Contribution to the laboratory diagnosis of human cryptosporidiosis

Human cryptosporidiosis is an infection caused by Cryptosporidium spp, a coccidial protozoan of emergencial pathogenicity and responsible for severe and prostrating watery diarrhea, mainly in immunocompromised patients. Smears of stools submitted to concentration and staining by carbol fuchsin technique has been used in our laboratory as a diagnostic procedure for cryptosporidiosis. The long time observing the smears in the microscope due to the small size of the forms and the low contrast of the staining led us to introduce some modifications in the original protocol for the acid-fast staining. The smears were treated with the carbol fuchsin solution for 3 minutes as recommended by LENNETTE et al., 1985 and the solution of the ethyl alcohol 70 percent-chloride acid 0.5 percent was used instead of the ethyl alcohol-sulfuric acid 5 percent recommended by HENRIKSEN & POHLENZ, 1981. Smears were treated with the discoloration solution for 2 minutes. These modifications promoted a better washing out of the excess of carbol fuchsin therefore increasing the dye efficiency. In such conditions, the visualization of protozoan oocysts on the slides examined became easier. They were observed by the contrast of their intense pink-reddish pigmentation against the blue background. It's worthwhile to emphasize that these modifications offer advantages when time and accuracy are concerned

Sexual distinction between 5th instar nymphs of six species of Triatominae (Hemiptera, Reduviidae)

The aim of this paper is to present the analysis of sexual morphological differences observed in 5th instar nymphs of the following species: Panstrongylus megistus; Rhodnius neglectus; Triatoma brasiliensis; T. infestans; T. matogrosensis and T. tibiamaculata. Male and female nymphs were examined and photographed with a Scanning Electron Microscope. The 9th segment dimensions of dorsal and ventral faces were determined through a Profile Projector. Results and statistical analysis showed significant differences: the 9th sternite is significantly broader in male than female nymphs, while in five species; tergites in female nymphs are broad and in male are narrow

Estudo da atividade de extratos vegetais sobre o desenvolvimento de Trypanosoma cruzi em meio líquido de Warren / On the activity of plant extracts in the development of Trypanosoma cruzi in Warren's medium

Para se verificar a açäo inibitória sobre o desenvolvimento de Trypanosoma cruzi - amostra Y - cultivado em meio de Warren, testaram-se 103 extratos alcoólicos obtidos a partir de raízes, tubérculos, folhas e sumidades florais de exemplares pertencentes a 19 famílias de vegetais. Para tanto, determinaram-se as concentraçöes alcoólicas näo inibitórias do parasita e, a partir destes dados, elaboraram-se as diluiçöes dos extratos. Os testes foram realizados em quintuplicata com séries de tubos contendo cerca de 10.10(6) a 12.10(6) formas de parasita. Na avaliaçäo dos testes utilizaram-se controles com a cultura pura e com o solvente alcoólico, realizando-se as leituras dos tubos no 10§ dia, através da contagem comparativa das variantes. Os resultados demostraram ocorrência de inibiçäo total de crescimento do protozoário em 32 extratos e inibiçäo parcial, em outros 35 extratos

Consideraciones sobre la actividad experimental de nuevos derivados del Violeta de Genciana en Trypanosoma cruzi / Considerations about experimental activity of new gentian violet derivatives in Trypanosoma cruzi

Foram ensaiados, frente a uma cepa boliviana de Trypanosoma cruzi, dois novos derivados trifenilmetânicos obtidos por síntese: T-7A, bis (4-dimetilamino-fenil) 2-benzotienil carbinol e T-7B, tetrafluorborato de bis (4-dimetilamino - fenil) 2-benzotienil carbonio. As experiências foram realizadas em camundongos NMRI através da administraçäo dos produtos por via intraperitoneal. Foram realizados, também, testes de atividade tripanomicida, in vitro, com sangue contaminado e conservado sob refrigeraçäo

Consideraçöes sobre o comportamento da infecçäo de camundongos por subamostras de Trypanosoma cruzi, através de inóculos diferenciados por via subcutânea e intraperitoneal / On the behaviour of the infection of mice usinf Trypanosoma cruzi populations and different patterns of inoculation through subcutaneous and intraperitoneal routes

No sentido de ampliar o conhecimento do comportamento de infecçöes experimetais com o T. cruzi, trabalhamos com populaçöes de características biomorfológicas típicas e bem definidas. Inocularam-se 2.10(3), 2.10(4), 2.10(5) flagelados em lotes de animais por via subcutânea e intraperitoneal. O acompanhamento dos animais revelou infecçöes relativamente uniformes com a populaçäo de tripomastigotas tipicamente largos, em todos os inóculos e independente da via de inoculaçäo. As infecçöes obtidas, nas mesmas condiçöes, com a populaçäo de tripanossomos delgados, apresentaram algumas diferenças evidentes de maior virulência nos inóculos por via subcutânea e relacionadas ao período prepatente, níveis parasitêmicos e letalidade. Nos grandes inóculos verificamos uniformidade no comportamento da infecçäo nos diversos lotes de animais estudados. É discutido o envolvimento da via de inoculaçäo e dos padröes morfobiológicos das populaçöes no comportamento da infecçäo

Estudo do comportamento da infecçäo experimental de subamostras do Trypanosoma cruzi, após passagem em cultura e em triatomíneo / Studies on the behaviour of experimental infection of Trypanosoma cruzi populations, after passing in culture media and in triatomine bugs

Realizamos estudo do comportamento da infecçäo experimental em camundongos com populaçöes conhecidas do flagelado, com o objetivo de contribuir para a avaliaçäo de possíveis modificaçöes nestes parâmetros. Para tanto, foram utilizadas subamostras do parasita constituídas por populaçöes com características próprias e bem definidas, obtidas do fracionamento da amostra Bolívia do Trypanosoma cruzi, através da centrifugaçäo diferencial. Como critérios de estudo tomamos o índice de infecçäo, o período prepatente, os níveis parasitêmicos, a taxa de mortalidade e o parasitismo tissular. Foram verificadas discretas modificaçöes com a populaçäo SN (tripomastigotas finos), enquanto com a populaçäo SD (tripomastigotas largos), observamos influência das passagens em triatomíneo e em meio de cultura, demonstrada pela reduçäo do período prepatente e elevaçäo dos níveis parasitêmicos. Verificamos, nos dois casos, modificaçäo da patogenicidade das populaçöes estudadas, com o aumento da taxa de letalidade nos lotes de animais estudados. O tropismo da populaçäo SN para as células do SFM e a afinidade da populaçäo SD para a musculatura cardíaca e esquelética näo se alteraram

Estudos da morfologia das formas sangüícolas de sub amostras do Trypanosoma cruzi, após passagem em cultura e em triatomíneo / Morphologycal studies on blood-stream Trypomastigotes of Trypanosoma cruzi populations, after passage in culture media and in triatomine bugs

Realizamos estudo morfo-biométrico com populaçöes conhecidas do flagelado, no propósito de contribuir na avaliaçäo de possíveis modificaçöes destes parâmetros, após a passagem em meio de cultura e em triatomíneo. Para tanto, utilizamo-nos de subamostras constituídas por populaçöes com características próprias e bem definidas, obtidas do fracionamento da amostra Bolívia de Trypanosoma cruzi, através de centrifugaçäo diferencial. Como critérios de estudos tomamos o aspecto morfológico, a composiçäo e a biometria dos elementos sangüícolas e pelas avaliaçöes vereficamos que as características morfológicas básicas dos tripomastigotas sangüícolas das subamostras SN (predominantemente delgados) e SD (predominantemente largos) näo se modificaram após passagem em cultura e em triatomíneo. A composiçäo morfológica dos tripomastigotas, obtidos no acme da infecçäo aguda, de ambas as subamostras, também näo sofreu alteraçöes consideráveis. Apesar da ocorrência de discretas modificaçöes nos parâmetros biométricos, os elementos sangüíneos näo apresentaram alteraçöes consideráveis, tendo-se em vista que as variaçöes individuais dos elementos, dentro de cada uma das subamostras e suas variantes estudadas, foram amplas

Comportamento de subamostras do Trypanosoma Cruzi em reaçöes de aglutinaçäo / Behaviour Trypanosoma Cruzi strains in agglutination reactions

Os autores discutem o comportamento de subamostras do T. cruzi em reaçöes de aglutinaçäo, utilizando como antígeno tripomastigotas das subamostras BSN, com predominância de formas sanguíneas delgadas e BSD com tripomastigotas largos, e soros imunes obtidos de camundongos e ratos previamente inoculados com parasitas dessas subamostras, por via intraperitoneal. As reaçöes foram efetuadas, no acme de parasitemia, no curso da infecçäo dos camundongos, ou seja, no 7§ e 14§ dias, e os soros foram coletados até 4 semanas e após a 7ª semana de infecçäo. Foram feitas reaçöes com soros homólogo e heterólogo, e os resultados obtidos revelaram que os tripanossomos finos só aglutinaram soros de camundongos obtidos após a 7ª semana. Entretanto, com soros de ratos, ocorreu aglutinaçäo em ambas as faces da infecçäo. Por outro lado, os tripomastigotas largos näo reagiram, pois näo foram aglutinados

Comportamento de formas sangüícolas do Trypanosoma cruzi obtidas de camundongos utilizados como filtros biológicos em cultura e em triatomíneo / Behavior of the T. cruzi blood forms obtained from mice used as biological filters in culture of triatomine

Camundongos normais, utilizados como filtros biológicos, foram inoculados endovenosamente, com tripomastigotas sangüícolas da derivada RCL da cepa RC do T. cruzi. Decorridas 48 horas, os animais foram submetidos ao xenodiagnóstico e à punçäo cardíaca para semeadura do sangue em meio de Warren. No estômago dos triatomíneos e em cultura a 28-C, os tripomastigotas diferenciaram-se em formas arredondadas (esferomastigotas e/ou amastigotas). Esse comportamento das formas sangüícolas largas tem sido observado com freqüência e nos leva a inferir que a biologia do T. cruzi näo estaria apenas relacionada com a cepa, mas, eventualmente, com populaçöes do parasita

Estudo comparativo do comportamento da infecçäo de camundongos, através da inoculaçäo subcutânea e intraperitoneal, utilizando-se duas cepas de Trypanosoma cruzi / Comparative study of the behaviour of infection in mice, when inoculated by intraperitoneal and subcutaneous methods, using 2 strains of Trypanosoma cruzi

Foram utilizados camundongos brancos, pesando em média 18g e duas cepas de Trypanosoma cruzi, morfologicamente distintas: Y com predominância de formas sangüíneas delgadas e Bolívia com predomínio de formas largas. Os lotes de animais receberam 2 x 10**3, 2 x 10**4, 2 x 10**5 tripanossomos por animal e as vias de inoculaçäo utilizadas foram a intraperitoneal e a subcutânea. Nos animais foi observado o curso de infecçäo. Os resultados obtidos revelaram que, nos experimentos em que se utilizou a cepa Y, existem algumas diferenças significantes, com infecçöes mais uniformes e virulentas, após inoculaçäo subcutânea de 2 x 10**3 e 2 x 10**4 formas sangüíneas de T. cruzi. Entretanto, isto näo ocorreu com a cepa Bolívia, pois os animais apresentaram o mesmo padräo de parasitemia e os demais caracteres morfológicos, quer se utilizasse a via subcutânea ou intraperitoneal. Tal fato permite sugerir a existência de interrelaçäo entre os fatores via de inoculaçäo traduzida pela maior ou menor presença de macrófagos no sítio de inoculaçäo, e a morfologia das formas sangüíneas representada pela maior ou menor capacidade de penetraçäo celular

Comportamento de subamostras do Trypanosoma cruzi em hospedeiros vertebrados e invertebrados. / Behavior of strains of Trypanosoma cruzi in vertebrate and invertebrate hosts

Semeando tripomastigotas sanguicolas da amostra "Bolivia" do T. cruzi em meio liquido de Warren e, 72 horas apos, submetendo a cultura obtida a uma centrifugacao por 10 minutos a 700 rpm, obtivemos duas subamostras: uma a partir do sobrenadante, que denominamos Bolivia "SN" e outra a partir do sedimento que designamos Bolivia "SD". Essas subamostras, revelaram-se patogenicas para camundongos,infectando 100% dos animais inoculados. As infeccoes de camundongos, com as duas subamostras, foram graves, com periodos prepatentes muito curtos, parasitemias altas e elevadas taxas de letalidade. Os tripomastigotas sanguicolas das duas subamostras mostraram diferencas significantes nos dados biometricos.O estudo dessas subamostras em triatomineos mostrou diferencas marcantes no comportamento biologico

Estudo do comportamento de tripomastigotas sanguicolas de subamostras do Trypanosoma cruzi inoculadas endovenosamente em camundongos normais e imunes. / Behavior of blood stream trypomastigotes of strains of Trypanosoma cruzy intravenously inoculated in normal and immune mice

E estudado o comportamento de duas subamostras de caracteristicas distintas, obtidas do fracionamento da cepa Bolivia do T. cruzi, atraves da inoculacao endovenosa de formas sanguicolas, em camundongos normais e imunes.Nos animais normais observamos que as formas delgadas desaparecem mais rapidamente da corrente circulatoria, enquanto que as formas largas cumprem o ciclo tecidual mais tardiamente. Nos animais que sobreviveram a infeccao previa pelo parasita, verificamos que as formas finas sao precocemente destruidas, ao passo que as formas largas sao mais resistentes aos mecanismos imunitarios, quer se tratasse de subamostra homologa ou heterologa

Observacao de formas do Trypanosoma cruzi nas fezes de triatomineos inoculados na cavidade celomica. / Trypanosoma cruzi forms in feces of Triatomidae inoculated in celomic cavity

E relatado o encontro de formas flageladas do T. cruzi nas feses de triatomineos inoculados na cavidade celomica com formas sanguineas e de culturas do parasita decorrente da capacidade do mesmo de atravessar a parede do trato digestivo. E descartada a ocorrencia de perfuracao acidental no intestino do inseto ou da existencia de lesoes da parede intestinal, pois nas ocasioes em que as mesmas foram provocadas, determinaram, sempre, a contaminacao da hemolinfa por bacterias e outros produtos digestivos, resultando em morte do inseto