Acaricidal activity of essential oils of Cinnamomum zeylanicum and Eremanthus erythropappus, major compounds and cinnamyl acetate in Rhipicephalus microplus / Atividade acaricida dos óleos essenciais de Cinnamomum zeylanicum e Eremanthus erythropappus, compostos majoritários e acetato de cinamila sobre Rhipicephalus microplus

Abstract This study aimed to chemically characterize the essential oils (EOs) of Cinnamomum zeylanicum (cinnamon) and Eremanthus erythropappus (candeia) and evaluate their acaricidal activity, together with that of their major compounds and cinnamyl acetate derivative, against Rhipicephalus microplus. Essential oil compounds were identified through gas chromatography. The larval packet test (LPT) at concentrations ranging from 0.31 to 10.0 mg/mL and the adult immersion test (AIT) at concentrations between 2.5 and 60.0 mg/mL were performed. (E)-cinnamaldehyde and α-bisabolol were the major compounds in cinnamon (86.93%) and candeia (78.41%) EOs, respectively. In the LPT, the EOs of cinnamon and candeia and the compounds (E)-cinnamaldehyde, α-bisabolol and cinnamyl acetate resulted in 100% mortality at concentrations of 2.5, 2.5, 5.0, 10.0 and 10.0 mg/mL respectively. In the AIT, percentage control values > 95% were observed for cinnamon and candeia EOs, (E)-cinnamaldehyde and α-bisabolol at the concentrations of 5.0, 60.0, 20.0, and 20.0 mg/mL, respectively, whereas cinnamyl acetate showed low activity. We conclude that EOs and their compounds showed high acaricidal activity, whereas the acetylated derivative of (E)-cinnamaldehyde presented less acaricidal activity on R. microplus engorged females.

Resumo Este estudo teve como objetivo caracterizar quimicamente os óleos essenciais (OE) de Cinnamomum zeylanicum (canela) e Eremanthus erythropappus (candeia) e avaliar sua atividade acaricida, juntamente com a de seus principais compostos e do derivado de acetato de cinamila, sobre Rhipicephalus microplus. Os compostos do óleo essencial foram identificados por cromatografia gasosa. Foram realizados o Teste de Pacote de Larvas (TPL), em concentrações variando de 0,31 a 10,0 mg/mL, e o Teste de Imersão de Adultos (TIA), em concentrações entre 2,5 e 60,0 mg/mL. (E)-cinnamaldeído e α-bisabolol foram os principais compostos nos OE da canela (86,93%) e da candeia (78,41%), respectivamente. No TPL, os OEs de canela e candeia, e os compostos (E)-cinnamaldeído, α-bisabolol e acetato de cinamila resultaram em 100% de mortalidade nas concentrações de 2,5, 2,5, 5,0, 10,0 e 10,0 mg/mL, respectivamente. No TIA, valores percentuais de controle >95% foram observados para OE de canela e candeia, (E)-cinnamaldeído e α-bisabolol nas concentrações de 5,0, 60,0, 20,0 e 20,0 mg/mL, respectivamente, enquanto o acetato de cinamila apresentou baixa atividade. Conclui-se que os OEs e seus compostos apresentaram alta atividade acaricida, enquanto o derivado acetilado do (E)-cinnamaldeído apresentou menor atividade acaricida em fêmeas ingurgitadas de R. microplus.

Potential of entomopathogenic nematodes of the genus Heterorhabditis for the control of Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) / Potencial de nematoides entomopatogênicos do gênero Heterorhabditis para o controle de Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae)

Abstract The present study verified the pathogenic potential of entomopathogenic nematodes (EPNs) of the genus Heterorhabditis (Heterorhabditis bacteriophora, isolate HP88 and Heterorhabditis baujardi isolate LPP7) to immature stages of Stomoxys calcitrans in the laboratory. All EPN concentrations of the H. bacteriophora HP88 strain caused mean larval mortality greater than 90% after four days. Higher concentrations of the H. baujardi LPP7 isolate (≥50 EPNs/larva) eliminated more than 70% of larvae after six days with the concentration 200 EPNs/larva reaching mortality levels of 93.3%. The larval mortality at all concentrations of EPNs (25, 50, 100, 150, and 200 EPNs/larva) for both strains was significant (p<0.05) when compared to the respective control groups. Concentrations of H. bacteriophora HP88 yielded an LC50 of 0.36 EPN/larva and LC90 of 29.1; while H. baujardi LPP7 yielded an LC50 of 39.85 and LC90 of 239.18. H. bacteriophora HP88 provided greater inhibition of the emergence of adults when compared to the response obtained with H. baujardi LPP7. EPNs did not cause considerable mortality when applied directly to pupae. The set of observed results suggests that the EPNs of the genus Heterorhabditis, isolates HP88 and LPP7, are a promising alternative in the control of the stable fly.

Resumo O presente estudo verificou o potencial patogênico de nematoides (NEP) do gênero Heterorhabditis (H. bacteriophora - isolado HP88 e H. baujardi - isolado LPP7) para estágios imaturos de Stomoxys calcitrans em laboratório. Todas as concentrações de NEPs da cepa HP88 causaram mortalidade larval média maior que 90% após quatro dias. Concentrações mais elevadas da cepa LPP7 (≥50 NEPs/larva) eliminaram mais de 70% após seis dias, com a concentração 200 NEPs/larva atingindo níveis de 93,3%. A mortalidade larval em todas as concentrações de NEPs (25, 50, 100, 150, and 200 NEPs/larva) para ambas as cepas foi significativa (p<0,05), quando comparadas aos respectivos grupos controle. Concentrações de H. bacteriophora HP88 obtiveram LC50 de 0,36 NEP/larva e LC90 de 29,1; enquanto H. baujardi LPP7 obteve LC50 de 39,85 e LC90 de 239,18. O isolado H. bacteriophora HP88 propiciou maior inibição da emergência de adultos, quando comparado à resposta obtida com H. baujardi LPP7. NEPs não provocaram mortalidade considerável quando aplicados diretamente sobre pupas. O conjunto de resultados observados indica os nematoides entomopatogênicos do gênero Heterorhabditis (estirpes HP88 e LPP7) como uma alternativa promissora no controle da mosca dos estábulos.

Antimicrobial activity of Stomoxys calcitransagainst Beauveria bassiana sensu lato isolates / Atividade antimicrobiana de Stomoxys calcitranscontra isolados de Beauveria bassiana sensu lato

This study had the aims of evaluating the antimicrobial characteristics of Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) larvae against the fungal isolates CG138, CG228 and ESALQ986 of Beauveria bassiana sensu lato (Balsamo-Crivelli) Vuillemin, 1912 (Hypocreales: Cordycipitaceae). S. calcitrans eggs, larvae and pupae were exposed to these same isolates. Statistical analysis showed that the immature stages of S. calcitrans were not susceptible to the fungal isolates used, regardless of the exposure method. Diffusion test on solid culture medium reveled that macerated S. calcitrans larvae exposed to isolate CG138 reduced CG138 fungal development. The analysis of the chromatographic profiles indicated that the macerate or mucus of larvae of the control group and the groups exposed to the isolate CG138 presented different profiles. Reduced development of the isolate CG138 on the larvae cuticle was observed by means of scanning electron microscopy.

Este estudo teve como objetivos avaliar as características antimicrobianas de larvas de Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) contra os isolados CG138, CG228 e ESALQ986 de Beauveria bassiana sensu lato (Balsamo-Crivelli) Vuillemin, 1912 (Hypocreales: Cordycipitaceae). Ovos, larvas e pupas de S. calcitrans foram expostos a estes mesmos isolados. Após análise estatística, foi verificado que os estágios imaturos de S. calcitrans não foram susceptíveis aos isolados utilizados, independentemente do método de exposição utilizado. O teste de difusão em meio sólido mostrou que quando o isolado CG138 foi exposto a macerado de larvas houve redução do desenvolvimento fúngico. A análise dos perfis cromatográficos mostrou que o macerado ou muco de larvas do grupo controle e dos grupos expostos ao isolado CG138 apresentaram diferenças nos perfis. Um desenvolvimento reduzido do isolado CG138 na cutícula de larvas foi observado pela microscopia eletrônica de varredura.

Antifungal activity of Stenotrophomonas maltophilia in Stomoxys calcitrans larvae / Atividade antifúngica de Stenotrophomonas maltophilia em larvas de Stomoxys calcitrans

The microbiota present in Stomoxys calcitrans larvae may assist their survival in contaminated environments through production of inhibitory substances. Bacteriological identification methods, the polymerase chain reaction (PCR) and scanning electron microscopy (SEM) were used to detect a bacterium naturally present in mucus and macerated S. calcitrans larvae. The antifungal activity was determined based on the results from disk diffusion tests on an artificial solid medium. The bacterium was identified as Stenotrophomonas maltophilia and presented antifungal activity against Beauveria bassiana sensu lato isolates CG 138, CG 228 and ESALQ 986. This result suggests that the larval microbiota is a factor that can compromise the use of B. bassiana s.l. fungus for biological control of S. calcitrans larvae.

A microbiota presente em larvas de Stomoxys calcitrans pode auxiliar na sua sobrevivência em ambientes contaminados, devido à produção de substâncias inibidoras. Métodos bacteriológicos de identificação, reação em cadeia da polimerase (PCR) e microscopia eletrônica de varredura (MEV) foram utilizados para detectar uma bactéria naturalmente presente no muco e macerado de larvas de S. calcitrans. A atividade antifúngica foi baseada nos resultados obtidos no teste de difusão em meio sólido artificial. A bactéria foi identificada como Stenotrophomonas maltophilia e apresentou atividade antifúngica contra os isolados CG 138, CG 228 e ESALQ 986 de Beauveria bassiana sensu lato. Estes resultados sugerem que a microbiota larval é um fator que pode comprometer o uso de B. bassiana s.l. no controle biológico de larvas de S. calcitrans.

Compatibilidade de Heterorhabditis amazonensis (Rhabditida: Heterorhabditidae) isolado RSC-5 com diferentes carrapaticidas utilizados no controle de Rhipicephalus microplus (Acari: Ixodidae) / Compatibility of Heterorhabditis amazonensis (Rhabditida: Heterorhabditidae) strain RSC-5 with different acaricides used for the control of Rhipicephalus microplus (Acari: Ixodidae)

O estudo teve como objetivo avaliar a viabilidade de Heterorhabditis amazonensis isolado RSC-5 após exposição a diferentes carrapaticidas utilizados no controle de Rhipicephalus microplus. Foram constituídos seis tratamentos, cada um composto por um produto, sendo cada grupo com 75.000 nematoides (NEPs) em suspensão de 20 mL de solução de diferentes carrapaticidas, em concentração comercial. O controle foi formado por 75.000 NEPs e 20 mL de água destilada, e todos os grupos foram mantidos em câmara climatizada a 25°C. A avaliação do percentual de sobrevivência e infectividade em lagartas Galleria mellonella foi realizada 24 e 72 horas após o início do experimento. A mortalidade de lagartas no teste de infectividade foi analisada após 72 e 120 horas. Com 24 horas de exposição, o percentual de sobrevivência de H. amazonensis RSC-5 não foi significativamente reduzido (p > 0,05) somente na exposição ao princípio ativo deltametrina. O mesmo foi observado no período de 72 horas em relação à associação clorpirifós + cipermetrina + butóxido de piperonila + citronelal. Não foi constatada sobrevivência de nenhum juvenil infectivo nos grupos expostos à associação clorfenvinfós + diclorvós. A exposição ao clorfenvinfós resultou em percentual de sobrevivência inferior a 50% após 72 horas. O potencial de infectar lagartas de G. mellonella foi reduzido apenas no grupo tratado com o princípio ativo clorfenvinfós. Dessa forma, é possível concluir que o princípio ativo clorfenvinfós e a associação clorfenvinfós + diclorvós não foram compatíveis com H. Amazonenses RSC-5, causando redução no percentual de sobrevivência e infectividade dos juvenis desse nematoide. Os outros produtos foram compatíveis, não causando redução na infectividade do isolado testado.(AU)

The aim of this study was to assess the viability of Heterorhabditis amazonensis strain RSC-5 after exposure to different acaricides used for Rhipicephalus microplus control. Six treatment groups were formed, one for each product. Each group was composed of 75,000 nematodes in a 20 mL solution of different acaricides, at commercial concentration. The control group was formed by the same number of nematodes in 20 mL of distilled water. All the groups were kept in a climate-controlled chamber at 25°C. The percentage of survival and infectivity in Galleria mellonella caterpillars were determined 24 and 72 hours after the beginning of the experiment. The mortality of the caterpillars in the infectivity test was assessed 72 and 120 hours. After 24 hours of exposure, only the active ingredient deltamethrin did not significantly reduce the survival percentage of H. amazonensis RSC-5 (p > 0.05). The same was observed after 72 hours of exposure to the combination of chlorpyriphos + cypermethrin + piperonyl butoxide + citronellal. There was no survival of infective juveniles in the groups exposed to the combination of chlorphenvinphos + dichlorvos. The exposure to chlorphenvinphos for 72 hours resulted in 50% of mortality. The potential to infect G. mellonella caterpillars was only reduced in the group treated with the active ingredient chlorphenvinphos. Chlorphenvinphos and the combination of chlorphenvinphos + dichlorvos were not compatible with H. amazonensis RSC-5, causing a reduction in the survival and infectivity of juveniles of this nematode, while the other products were compatible, causing no reduction in the infectivity of this isolate.(AU)

Effects of destruxin A on Rhipicephalus (Boophilus) microplus ticks (Acari: Ixodidae) / Efeitos da destruxina A no carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari: Ixodidae)

This study evaluated the effects of destruxin A on Rhipicephalus (Boophilus) microplus females, since this toxin is one of the likely causes of high mortality induced by the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae in arthropods. Ticks were immersed or inoculated with different concentrations of destruxin A. Despite the doses applied, there were no deaths or significant alterations in oviposition between the groups treated with destruxin A and the control groups. No other external effect caused by destruxin, such as tetanic paralysis, was observed in these engorged female ticks after the treatment.

Este estudo avaliou os efeitos da destruxina A em fêmeas de Rhipicephalus (Boophilus) microplus, uma vez que essa toxina é uma das prováveis causas da alta mortalidade induzida pelo fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae em artrópodes. Os carrapatos foram imersos ou inoculados com diferentes concentrações de destruxina A. Apesar das doses aplicadas, não houve mortes ou alterações significativas de postura entre os grupos tratados com destruxinas A e os grupos controle. Nenhum outro efeito externo provocado pela destruxina A, tal como paralisia tetânica, foi observado nas fêmeas ingurgitadas de carrapato após o tratamento.

Patogenicidade de Beauveria bassiana sobre estágios imaturos de Stomoxys calcitrans / Pathogenicity of Beauveria bassiana on immature stages of Stomoxys calcitrans

Por ser um díptero hematófago, a mosca Stomoxys calcitrans (Linnaeus, 1758) ocasiona grandes perdas na pecuária brasileira. Atualmente, pesquisas têm sido direcionadas para métodos de controle que reduzam a utilização de inseticidas químicos e que preservem o meio ambiente. Este estudo avaliou o potencial entomopatogênico dos isolados CG 138 e CG 228 de Beauveria bassiana sobre ovos, larvas e pupas de S. calcitrans em condições ambientais e o isolado ESALQ 986 de B. bassiana em ovos, nas mesmas condições. Para cada isolado fúngico, foram utilizadas as concentrações de 2x10(6), 2x10(7) e 2x10(8) conídios ml-1. Os resultados sugerem que os isolados CG 138, CG 228 e ESALQ 986 apresentaram efeito saprofítico, pois não afetaram significativamente o desenvolvimento dos estágios imaturos da mosca dos estábulos, comprometendo dessa forma sua utilização como agente entomopatogênico.

Because it is a hemathofagic diptera, the Stomoxys calcitrans (Linnaeus, 1758) inflicts great losses in the Brazilian cattle. Nowadays, researches have been directed to the control methods that reduce the use of chemical insecticides and preserve the environment. This study evaluated the entomopathogenic potential of the isolated CG 138 and CG 228 of Beauveria bassiana on eggs, larvae and pupae of S. calcitrans in environmental conditions and the isolated ESALQ 986 of B. bassiana in eggs. For each fungal isolated were used concentrations of 2x10(6), 2x10(7) and 2x10(8) conidia ml-1. The results suggest that the isolated CG 138, CG 228, ESALQ 986 present a saprophytic effect, because they did not affect significantly the development of immature stages of the stable flies, affecting this way its use as entomopathogenic agent.

Ação do fungo Beauveria bassiana, isolado 986, sobre o ciclo biológico do cascudinho Alphitobius diaperinus em laboratório / Action of the fungus Beauveria bassiana, strain 986, over the biologic cycle of the Alphitobius diaperinus beetle in laboratory

O presente trabalho foi realizado para verificar a eficácia do fungo Beauveria bassiana em todas as etapas de desenvolvimento de Alphitobius diaperinus e assim saber em que fase ele é mais susceptível ao controle biológico. O fungo B. bassiana, isolado 986, foi testado em duas concentrações (3,4 X 10(6) e 3,4 X 10(8) conídios ml-1) mais um grupo controle. Foram realizadas duas leituras, uma sete e outra quatorze dias após a aplicação dos fungos. Na concentração 3,4 X 10(6), 54 por cento dos ovos tratados estavam inférteis, ocorrendo 54 por cento de mortalidade de larvas tratadas nos estádios I, II e III, 22,5 por cento nos estádios IV, V e VI, 9,5 por cento nos estádios VII e VIII e 24,5 por cento de mortalidade das pupas. Na concentração 3,4 X 10(8), 66,8 por cento dos ovos tratados estavam inviáveis, ocorrendo mortalidade de 56 por cento das larvas tratadas nos estádios I, II e III, 34 por cento nos estádios IV, V e VI, 24,5 por cento nos estádios VII e VIII e 49,5 por cento das pupas. Já no grupo controle, 13,3 por cento dos ovos estavam inviáveis, ocorrendo mortalidade de 10 por cento das larvas nos estádios I, II e III, 4 por cento nos estádios IV, V e VI e 0 por cento de mortalidade nos estádios VII, VIII e em pupas. Sobre o cascudinho adulto, o fungo não teve efeito nocivo em nenhum grupo analisado. Com base nesses resultados, observou-se que o fungo nas concentrações testadas apresentou efeito nocivo às fases do ciclo biológico do cascudinho, com exceção do inseto adulto.

The present research was carried out to verify the Beauveria bassiana fungus efficacy in all development phases of Alphitobius diaperinus and to know in which phase it is more susceptible for biologic control. The B. bassiana, 986-isolated fungus, was tested in two different concentrations (3.4 x 10(6) and 3.4 x 10(8) conidium ml-1) and a control group. Two readings were realized, one after 7 days of fungus application and the other after 14 days. At concentration of 3.4 x 10(6) conidium ml-1, 54 percent of treated eggs were infertile, with larva death of 54 percent at I, II and III phase, 22.5 percent at IV, V, and IV phase and 9.5 percent at VII and VIII phase. For pupa stage 24.5 percent of death was found. At concentration of 3.4 x 10(8) conidium ml-1, 66.8 percent of treated eggs were impracticable occurring treated larva death of 56 percent at I, II and III phase; 34 percent at IV, V and VI phase, 24.5 percent at VII and VIII phase and 49.5 percent at pupa phase. For control group, 13.3 percent of eggs were not viable with larva death of 10 percent at I, II and III phase, 4 percent at IV, V and VI phase and 0 percent at pupa, VII and VIII phase. About the adult lesser mealworms, the fungus did not present noxious effect at all analyzed group. In conclusion, these results showed that the fungus at tested concentrations presented noxious effect at all biologic cycle phases of lesser mealworms, except for the adult insect.

Açäo do fungo Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin, 1912 sobre a fase parasitária do carrapato Anocentor nitens (Neumann, 1897) Schulze, 1937 (Acari: ixodidae) / Action of the fungus Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin, 1912 on the parasitic phaseof the tick Anocentor nitens (Neumann, 1897) Schulze, 1937 (Acari: ixodidae)

A patogenicidade do fungo Beauveria bassiana (isolado 986) foi avaliada no desenvolvimento da fase parasitária do Anocentor nitens, acompanhando o desenvolvimento de larvas näo alimentadas até o estágio adulto. Foram utilizados dois tratamentos e um grupo controle com cinco repetiçöes cada. No tratamento 1 (T1), as orelhas dos bovinos foram banhadas com a suspensäo fúngica de 10(8) conídios ml(-1); no tratamento 2 (T2), as orelhas foram banhadas com água destilada e espalhante adesivo. No grupo controle (C), as orelhas foram banhadas com água destilada. Após 24 horas dos tratamentos, as orelhas de cada animal foram infestadas com 100mg de larvas. Os parâmetros analisados em cada tratamento foram: número e peso de fêmeas recuperadas; períodos de pré-postura, postura, incubaçäo, eclosäo e longevidade; percentual de eclosäo; peso da massa de ovos e da quenógina; índices de eficiência reprodutiva e nutricional. Verificou-se que, no T1 e T2, o número de fêmeas recuperadas, após 35 dias, foi significativamente menor (P

Isolation of fungi in Musca domestica Linnaeus, 1758 (Diptera: Muscidae) captured at two natural breeding grounds in the municipality of Seropédica, Rio de Janeiro, Brazil

The objective of this study was to isolate and identify fungal species found in natural association with adults of Musca domestica. The adult insects were collected from two natural breeding grounds: hog pens and an urban sanitary landfill. The isolated fungi were identified as: Aspergillus flavus (23.8 percent), A. niger var. niger (14.4 percent), Penicillium corylophilum (21.4 percent), P. fellutanum (11.9 percent), Cladosporium cladosporoides (4.7 percent), Fusarium sp. (4.7 percent), Alternaria alternata (11.9 percent), Curvularia brachyspora (2.4 percent), Mycelia sterilia (2.4 percent) and the Mucorales order (2.4 percent)

Avaliacao in vitro dos fungos aspergillus flavus e penicillium corylophilum em adultos de musca domestica / In vitro avaliation of the fungus aspergillus flavus and penicillium corylophilum in adults of musca domestica

O objetivo do presente estudo foi o de avaliar o potencial de dois isolados fúngicos de Aspergillus flavus e dois isolados de Penicillium corylophilum sobre adultos de Musca domestica. Para a realizacao dos bioensaios foram selecionados dois isolados de cada especie fúngica. Os adultos de M. domestica para os bioensaios foram obtidos a partir de pupas da colonia desta especie. Moscas adultas recem emergidas foram separadas en quatro grupos con dez moscas para cada uma das diluicoes das suspensoes conidiais (10 elevado a 5 a 10 elevado a 8 conídios/ml). Foram realizadas pulverizacoes de 2,5 ml das suspensoes conidiais para cada repeticao. Dois grupos controles foram mantidos, no primeiro as moscas foram tratadas com espalhante adesivo e o segundo sem nenhum tratamento. Os insetos adultos foram sensíveis aos tratamentos com diferentes isolados fúngicos, princeipalmente nos tratamentos com suspensoes com maiores concentracoes conidiais. No bioensaio com um dos isolados de A. flavus ocorreu a mortalidade de 100 percento das moscas no terceiro dia após a infeccao. Nos bioensaios com os dois isolados de P. corylophilum, 100 percento das moscas tratadas morreram até o sétimo dia após infeccao. O ritmo de mortalidade foi mais lento nos tratamentos com menores concentracoes conidiais prolongandose até o 15º dia

Avaliaçäo in vitro da patogenicidade dos isolados CG17, EP01 e 986 do fungo Beauveria bassiana (balsamo) Vuillemin sobre larvas do carrapato Anocentor nitens (Neumann, 1897) (Acari: Ixodidae) / Patogenicity of isolates CG17, EP01 and 986 of the fungi Beauveria bassiana on larvae of the tick Anocentor nitens (Neumann, 1897) (Acari: Ixodidae) in laboratory

A patogenicidade in vitro de três isolados do fungo Beauveria bassiana, CG17 e EP01 e 986 foi avaliada em larvas do carrapato Anocenter nitens mantidas em temperatura controlada (27ºC e 80 por cento U.R.). A susceptibilidade das larvas aos isolados foi determinada experimentalmente por imersäo de grupos de larvas näo alimentadas com 25mg de larvas por grupo, durante três minutos, em quatro concentraçöes (10(5), 10(6), 10(7) e 10(8) conídios/ml) de cada isolado e um grupo controle imerso em água (com dez repetiçöes para cada tratamento). Após dez dias de infecçäo, a concentraçäo 10(8) causou a mortalidade de aproximadamente 93 por cento das larvas para todos os isolados, e a concentraçäo 10(5) causou a mortalidade de 7,6 por cento, 17,5 por cento e 43 por cento, nos tratamentos com os isolados 986, EP01 e CG17, respectivamente. A mortalidade média de larvas do grupo controle näo excedeu a 0,9 por cento, fato este que demonstra o poder patogênico deste fungo em larvas de A. nitens. A CL 50 para os isolados 986, CG17 e EP01 foi 1,8 X 10(7); 1,6 X 10(6) e 2,5 X 10(7), respectivamente.

Mecanismo de infecção do fungo Metarhizium anisoplie no carrapato Boophilus microplus em condiçöes experimentais / The penetration of the fungus Metarhizium anisopliae on Boophilus microplus in experimental conditions

O objetivo do presente trabalho foi avaliar o mecanismo de penetraçäo do fungo Metarhizium anisopliae em Boophilus microplus em condiçöes experimentais. As infecçöes foram realizadas utilizando amostra de M. anisopliae isolada de carrapatos. A suspensäo de conídios do fungo foi preparada utilizando água destilada e espalhante adesivo Tween 80 e foi quantificada na concentraçäo de 10 elevado a 8 conídios/ml. As fêmeas ingurgitadas foram banhadas nesta suspensäo durante cinco minutos e, após este período, foram levadas à câmara climatizada. Três dias após a infecçäo, as fêmeas foram fixadas utilizando tetróxido de ósmio e glutaraldeído, posteriormente desidratadas em bateria de álcool etílico com acetona. Após a desidrataçäo, esse material foi levado à metalizaçäo e ao microscópio eletrônico de varredura, onde se observou a fixaçäo dos conídios na cutícula das fêmeas, havendo germinaçäo e a dilataçäo da extremidade do tubo germinativo em todas as amostras. Esta dilataçäo observada foi devido à formaçäo do apressório, apesar de näo ser possível observar esta estrutura sobre a cutícula das fêmeas ingurgitadas. O tetróxido de ósmio mostrou ser um excelente fixador para fungos, enquanto o glutaraldeído mostrou ser eficiente na fixaçäo do artrópode. Conclui-se que a forma principal de penetraçäo deste entomopatógeno em B. microplus é através da cutícula. Cabe aqui frisar que esta é a primeira vez que é descrito o mecanismo de penetraçäo de M. anisopliae em carrapatos.

Efeito dos fungos entomopatogênicos Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana em ovos de Rhipicephalus sanguineus (Acari: Ixodidae) / Effect of the entomopathogenic fungi Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana on eggs of Rhipicephalus sanguineus (Acari: Ixodidae)

Este experimento foi conduzido para conhecer os efeitos de duas espécies de fungos, Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae em ovos de carrapatos Rhipicephalus sanguineus sob temperatura e umidade constantes (27 ñ 1§ C e > 80 porcento de umidade relativa (UR) e variáveis (25 ñ 5§ C e > 60 porcento UR). Ovos de R. sanguineus foram imersos em 4 concentraçöes (10 elevado a 8, 10 elevado a 7, 10 elevado a 6 e 10 elevado a 5 conídios/ml) de dois isolados de B. bassiana (Bb 986 e Bb 747) e três isolados de M. anisopliae (Ma 959, Ma E9 e Ma 319). Os períodos de incubaçäo e eclosaäo das larvas de todos os ovos tratados foram estatisticamente näo significantes (P>0,05). Entretanto, a porcentagem de eclosäo das larvas, oriundas dos ovos tratados foi inversamente proporcional à concentraçäo de conídios/ml. A porcentagem de eclosäo variou entre 0 à 26,66 porcento para a concentraçäo 10 elevado a 8 conídios/ml, e 6,66 à 100 porcento para a concentraçäo 10 elevado a 5 conídios/ml. A porcentagem de eclosäo das larvas de ovos mantidos em temperatura e umidade variáveis foi menor quando comparada com a das larvas de ovos mantidos em temperatura de 27§C e umidade > 80 porcento UR (P<0,05). A CL 50 e 90 para inibiçäo da eclosäo das larvas também foi menor em temperatura e umidade variáveis (P<0,05).

Aspectos epidemiológicos da babesiose eqüina na microrregião fluminense do Grande Rio-ltaguaí, Estado do Rio de Janeiro / Epidemiological aspects of equine babesiosis in the region of ltaguaí, State of Rio de Janeiro

Foram colhidas amostras de sangue de 78 eqüinos, pertencentes ao Setor de Eqüinocultura do Instituto de Zootecnia da Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRRJ) e a propriedades vizinhas no município de ltaguaí, Estado do Rio de Janeiro, no período de abril a agosto de 1985. Das amostras, separou-se o soro, que foi inativado em banho-maria a 36ºC e posteriormente mantido na temperatura de -15ºC até a coleta e preparo de todo o material. De cada animal sangrado, foram coletados carrapatos que foram identificados como Amblyomma cajennense e Anocentor nitens. As amostras de soro foram analisadas no Instituto de Parasitologia da Universidade de Hannover, Alemanha, onde foi realizada a técnica de fixação do complemento, utilizando antígenos específicos para Babesia equi e B. caballi para a identificação de animais portadores de babesiose. Os carrapatos foram examinados através de análise de hemolinfa, tubo digestivo, ovários e glândula salivar, a procura de formas evolutivas de Babesia sp. Os resultados mostraram que todos os animais examinados apresentaram resposta positiva, mesmo em diferentes graus, para B. equi, B. caballi, ou ambas. Dos animais examinados 93,6% apresentaram reação positiva para B. caballi e 84,6% para B. equi. Os carrapatos examinados foram negativos para Babesia. Isto mostra que a prevalência é elevada na região estudada, caracterizando-a como uma área fortemente enzoótica e, potencialmente, de risco para animais procedentes de áreas livres de carrapatos vetores.

Blood samples of 78 equines from ltaguaí, State of Rio de Janeiro were collected from April to August 1985. The sera were inactived at 36ºC and maintained in a freezer temperature (-15ºC). Ticks were collected from each equine and were classified as Amblyomma cajennense and Anocentor nitens. The ticks and sera samples were sent to Hanover, Germany, for examination. The complement fixation (CF) test was used to identify the positive equines for Babesia caballi and B. equi. Hemolymph, avaries, salivar glands and digestive organs were examined for detection of field infections of Babesia sp. The results showed that ali of the equines were positives for Babesia. The prevalence of B. equi was 84.6% and of B. caballiwas 93.6% by the CF test. The ticks were negatives for Babesia. These results showed that the prevalence was high. This area is highly enzootic for B. equi and B. caballi and could be considered a hazard for animais from tick free areas.

Efeito do fungo Metarhizium anisopliae sobre estádios pré-parasíticos de Cyathostominae (Nematoda: Strongylidae) / The effect of the fungus metarhizium anisopliae at free living stages of Cyathostominae (Nematoda: Strongylidae)

O efeito do fungo Metarhizium anisopliae sobre estádios de vida livre de nematóides ciatostomineos (Strongylidae: Cyathostominae) foi avaliado, visto que sua patogenicidade para insetos e carrapatos já é comprovada. Para isto, foi utilizada uma cultura deste fungo em meio de arroz, contendo 1,3X10(8) conidios de M. anisopliae por grama, que foi adicionada a coproculturas com ovos de nematóides intestinais de eqüinos, compondo dois grupos tratados com diferentes concentrações (1,3X10(8) e 1,3X10(6) conídios/grama de fezes). As coproculturas foram mantidas em câmara climatizada a ± 30°C e 90% de umidade relativa. Após quinze dias, todas as culturas foram retiradas da câmara, as larvas foram recuperadas, contadas e identificadas. Nos dois grupos tratados observou-se redução no número de larvas encontradas nas coproculturas quando comparadas com as do grupo controle. A redução do número de larvas variou de 55,4 a 85,1 %, demonstrando o provável potencial deste fungo, para utilização no controle alternativo destes nematóides.

The effects of fungus Metarhizium anisopliae in free-living stages of nematodes (Strongylidae: Cyathostominae) were evaluate as a potencial aid to reduce the number of larvae in culture of horse feces. Metarhizium anisopliae cultured in rice, contained 1,3 X 10(8) conidia per gram, were added to culture of feces containing nematode eggs, in two treatment groups with different concentrations (l,3X10(8) e 1,3X10(6) conidia per gram of feces). The cultures were maintained at temperature of ± 30°C and 90% of relative umidity. After fiftheen days the cultured larvae were recovered, counted and identified. In the treated groups it was observed a reduction of the larval number, when compared with the control group. The reduction of 55.4 to 85.1% demonstrated a possibility of the use of this fungus as an alternativo control method for nematodes.