two separate clusters in Brazil.

O gênero Pneumocystis compreende patógenos que residem em pulmões de animais terrestres, aéreos e aquáticos. Pode ocasionar uma grave pneumonia, particularmente em hospedeiros com o sistema imunológico seriamente comprometido, o que ocorre por meio de uma progressiva disseminação nas cavidades alveolares, causando insuficiência respiratória. Estudos genéticos, baseados em métodos moleculares, revelaram que as sequências dos genes de Pneumocystis apresentam marcante divergência de acordo com a espécie de hospedeiro. Neste estudo, a diversidade genética das amostras obtidas a partir de pulmões de suínos, provenientes de dois abatedouros localizados em dois estados brasileiros, foi examinada por análise das sequencias dos nucleotídeos dos produtos de PCR dos genes mtLSU e mtSSU do rRNA do Pneumocystis. O resultado confirma a tendência registrada em pesquisas com amostras de outros animais e permite concluir que existem, pelo menos, dois grupos filogenéticos distintos de Pneumocystis de suínos no Brasil.

Porcine circovirus-2 load in the gastrointestinal tract, mesenteric lymph node, tonsil, and feces of wasted pigs with and without diarrhea / Carga viral de circovírus suíno-2 no trato gastrintestinal, linfonodo mesentérico, tonsila e fezes de animais refugo com e sem diarreia

Relata-se a quantificação de PCV-2, por meio de PCR em tempo real, no trato gastrintestinal, linfonodo mesentérico, tonsilas e fezes de nove suínos refugo da fase de crescimento, provenientes de rebanhos com histórico de diarreia não responsiva ao tratamento com antibioticoterapia. Com base nos resultados histopatológicos e imunoistoquímicos, os animais foram classificados como afetados por PCV-2 (n=5) e não afetados (n=4). Foi observada diarreia em todos os animais do grupo afetado por PCV-2. Em todas as amostras testadas foi detectado PCV-2, no entanto, a carga viral observada nos tecidos, bem como a excreção nas fezes foi significantemente maior (P<0.01) nos animais com diarreia. A maior concentração de PCV-2 foi observada nos linfonodos mesentéricos. A carga viral observada em tecido fresco e nas mesmas amostras emblocadas em parafina foi semelhante, sugerindo que o PCR em tempo real pode ser uma ferramenta útil em estudos retrospectivos da infecção por PCV-2.

Salmonella enterica: isolamento e soroprevalência em suínos abatidos no Rio Grande do Sul / Salmonella enterica: isolation and seroprevalence in swines slaughtered in Rio Grande do Sul

Estudou-se a prevalência de Salmonella spp. em suínos ao abate e compararam-se os resultados obtidos no isolamento e na sorologia de modo a determinar a fase mais importante de infecção (granja ou transporte/espera pré-abate) em relação ao número de suínos portadores encontrados ao abate. Foram avaliados 40 rebanhos de três diferentes empresas do sul do Brasil, com colheitas de sangue e linfonodos mesentéricos de 20 animais por lote. O soro foi submetido ao ELISA produzido com antígeno somático de Salmonella Typhimurium. A frequência de isolamento variou de 62,5 por cento a 85,0 por cento, enquanto a soroprevalência de 73,8 por cento a 83,2 por cento nos três sistemas amostrados. Os sorovares mais prevalentes foram Agona, Typhimurium e Panama. A infecção dos animais ocorreu nas granjas produtoras de suínos nestes sistemas de produção, pois os lotes apresentaram elevada soroprevalência ao abate. Concluiu-se que o controle da infecção por Salmonella spp. no sul do Brasil deve iniciar-se pela implementação de medidas de profilaxia nas granjas de produção de suínos.

The prevalence of Salmonella in slaughtered swines was evaluated and the results of serology and Salmonella isolation were compared to determine the most important stage of the infection (on-farm or transport and pre-slaughter) in relation to the number of carrier animals found at slaughter. Forty herds from three different swine raisers of the southern region of Brazil were sampled at slaughter. Blood and mesenteric lymph nodes were collected from 20 swines of each herd. Serum samples were submitted to ELISA including somatic antigens of S. Typhimurium. Salmonella was isolated from 62.5 percent to 85.0 percent of the animals, while seroprevalence varied from 73.8 percent to 83.2 percent in the three swine raisers. Serovar Agona, Typhimurium, and Panama were the most prevalent among the Salmonella isolates. Isolation and serological results demonstrated that Salmonella infection occurred during the on-farm stage, since a high seroprevalence was detected at slaughter. It was concluded that a Salmonella control program in southern Brazil must be started with the implementation of intervention measures at farm level.

Comparaçäo de métodos de isolamento de bactérias NAD-dependentes do trato respiratório superior de suínos sadios / Methods to isolate NAD-dependent bacteria from the upper respiratory tract of health pigs

Secreçöes nasais, tonsilares e tecido tonsilar foram coletados de 67 leitöes de 9 a 15 semanas de idade, provenientes de três rebanhos positivos para Actinobacillus pleuropneumoniae (App), e de 50 leitöes provenientes de dois rebanhos, negativos. Foram classificados como positivos aqueles rebanhos com isolamento prévio de sorotipos 3, 5 e 7 e rebanhos negativos aqueles submetidos a controle veterinário, sem notificaçäo de sintomas clínicos, lesöes de pleuropneumonia suína e sem isolamento do agente. O material coletado foi submetido a três diferentes métodos de cultivo: 1- semeadura direta em meio de cultivo sólido seletivo; 2- diluiçäo em caldo seletivo seguido de subsemeadura em meio de cultivo sólido seletivo; 3- diluiçäo em caldo seletivo seguido de subsemeadura em ágar sangue. Entre as amostras NAD-dependentes recuperadas 86 foram classificadas como App, 13 como grupo minor e 21 como grupo taxon (C, D, E e F). Dos rebanhos positivos foram recuperadas quatro amostras de App (sorotipos 3, 7 e 12) e 51 näo sorotipificáveis. Dos rebanhos negativos foram recuperadas 31 amostras de App näo sorotipificáveis, indicando que o App faz parte da flora normal do trato respiratório superior dos suínos. O melhor método de isolamento de amostras NAD-dependentes de leitöes portadores foi da biópsia de tecido tonsilar semeado diretamente em meio sólido seletivo (PPLO ágar adicionado de 2 mica grama de cristal violeta, 10 mica grama NAD, 1 mica grama de lincomicina, 1,4 mica grama de bacitracina por ml)

Utilizaçäo de um teste de ELISA polivalente para detecçäo de anticorpos contra Actinobacillus pleuropneumoniae (App) / Utilization of a polyvalent ELISA test for detection antibodies against of Actinobacillus pleuropneumoniae

Um teste de ELISA polivalente baseado em lipopolissacarídeos de cadeia longa (LPS - CL) de Actinobacillus pleuropneumoniae (App) sorotipos 3, 5 e 7 foi avaliado testando-se amostras do soro de leitöes e matrizes provenientes de 10 rebanhos positivos e de 10 rebanhos negativos. Foram classificados como positivos aqueles rebanhos com isolamento prévio do App sorotipos 3, 5 ou 7 e rebanhos negativos aqueles submetidos ao controle veterinário, sem notificaçäo de sintomas clínicos, sem lesöes de pleuropneumonia suína e sem isolamento do agente. Todos os rebanhos positivos apresentaram sorologia positiva e as matrizes apresentaram maior número de soroconversores (P<0,05) do que os leitöes. Entre os rebanhos negativos quatro apresentaram sorologia negativa, cinco sorologia positiva com valores preditivos altos (96 a 99 por cento) e um com valor preditivo considerado baixo (56 por cento). O teste apresentou 100 por cento de sensibilidade e aparentemente baixa especificidade, porém, como detectou os sorotipos prevalentes no Brasil e sorotipos que possuem LPS - CL homólogos (3, 4, 5, 6, 7 e 8), ele é aplicável somente como teste de triagem