Efeito Cardioprotetor da Suplementação Materna com Resveratrol sobre a Toxicidade Induzida por Doxorrubicina em Cardiomiócitos de Neonatos / Cardioprotective Effect of Maternal Supplementation with Resveratrol on Toxicity Induced by Doxorubicin in Offspring Cardiomyocytes

Resumo Fundamento A doxorrubicina (DOX) é frequentemente usada para tratar muitos tipos de cânceres, apesar da cardiotoxicidade dose-dependente. Como alternativa, o resveratrol é um polifenol que tem demonstrado efeitos cardioprotetores em vários modelos de disfunção cardíaca. Objetivo Este estudo investigou se o tratamento com resveratrol em ratas gestantes protege contra toxicidade induzida por doxorrubicina em cardiomiócitos da ninhada. Métodos Ratas Wistar (n-8) receberam sresveratrol como suplemento alimentar durante a gestação. No nascimento da ninhada, os corações (9-11) foram usados para se obter a cultura primária de cardiomiócitos. A cardiotoxicidade induzida por DOX e os efeitos da suplementação com resveratrol foram avaliados por marcadores de stress oxidativo, tais como oxidação da diclorofluoresceína diacetato, diminuição da atividade de enzimas antioxidantes, e oxidação do teor total de grupos sulfidrila, além da avaliação da viabilidade celular, geração de danos ao DNA, bem como a resposta de reparo aos danos ao DNA. Um valor de p <0,05 foi considerado estatisticamente significativo. Resultados Os cardiomiócitos de neonatos de ratas que receberam suplemento resveratrol apresentaram um aumento (p <0,01) na viabilidade das células, e diminuição (p <0,0001) de células apoptóticas/necróticas após o tratamento com DOX, o que está correlacionado às atividades de enzimas antioxidantes e produção de diclorofluoresceína. Além disso, o resveratrol protegeu os cardiomiócitos de danos ao DNA induzidos por DOX, apresentando uma diminuição (p <0,05) nas quebras de DNA induzidas por stress oxidativo, avaliadas pela atividade de enzimas reparadoras do DNA endonuclease III e formamidopirimidina glicosilase. A suplementação com resveratrol aumentou (p <0,05) a expressão da proteína reparadora Sirt6 nos cardiomiócitos dos filhotes. Conclusão Essa pesquisa indica que a suplementação com resveratrol durante o período gestacional tem um efeito cardioprotetor no coração da ninhada contra a toxicidade induzida por DOX, o que pode se dever a sua função antioxidante, e o aumento na resposta de danos ao DNA.

Abstract Background Doxorubicin (DOX) is frequently used to treat many types of cancers, despite its dose-dependent cardiotoxicity. Alternatively, resveratrol is a polyphenol that has shown useful cardioprotective effects in many heart dysfunction models. Objective This study investigated whether resveratrol treatment in pregnant rats protects against doxorubicin-induced toxicity in offspring cardiomyocytes. Methods Wistar rats (n=8) were supplemented with dietary resveratrol during pregnancy. Upon the offspring's birth, hearts (9-11) were used to obtain the primary culture of cardiomyocytes. DOX-induced cardiotoxicity and the effects of resveratrol supplementation were evaluated by oxidative stress markers, such as dichlorofluorescein diacetate oxidation, decrease in the activity of antioxidant enzymes, and oxidation of total sulfhydryl content, in addition to cell viability evaluation, DNA damage generation, and DNA damage repair response. A value of p<0.05 was considered statistically significant. Results Neonatal cardiomyocytes from resveratrol supplemented rats exhibiting an increase (p<0.01) in cell viability and lower (p<0.0001) apoptotic/necrotic cells after DOX treatment, which correlates with the activities of antioxidant enzymes and dichlorofluorescein production. Moreover, resveratrol protected cardiomyocytes from DOX-induced DNA damage, showing a decrease (p<0.05) in DNA breaks induced by oxidative stress, evaluated by the activity of DNA-repair enzymes endonuclease III and formamidopyrimidine glycosylase. Supplementation with resveratrol increased (p<0.05) the expression of the repair protein Sirt6 in the cardiomyocytes of the pups. Conclusion This research indicates that supplementation with resveratrol during the gestational period has a notable cardioprotective effect on the offspring's heart against DOX-induced toxicity, which may well be due to its antioxidant function, and the increase in the DNA damage repair response.

SUPLEMENTAÇÃO COM ÔMEGA-3 PÓS-RECONSTRUÇÃO DO LIGAMENTO CRUZADO ANTERIOR / SUPPLEMENTATION WITH OMEGA-3 AFTER RECONSTRUCTION OF THE ANTERIOR CRUCIATE LIGAMENT / SUPLEMENTACIÓN CON OMEGA-3 DESPUÉS DE LA RECONSTRUCCIÓN DEL LIGAMENTO CRUZADO ANTERIOR

Introdução: As lesões do ligamento cruzado anterior (LCA) contribuem para a formação de radicais livres de oxigênio que, em excesso, podem desencadear dano oxidativo na articulação do joelho. Objetivo: Avaliar os efeitos da suplementação oral com ômega-3 sobre marcadores de estresse oxidativo em indivíduos submetidos à reconstrução do LCA. Métodos: Este estudo é um ensaio clínico prospectivo, randomizado, controlado e simples cego, com amostra de 25 indivíduos submetidos à reconstrução do LCA, separados aleatoriamente em: grupo ômega-3 (GO), suplementado diariamente com 2 g de ômega-3 durante 15 dias pós-reconstrução do LCA e grupo controle (GC), não suplementado. Foi realizada coleta de sangue e de líquido sinovial imediatamente antes do procedimento cirúrgico e 15 dias pós-reconstrução do LCA. As análises bioquímicas avaliaram os níveis de produtos de lipoperoxidação (MDA); atividade da catalase; grupos sulfidrílicos totais e polifenóis e proteína C reativa (PCR). Resultados: Observou-se diminuição significativa nos níveis de MDA no GO em comparação ao GC (p < 0,05), da mesma forma que a atividade da enzima antioxidante catalase foi significativamente menor no GO quando comparado ao GC (p < 0,001). Também foram observados níveis significativamente elevados de grupos sulfidrílicos totais no plasma dos indivíduos suplementados quando comparados aos do GC (p < 0,001). Além disso, foram observados níveis significativamente maiores de polifenóis (p < 0,05) tanto no plasma quanto no líquido sinovial dos indivíduos que receberam ômega-3 no período pós-cirúrgico comparado ao pré-cirúrgico. Entretanto, não foi observado um efeito protetor da administração do ômega-3 sobre a função anti-inflamatória. Conclusão: Verificamos um efeito protetor do ômega-3 na modulação dos marcadores de estresse oxidativo em indivíduos submetidos à reconstrução do LCA.

Introduction: The injuries of the anterior cruciate ligament (ACL) contribute to the formation of oxygen free radicals, which in excess can trigger oxidative damage in the knee joint. Objective: To evaluate the effects of oral supplementation with omega-3 on markers of oxidative stress in individuals undergoing ACL reconstruction. Methods: This study is a prospective, randomized, controlled, and single blinded clinical trial, with a sample of 25 patients who underwent ACL reconstruction, randomly assigned to: Omega-3 group (OG), supplemented daily with 2 g of omega-3 for 15 days after ACL surgery; and Control group (CG), without supplementation. Blood and synovial fluid collection was performed immediately before the surgical procedure and 15 days after ACL reconstruction. The biochemical analyses assessed the levels of lipid peroxidation products (MDA); catalase activity; total sulfhydryl groups and polyphenols and C-reactive protein (CRP). Results: We verified a significant decrease in the levels of MDA in the OG compared to the CG (p<0.05) and, similarly, that the catalase antioxidant enzyme activity was significantly lower in the OG when compared to the CG (p<0.001). We also observed significantly elevated levels of total sulfhydryl groups in plasma in supplemented individuals when compared to the CG (p<0.001). In addition, significantly higher levels of polyphenols (p<0.05) were observed in both plasma and synovial fluid of individuals who received omega-3 in the post-surgical period compared to pre-surgical. However, no protective effect was observed with the administration of omega-3 on the anti-inflammatory function. Conclusion: The findings suggest that there is a protective effect of omega-3 on the modulation of oxidative stress markers in individuals undergoing ACL reconstruction.

Introducción: Las lesiones del ligamento cruzado anterior (LCA) contribuyen a la formación de radicales libres de oxígeno, que en exceso pueden desencadenar daño oxidativo en la articulación de la rodilla. Objetivo: Evaluar los efectos de la suplementación oral con ácidos grasos omega-3 en los marcadores de estrés oxidativo en pacientes sometidos a reconstrucción del LCA. Métodos: Este estudio es un ensayo clínico prospectivo, aleatorizado, controlado, simple ciego, con una muestra de 25 pacientes que se sometieron a la reconstrucción del LCA, divididos aleatoriamente en: grupo omega-3 (GO), suplementado diariamente con 2 g de omega-3 por 15 días después de la reconstrucción del LCA y grupo control (GC), sin suplementos. Se hizo la recogida de sangre y de líquido sinovial inmediatamente antes de la cirugía y 15 días después de la reconstrucción del LCA. El análisis bioquímico evaluó los niveles de productos de la peroxidación lipídica (MDA); la actividad catalasa; polifenoles y el total de grupos sulfhidrilo y la proteína C reactiva (PCR). Resultados: Se observó una disminución significativa en los niveles de MDA en GO en comparación con el GC (p < 0,05) de la misma manera que la actividad de la enzima antioxidante catalasa fue significativamente menor en GO en comparación con el CG (p < 0,001). También se observaron niveles significativamente elevados de grupos sulfhidrilo totales en plasma de individuos suplementados en comparación con el GC (p < 0,001). Además, se observaron niveles significativamente más altos de polifenoles (p < 0,05) en el plasma y en el líquido sinovial de pacientes que recibieron ácidos grasos omega-3 en el postoperatorio en comparación con el preoperatorio. Sin embargo, no se observó un efecto protector con la administración de omega-3 en la función anti-inflamatoria. Conclusión: Se encontró un efecto protector del omega-3 en la modulación de marcadores de estrés oxidativo en pacientes sometidos a la reconstrucción del LCA.