Speeding up the diagnosis of multidrug-resistant tuberculosis in a high-burden region with the use of a commercial line probe assay / Agilizando o diagnóstico da tuberculose multirresistente em uma região endêmica com o uso de um teste comercial de sondas em linha

ABSTRACT Objective: To evaluate the rapid diagnosis of multidrug-resistant tuberculosis, by using a commercial line probe assay for rifampicin and isoniazid detection (LPA-plus), in the routine workflow of a tuberculosis reference laboratory. Methods: The LPA-plus was prospectively evaluated on 341 isolates concurrently submitted to the automated liquid drug susceptibility testing system. Results: Among 303 phenotypically valid results, none was genotypically rifampicin false-susceptible (13/13; 100% sensitivity). Two rifampicin-susceptible isolates harboured rpoB mutations (288/290; 99.3% specificity) which, however, were non-resistance-conferring mutations. LPA-plus missed three isoniazid-resistant isolates (23/26; 88.5% sensitivity) and detected all isoniazid-susceptible isolates (277/277; 100% specificity). Among the 38 (11%) invalid phenotypic results, LPA-plus identified 31 rifampicin- and isoniazid-susceptible isolates, one isoniazid-resistant and six as non-Mycobacterium tuberculosis complex. Conclusions: LPA-plus showed excellent agreement (≥91%) and accuracy (≥99%). Implementing LPA-plus in our setting can speed up the diagnosis of multidrug-resistant tuberculosis, yield a significantly higher number of valid results than phenotypic drug susceptibility testing and provide further information on the drug-resistance level.

RESUMO Objetivo: Avaliar o diagnóstico rápido de tuberculose multirresistente, utilizando um teste comercial de sondas em linha (LPA-plus), na rotina de um laboratório de referência de tuberculose. Métodos: O teste LPA-plus foi avaliado prospectivamente em 341 isolados simultaneamente submetidos ao teste de suscetibilidade aos antimicrobianos em meio líquido, pelo sistema automatizado. Resultados: Entre os 303 resultados fenotipicamente válidos, nenhum foi genotipicamente falso suscetível à rifampicina (13/13; 100% de sensibilidade). Dois isolados sensíveis à rifampicina apresentavam mutações no gene rpoB (288/290; especificidade de 99,3%), as quais, no entanto, não são associadas à resistência a rifampicina. O LPA-plus não identificou resistência à isoniazida em três isolados fenotipicamente resistentes (23/26; 88,5% de sensibilidade) e detectou todos os isolados sensíveis à isoniazida (277/277; especificidade de 100%). Entre os 38 (11%) resultados fenotípicos inválidos, o LPA-plus identificou 31 isolados sensíveis à rifampicina e à isoniazida, um resistente à isoniazida e seis como micobactérias não tuberculosas. Conclusões: O LPA-plus mostrou excelente concordância (≥91%) e acurácia (≥99%). Sua implementação pode acelerar o diagnóstico da tuberculose multirresistente, produzir número significativamente maior de resultados válidos do que o teste fenotípico de suscetibilidade aos antimicrobianos e fornecer informações adicionais sobre o nível de resistência aos fármacos.

A Brazilian university hospital position regarding transplantation criteria for HIV-positive patients according to the current literature

Human immunodeficiency virus (HIV) infection was considered a contraindication for solid organ transplantation (SOT) in the past. However, HIV management has improved since highly active antiretroviral therapy (HAART) became available in 1996, and the long-term survival of patients living with HIV has led many transplant programs to reevaluate their policies regarding the exclusion of patients with HIV infection. Based on the available data in the medical literature and the cumulative experience of transplantation in HIV-positive patients at our hospital, the aim of the present article is to outline the criteria for transplantation in HIV-positive patients as recommended by the Immunocompromised Host Committee of the Hospital das Clínicas of the University of São Paulo.

Preanalytical conditions can interfere with M. tuberculosis detection by PCR in respiratory samples

OBJECTIVES: Tuberculosis is one of the most prevalent infections in humans. Although culture is the reference for diagnosis, its sensitivity is compromised, especially in paucibacillary samples. Because polymerase chain reaction (PCR) amplifies mycobacterial DNA, it is more sensitive than culture for the diagnosis of Mycobacterium tuberculosis (Mtb). However, its performance can be affected by intrinsic sample inhibitors and by the extraction/detection techniques used. METHODS: We evaluated the influence of preanalytical conditions on Mtb detection in samples of sputum (SPU), bronchoalveolar lavage (BAL), and pleural fluid (PF) using combinations of extraction/detection methods. Respiratory samples were prepared to contain different concentrations of red blood cells and nucleated cells to which increasing amounts of Mtb colonies were inoculated and submitted to PCR. RESULTS: Up to 102 CFU/ml of Mtb were detected in the SPU in all methods, except for the Roche extraction/detection method, regardless of the preanalytical sample condition. In BAL samples, medium and high concentrations of cells and high concentrations of red blood cells contributed to a lower Mtb detection, regardless of the extraction method used. In PF, red blood cells were the variable that most interfered with Mtb detection, with better recovery (102 CFU/ml) observed with the Qiagen/Nanogen combination. CONCLUSION: The choice of Mtb extraction and detection method is of fundamental importance for PCR analytical sensitivity, especially when paucibacillary samples and/or samples containing potential PCR inhibitors are analyzed.

Management of post-transplant Epstein-Barr virus-related lymphoproliferative disease in solid organ and hematopoietic stem cell recipients

Epstein-Barr virus (EBV)-related post-transplant lymphoproliferative disease (PTLD) is one of the most serious complications associated with solid organ and hematopoietic stem cell transplantation. PTLD is most frequently seen with primary EBV infection post-transplant, a common scenario for pediatric solid organ recipients. Risk factors for infection or reactivation of EBV following solid organ transplant are stronger immunosuppressive therapy regimens, and being seronegative for receptor. For hematopoietic stem cell transplantation, the risk factors relate to the type of transplant, human leukocyte antigen disparity, the use of stronger immunosuppressants, T-cell depletion, and severe graft-versus-host disease. Mortality is high, and most frequent in patients who develop PTLD in the first six months post-transplant. The primary goal of this article is to provide an overview of the clinical manifestations, diagnosis, accepted therapies, and management of EBV infection in transplant recipients, and to suggest that the adoption of monitoring protocols could contribute to a reduction in related complications.

Comparison of five methods for oxacillin susceptibility testing of Staphylococcus aureus isolates from cystic fibrosis patients / Comparação entre cinco métodos para avaliação de susceptibilidade à oxacilina em cepas de Staphylococcus aureus isoladas de pacientes com fibrose cística

Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) are now a worldwide problem. Cystic fibrosis (CF) patients are commonly colonized and infected by MRSA. Accurate oxacillin susceptibility testing is mandatory for the adequate management of these patients. We performed a comparison of the accuracy of different tests in CF isolates, including methicillin-susceptible S. aureus and MRSA with different SCCmec types, and using the mecA gene as the gold-standard. The sensitivity and specificity of oxacillin disc, Etest, and oxacillin agar screening plate were 100%. Sensitivity of the cefoxitin disc was 85% and specificity was 100%. For clinically relevant isolates, laboratories may consider the use of a combination of two phenotypic methods.

Staphylococcus aureus resistentes à oxacilina (MRSA) são, atualmente, um problema global. Pacientes com fibrose cística (FC) são frequentemente colonizados e infectados por MRSA. A realização de testes de susceptibilidade acurados é extremamente importante para o manejo da terapia antimicrobiana nesses indivíduos. Nesse estudo, realizamos comparação entre as acurácias de diversos testes de susceptibilidade à oxacilina, em cepas de S. aureus isoladas de pacientes com fibrose cística, tanto sensíveis como resistentes à oxacilina, com diferentes tipos de SCCmec, e utilizando a detecção do gene mecA como método padrão. A sensibilidade e a especificidade do disco de oxacilina, do Etest, e da placa de agar screening com oxacilina foram de 100%. A sensibilidade do disco de cefoxitina foi 85%, com especificidade de 100%. Em cepas clinicamente relevantes, a utilização combinada de mais de um método deveria ser considerada.

Diagnóstico precoce e os fatores associados às infecções sexualmente transmissíveis em mulheres atendidas na atenção primária / Early diagnosis and correlations of sexually transmitted infections among women in primary care health services

INTRODUÇÃO: Infecções Sexualmente Transmissíveis (IST) em mulheres permanecem um desafio para a Saúde Pública: elevada prevalência, dificuldade para implantação de estratégias de diagnóstico precoce e elevada ocorrência de sequelas. OBJETIVO: Identificar a prevalência de IST em usuárias de um serviço de atenção primária à saúde em São Paulo. MÉTODOS: Mulheres de 18 a 40 anos foram convidadas para realizar autocoleta de secreção vaginal para a detecção de Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae e Trichomonas vaginalis por meio de Reacão em Cadeia da Polimerase (PCR). As mulheres também responderam a um questionário com questões demográficas e relativas à história sexual face a face ou autoaplicado por meio de um computador. RESULTADOS: Das 781 mulheres incluídas no estudo, as prevalências obtidas foram: Chlamydia trachomatis (8,4 por cento), Neisseria gonorrhoeae (1,9 por cento) e Trichomonas vaginalis (3,2 por cento). A positividade para pelo menos uma das três IST foi de 13 por cento. As variáveis associadas independentemente com maior risco de IST foram: idade menor que 20 anos, mais de dois parceiros sexuais na vida e percepção de risco para IST; o uso de preservativo como método contraceptivo foi um fator protetor. CONCLUSÃO: A prevalência encontrada em usuárias indica a necessidade da implantação de estratégias de rastreamento de IST em serviços de atenção primária.

INTRODUCTION: Sexually Transmitted Infections (STIs) in women remain a public health challenge due to high prevalence, difficulties to implement early diagnosis strategies and high rates of complications. OBJECTIVE: Identify the prevalence of STIs among users of a primary health care clinic in São Paulo. METHODS: Women, 18 to 40 years of age, were invited to self-collect vaginal specimens to be tested for Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, and Trichomonas vaginalis by Polymerase Chain Reaction (PCR). Women were also invited to answer a demographic and sexual history questionnaire, either on the computer or face-to-face. RESULTS: The prevalence of STIs obtained from the 781 women included in the study was: Chlamydia trachomatis: 8.4 percent, Neisseria gonorrhoeae: 1.9 percent, and Trichomonas vaginalis: 3.2 percent. Thirteen percent tested positive for at least one out of the three STIs. The variables associated independently with a higher risk of STIs were: age under 20-years-old, more than two lifetime sexual partners, and self-perception of STI risk. The use of condoms as a contraceptive method proved to be a protective factor. CONCLUSION: The high prevalence found among these women indicates the need for the implementation of STI screening strategies in primary care settings in Brazil.

Vírus varicela zoster em paralisia de Bell: estudo prospectivo / Varicella zoster virus in Bell's palsy: a prospective study

Although Bell's palsy is the major cause of acute peripheral facial palsy, its pathogenesis remains unknown. Reactivation of the varicella zoster virus has been implicated as one of the main causes of Bell's palsy, however, studies which investigate the varicella zoster virus reactivation in Bell's palsy patients are mostly Japanese and, therefore, personal and geographic characteristics are quite different from our population. AIMS: To determine varicella zoster virus frequency in saliva samples from patients with Bell's palsy, using PCR. MATERIAL AND METHOD: One hundred seventy one patients with acute peripheral facial palsy were prospectively enrolled in this study. One hundred twenty were clinically diagnosed with Bell's palsy, within one week of onset of the disease and no previous anti-viral therapy. We had 20 healthy adults as controls. Three saliva samples were collected from patients and controls at initial examination and at one and two weeks later. The detection of the varicella zoster virus DNA was performed using PCR. RESULTS: Varicella zoster virus was detected in two patients (1.7 percent). The virus was not identified in saliva samples from the controls. CONCLUSIONS: Varicella zoster virus was detected in 1.7 percent of saliva samples from patients with Bell's palsy, using PCR.

Embora a paralisia de Bell seja o tipo mais frequente de paralisia facial periférica,sua causa ainda é objeto de inúmeros questionamentos. A reativação do vírus varicela zoster tem sido considerada uma das principais causas da paralisia de Bell, porém, os poucos trabalhos que estudam a prevalência do VVZ como agente etiológico da PB são japoneses, o que determina características geográficas e populacionais bastante díspares de nossa população. OBJETIVOS: Verificar a frequência do vírus varicela zoster em saliva de indivíduos com PB, pela técnica de PCR. MATERIAL E MÉTODO: Estudo prospectivo com 171 pacientes com PFP, sendo 120 pacientes portadores de paralisia de Bell, com até uma semana de evolução, sem uso prévio de drogas antivirais. O grupo controle foi composto de 20 adultos sadios. Nestes indivíduos foram coletadas três amostras de saliva em semanas consecutivas, para pesquisa de DNA viral pela técnica de PCR. RESULTADOS: O vírus varicela zoster foi encontrado em amostras de saliva de dois pacientes com paralisia de Bell (1,7 por cento). Nenhum vírus foi identificado no grupo controle. CONCLUSÃO: Foi verificada frequência de 1,7 por cento para vírus varicela zoster em amostras de saliva de pacientes com paralisia de Bell, pela técnica de PCR.

Metallo-beta-lactamases among imipenem-resistant Pseudomonas aeruginosa in a Brazilian university hospital

INTRODUCTION: Imipenem-resistant Pseudomonas aeruginosa resulting from metallo-β-lactamases has been reported to be an important cause of nosocomial infection and is a critical therapeutic problem worldwide, especially in the case of bacteremia. OBJECTIVES: To determine the frequency of metallo-β-lactamases among imipenem-resistant Pseudomonas aeruginosa isolates and to compare methods of phenotypic and molecular detection. METHODS: During 2006, 69 imipenem-resistant Pseudomonas aeruginosa samples were isolated from blood and tested for metallo-β-lactamase production using both phenotypic methods. Minimal Inhibitory Concentratrions (MIC) (μg/mL) was determined with commercial microdilution panels. Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE) was performed among metallo-β-lactamase producers. RESULTS: Of all the blood isolates, 34.5 percent were found to be imipenem-resistant Pseudomonas aeruginosa. Positive phenotypic tests for metallo-β-lactamases ranged from 28 percent-77 percent, and Polymerase Chain Reaction (PCR) were positive in 30 percent (of note, 81 percent of those samples were blaSPM-1 and 19 percent were blaVIM-2). Ethylenediamine tetracetic acid (EDTA) combinations for the detected enzymes had low kappa values; thus, care should be taken when use it as a phenotypic indicator of MBL. Despite a very resistant antibiogram, four isolates demonstrated the worrisome finding of a colistin MIC in the resistant range. PFGE showed a clonal pattern. CONCLUSION: Metallo-β-lactamases among imipenem-resistant Pseudomonas aeruginosa were detected in 30.4 percent of imipenem-resistant Pseudomonas aeruginosa isolates. This number might have been higher if other genes were included. SPM-1 was the predominant enzyme found. Phenotypic tests with low kappa values could be misleading when testing for metallo-β-lactamases. Polymerase Chain Reaction detection remains the gold standard.

Chlamydia pneumoniae and stroke: is there a direct relationship? / Chlamydia pneumoniae e acidente vascular cerebral aterotrombótico: existe relação direta?

OBJECTIVE: To investigate the possible relationship between atherothrombotic stroke and Chlamydia pneumoniae. METHOD: 150 patients with carotid atherothrombosis were enrolled. The casuistic was divided in three groups: ischemic stroke (IS): 65 patients; transient ischemic attack (TIA): 26 patients; and control: 59. The IS or TIA onset was up to 30 days from the beginning of the study. Carotid atheromatoses was diagnosed by Doppler-ultrasonography. Patients with cardioembolic risk or non-atherothrombotic origin were excluded. Comparisons were done between the three groups, and within each group according to the different age sub-groups, to the main arteries affected, and to the atherogenic risk factors. Bacteria detection was done using polimerase chain reaction. RESULTS: Only one patient tested positive for C. pneumoniae belonging to the control group. CONCLUSION: These results do not suggest that C. pneumoniae participated in the onset of IS or TIA or that it has a role in carotid plaque destabilization.

OBJETIVO: Investigar a possível relação entre Chlamydia pneumoniae e acidente vascular cerebral aterotrombótico (AVC). MÉTODO: 150 pacientes com aterotrombose carotídea foram estudados. A casuística foi dividida em 3 grupos: AVC: 65 pacientes; ataque isquêmico transitório (AIT): 26 pacientes e controles: 59. O início do AVC ou AIT era até 30 dias da inclusão no estudo. A ateromatose carotídea foi diagnosticada por ultrassonografia com Doppler. Os pacientes com risco cárdio-embólico ou sem evidência de aterotrombose foram excluídos. Foram estabelecidas comparações entre os 3 grupos e dentro de cada grupo, formado sub-grupos de acordo com diferentes idades, território arterial comprometido e fatores de risco. A detecção da bactéria foi feita por reação de polimerização em cadeia. RESULTADOS: Somente um paciente, pertencente ao grupo controle, teve resultado positivo. CONCLUSÃO: Estes achados não sugerem que a C. pneumoniae participe no desencadeamento do AVC ou AIT ou que tenha papel na desestabilização da placa.

Guidelines on management of human infection with the novel virus influenza A (H1N1): a report from the Hospital das Clínicas of the University of São Paulo

The pandemic novel influenza A (H1N1) infection was considered widespread in Brazil on July, 2009. Since then, 9.249 cases were confirmed in Brazil, most of them concentrated in São Paulo. The Hospital das Clínicas of the University of São Paulo is a reference center for H1N1 cases in São Paulo. The purpose of this review is to analyze the evidence concerning diagnosis, prevention, and treatment of novel influenza A (H1N1) infection. In addition, we propose guidelines for the management of this pandemic emphasizing Hospital das Clínicas "bundles" for the control of the pandemic novel influenza A (H1N1).

Epidemiology of human infection with the novel virus influenza A (H1H1) in the Hospital das Clínicas, São Paulo, Brazil - june-september 2009

The pandemic novel influenza A (H1N1) infection was considered widespread in Brazil on July 16, 2009. Since then, 46,810 cases of acute respiratory syndrome have been reported in Brazil, most of them concentrated in São Paulo. Through September 16, we have confirmed 9,249 cases of novel influenza A H1N1in Brazil, including 699 deaths. The mortality rate observed in Brazil is 0.47/100,000 inhabitants and varies according to region. In this period, São Paulo registered 3733 cases (40.3 percent of the total) of novel influenza A (H1N1) infection and 327 deaths, reflecting a mortality rate of 0.79/100,000 inhabitants. The Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo (HC) is a reference center for H1N1 cases in São Paulo. During the winter of 2009, 472 patients in this hospital were diagnosed with H1N1 infection; of these, 210 were admitted, and 16 died. To control this pandemic and to provide adequate care for these patients, the Hospital das Clínicas implemented "bundles" including prevention strategies, an epidemiologic surveillance service, availability of fast diagnosis, antiviral treatment and training of staff. The purpose of this manuscript is to describe the epidemiologic features of novel human influenza A (H1N1) infection in the Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo during the winter period of the 2009 pandemic.

Chlamydia pneumoniae and symptomatic carotid atherosclerotic plaque: a prospective study

OBJECTIVE: To investigate the possible link between symptomatic carotid atherosclerotic plaque and Chlamydia pneumoniae. BACKGROUND: Recently, several studies have demonstrated that there may be a possible link between Chlamydia pneumonia and carotid atherosclerosis, however the real role of Chlamydia pneumoniae is not completely understood. METHOD: This is a prospective study with a total of 52 patients analyzed. All patients had been submitted to endarterectomy, and had suffered thrombotic ischemic stroke or transient ischemic attack up to 60 days prior to the surgery. Every patient presented carotid stenosis over 70 percent. The plaque was removed during the surgery and the laboratory exams were immediately done. Evaluation of Chlamydia pneumoniae DNA was done using polymerase chain reaction (PCR). RESULTS: The PCR analyses of all 52 patients were negative for Chlamydia pneumoniae. CONCLUSION: These initial results do not show a relationship between Chlamydia pneumoniae and symptomatic carotid atherosclerotic plaque.

OBJETIVO: Investigar a possível relação entre placa sintomática de carótidas e Chlamydia pneumoniae. INTRODUÇÃO: Vários estudos têm demonstrado uma possível relação entre Chlamydia pneumonia e aterosclerose carotídea, entretanto o papel definitivo da bactéria não é totalmente conhecido. Há muita especulação: poderia iniciar o processo aterosclerótico, agravá-lo ou desestabilizá-lo. MÉTODO: Estudo prospectivo com um total de 52 pacientes, endarterectomizados e previamente acometidos de acidente vascular cerebral isquêmico ou crise isquêmica transitória, em até 60 dias antes da cirurgia. Todos os pacientes apresentavam estenose carotídea superior a 70 por cento. Os testes laboratoriais foram realizados imediatamente após a endarterectomia. A Chlamydia pneumoniae foi pesquisada através de exame de DNA com reação de polimerização em cadeia (PCR). RESULTADOS: O PCR dos 52 pacientes foram negativos para Chlamydia pneumoniae. CONCLUSÃO: Estes resultados iniciais não mostram relação entre Chlamydia pneumoniae e desestabilização de placa aterosclerótica das carótidas.

Pesquisa do vírus herpes simples na saliva de pacientes com paralisia facial periférica de Bell / Herpes simplex virus in the saliva of peripheral Bell's palsy patients

Os primeiros herpes-vírus a serem descritos foram os tipos 1 e 2, cuja denominação é herpes simplex 1 e 2 ou HSV-1 e HSV-2. Estes vírus possuem características biológicas particulares, tais como a capacidade de causar diferentes tipos de doenças, assim como estabelecer infecções latentes ou persistentes por toda a vida dos hospedeiros e de serem reativados causando lesões que podem se localizar no sítio da infecção primária inicial ou próxima a ele. Postula-se que a reativação deste vírus no gânglio geniculado esteja relacionada com a paralisia de Bell. Nesta situação, os vírus, que estariam latentes neste gânglio, sofreriam reativação e replicação difundindo-se pelo nervo facial e seus ramos, dentre eles o nervo corda do tímpano, que ao estimular a secreção salivar possibilitaria a identificação do DNA viral na saliva dos pacientes. Até recentemente, um grande número de pacientes eram diagnosticados como portadores de uma forma desta paralisia, chamada de idiopática ou de paralisia de Bell. Com o advento da técnica de estudo do DNA viral pelo método da reação da polimerase em cadeia (PCR), diversos autores encontraram DNA do vírus herpes simplex tipo I no líquido cefalorraquidiano, na secreção lacrimal, na saliva e nos gânglios geniculados de pacientes com paralisia de Bell. OBJETIVO: observar a prevalência do vírus herpes simplex tipo I pela técnica de PCR, na saliva de pacientes com PFP de Bell, relacionando-a com a evolução clínica destes casos. METODOLOGIA: Avaliamos 38 pacientes portadores de Paralisia Facial Periférica de Bell, que foram submetidos a anamnese, exame médico geral e otorrinolaringológico e coleta de saliva para detecção do DNA viral pela técnica de PCR. O grupo controle correspondeu a 10 adultos normais. RESULTADOS: Obtivemos positividade para o DNA viral em 11 casos dos 38 avaliados, o que corresponde a 29 por cento da amostra. Este resultado foi estatisticamente significante se comparado ao grupo controle, no qual não foi obtido nenhum caso de positividade. CONCLUSÃO: Concluiu-se que a presença do HSV-1 na saliva de pacientes portadores de PFP de Bell indica que a reativação viral pode ser a etiologia desta doença. A detecção do vírus na saliva destes pacientes não influencia o prognóstico da doença.

The first herpes virus to be described was types 1 and 2, whose denomination is herpes simplex 1 and 2 or HSV -1 and HSV -2. These viruses have specific biological characteristics, such as the ability to cause different kinds of diseases, as well as to establish host's latent or persistent lifetime infections and also of being reactivated, causing lesions that can be located at the same site of the initial primary infection or close to it. It is suggested that this virus reactivation in the geniculate ganglion may be related to Bell's palsy. In this situation, the viruses that would be latent in this ganglion, would suffer reactivation and replication, then be diffused through the facial nerve and its branches, among them the chorda tympani nerve, which by stimulating salivary secretion would enable the identification of the viral DNA in the patientsÆ saliva. Until recently, a great number of patients was diagnosed as holders of this kind of paralysis, named idiopathic or Bell's palsy. With the introduction of the technique studying the viral DNA by Polymerase Chain Reaction (PCR), several authors have found herpes simplex virus type I DNA in the cerebrospinal fluid, in the lachrymal secretion, in the saliva and in the geniculate ganglia of patients with Bell's palsy. AIM: observe the occurrence of herpes simplex type I virus using PCR technique in the saliva of patients with BellÆs palsy and relating it to the clinical evolution of these cases. METHODOLOGY: We evaluated 38 patients with Bell's palsy submitted to anamnesis, clinical and ENT examination and saliva sampling for viral DNA detection by PCR technique. The control group was ten normal adults. RESULTS: We found positive viral DNA in 11 cases out of the 38, which corresponded to 29 percent of the sample. This result was statistically significant if compared to the control group, in which we did not find any positive case. CONCLUSION: The end result was that the presence of HSV -1 in the saliva of patients with Bell's palsy indicating that the viral reactivation can be the etiology of this disease. The detection of the virus in these patients saliva does not influence the disease prognosis.

Identificaçåo de bactérias gram positivas resistentes à vancomicina / Identification of vancomycin resistant gram positive bacteria

Infecçöes por bactérias Gram positivas resistentes à vancomicina têm surgido com aior frequência nos últimos anos, causando problemas clínicos e terapêuticos. Os laboratórios de microbiologia devem adequar-se técnicamente para detecçåo e identificaçåo destes microorganismos. Apresentamos uma revisåo bibliográfica sobre a importância clínica destes agentes bem como um fluxograma simplificado para sua correta identificaçåo

Avaliaçåo do "E Teste", um novo método para determinaçåo da concentraçÅo inibitória mínima de antimicrobianos / Evaluation of the \"E Test\", a new method for minimal inhibitory concentration (MIC) determination

O "E Teste" é um novo conceito para testes quantitativcos de sensibilidade, baseado em um gradiente pré definido do antibiótico incorporado em uma fita plástica. É usado para determinar a concentraçåo inibitória mínima (MIC) de antibióticos frente a bactérias crescendo em ágar. Os resultados obtidos pelo "E Teste" foram avaliados comparando-se com o método de diluiçåo em ágar e com o método da difusåo do disco, frente a 5 antimicrobianos e 50 bactérias. A correlaçåo entre as MICs pelos métodos da diluiçåo e "E Teste" foi boa, com 95,6 por cento dos resultados dentro de uma faixa de até 2 log2 das diluiçöes das drogas, num total de 250 testes. O "E Teste" é uma técnica versátil e confiável para determinaçåo de MICs de diferentes antibióticos em Laboratórios Clínicos de rotina

Infecçäo por Malassezia fufur: um alerta / Systemic infections by Malassezia furfur: alert

A Malassezia furfur é um fungo saprófita, lipofílico, encontrado frequentemente na pele de seres humanos, sendo responsável pela pitiríase versicolor, doença dermatológica benigna. Os casos de fungemia já descritos estäo frequentemente relacionados ao uso de cateteres centrais, à administraçäo de intralípides e ao tempo prolongado de hospitalizaçäo, principlamente em neonatos. Relatamos o isolamento da M.furfur, ao acaso a partir de mielocultura, em criança de 1 ano e 8 meses, portadora de Histiocitose X, em tratamento quimioterápico no Hospital das Clínicas da FMUSP (HC-FMUSP)

Epidemilogia molecular de infecçöes hospitalares sequenciais em uma unidade de terapia intensiva causada por cepas multiresistentes de Klebsiella pneumoniae / Molecular epidemiology of sequencial hospital infections in an intensive care unit by multiresistant Klebsiella pneumoniae

Foram estudadas, durante o período de um ano, 17 amostras de Klebsiella pneumoniae isoladas de pacientes internados em uma unidade de terapia intensiva e com infecçöes hospitalares diversas, com o objetivo de se averiguar a identidade das cepas envolvidas. A investigaçäo laboratorial envolveu a caracterizaçäo bioquímica, a determinaçäo do padräo de sensibilidade aos antimicrobianos e análise do conteúdo de DNA plasmidial dos microrganismos isolados. Os resultados mostraram que a análise do conteúdo plasmidial é uma metodologia bastante útil para diferenciar amostras bacterianas multirresistentes pertencentes a uma única espécie, bem como é mais sensível que a biotipagem e o antibiograma. Constatou-se também que a metodologia da Biologia Molecular permitiu o rastreamento das cepas envolvidas pelo estudo da disseminaçäo de plasmídios "R". Concluiu-se que a implantaçäo da metodologia da genética molecular vem proporcionar sistema preciso e confiável de vigilância epidemiológica facilitando a execuçäo de medidas de ordem técnico-administrativas no controle e prevençäo das infecçöes hospitalares

Perfil plasmidial como marcador epidemiológico na investigaçäo de infecçöes hospitalares / Plasmid profiles as epidemiologic markers in the research of nosocomial infections

A análise do perfil plasmidial vem se tornando um método muito útil na tipagem de microrganismo para o estudo epidemioológico das infecçöes hospitalares. Tanto bacilos Gram-negativos como estafilococos têm sido estudados utilizando-se esta técnica. A importância dos plasmídios bacterianos nas infecçöes hospitalares deve-se principalmente à capacidade de transferência dos gens de resistência aos antimicrobianos (plasmídios R) entre os microrganismos. Na investigaçäo de surtos de infecçäo, a análise do perfil plasmidial é um método rápido e eficiente para o rastreamento da cepa epidêmica e tem apresentado vantagens sobre outros sistemas de tipagem. As análises com endonucleases de restriçäo têm possibilitado a compreensäo de como a transferência de plasmídios R várias espécies bacterianas pode contribuir para a resistência endêmica aos antibióticos em determinada instituiçäo. A relevância da análise do perfil plasmidial para o controle das infecçöes hospitalares, bem como para o rastreamento da resistência aos antimicrobianos, e a investigaçäo de surtos continuará a crescer na medida da evoluçäo do estudo da biologia molecular, ecologia e epidemiologia dos plasmídios bacterianos

Atividade in vitro do ciprofloxacin frente a microrganismos multirresistentes isolados de casos de infecçäo hospitalar / In vitro activity of ciprofloxacin against isolated multiresistant microorganisms of cross infection cases

Apresenta-se um estudo da atividade inibitória in vitro do ciprofloxacin, um novo derivado carboxiquinolono, frente a 240 cepas de microrganismos multirresistentes isolados de casos de infecçäo hospitalar. Foram utilizadas 42 cepas de Acinetobacter calcoaceticus, 51 de Pseudomonas aeruginosa, 49 de Serratia marcescens, 50 de Klebsiella pneumoniae e 48 de Staphylococcus aureus, as quais foram submetidas às provas de sensibilidade pela técnica da diluiçäo em ágar e da difusäo do disco em ágar. Os seguintes valores foram considerados para a interpretaçäo dos resultados: hallo <- 15mm, resistente (MIC > 2,0microng/ml); halo de 16 a 20mm, intermediário (1,0 < MIC <- 2,0 microng/ml); halo >- 21mm, sensível (MIC <- 1,0 microng/ml). Os resultados mostraram sensibilidade para 93,4% das cepas; 4,1% apresentaram resultados na faixa intermediária, 2 e 2,5% foram resistentes, sendo que, destas, maior incidência ocorreu frente a amostras de A. calcoaceticus. Conclue-se que, do ponto de vista laboratorial, o ciprofloxacin está indicado na terapêutica de infecçöes causadas por bactérias consideradas multirresistentes