Efeito de diferentes formas de cultivo na ação do óxidonítrico na maturação e na integridade da membranaplasmática de complexos cumulus-oócito em bovinos / Influence of different forms of culture on the nitric oxide action on maturation andmembrane integrity on bovine cumulus-oocyte complex

O objetivo do presente estudo foi avaliar se diferentes formas de cultivo interferem no efeito do óxido nítrico (NO)sobre a maturação e a integridade da membrana plasmática do complexo cumulus-oócito de bovinos. Para tanto,realizou-se cultivo em gotas sob óleo mineral ou em placas de quatro poços com a adição de diferentes concentraçõesde nitroprussiato de sódio (SNP, doador de óxido nítrico). Não foi observada diferença (P > 0,05) entre as formas decultivo quando se avaliou a integridade de membrana plasmática e a expansão das células do cumulus (CC). Contudo,os oócitos dos grupos controle e os cultivados na presença de 10-3 M de SNP, ambos cultivados em placa, apresentarammaior porcentagem de membrana íntegra do que os mesmos tratamentos cultivados em óleo mineral (P < 0,05).Observou-se que a adição de 10-3 M de SNP diminuiu o grau de expansão das CC e de integridade da membranaplasmática dos oócitos, tanto no cultivo em gota sob óleo quanto em placa, diferindo dos outros grupos (P < 0,05).Semelhante à expansão, a forma de cultivo não interferiu na extrusão do primeiro corpúsculo polar, sendo que a adiçãode 10-3 M de SNP inibiu a extrusão em ambos os sistemas (P < 0,05). Houve um efeito dose-resposta na concentraçãode NO no meio de maturação em ambos os tipos de cultivo (P < 0,05), sendo que esta foi maior no meio de cultivo sobóleo, exceção feita quando se adicionou 10-3 M de SNP, tratamento no qual não houve diferença nos tipos de cultivoempregados. Estes dados mostram que o sistema de cultivo não interferiu na ação do NO na maturação in vitro de COCbovinos, mas interfere na integridade da membrana plasmática do oócito.

The aim of the present study was to evaluate the influence of different forms of in vitro culture on the nitric oxide actionin maturation and membrane integrity on bovine cumulus-oocyte complex. No significant effect was observed betweendifferent forms of culture (mineral oil vs plate; P > 0.05), as much for membrane integrity as for expansion of the CC.However, it was observed that oocytes of the groups control and 10-3 M of SNP, cultivated in plate, had presented greaterpercentage of cell with maintenance of membrane integrity than same treatments cultivated in drop. The addition of10-3 M of SNP showed an inhibitory effect on the expansion and membrane integrity of CC and oocytes in both, culturein drops under oil and plate (P < 0.05). The culture form did not intervene with the extrusion of the first polar corpuscleand the addition of 10-3 M of SNP inhibited this extrusion in the both systems (P < 0.05). There was a dose-responseeffect on the concentration of NO in the maturation medium in both types of cultivation (P < 0,05), and this was higherin the culture medium under oil, except when added 10-3 M of SNP, treatment in which there was no difference in thetypes of cultivation employed. (P<0.05). These data demonstrate that the culture system did not intervene with theaction of the NO in the maturation in vitro of bovine COC, but intervened with the integrity of the plasmatic membraneof the oocyte.

Concentração de nitrito endometrial e a ocorrência de patologias uterinas em vacas / Endometrial nitrite concentration and the occurrence of uterine pathologies of cows

Relacionou-se a concentração de nitrito com a ocorrência de enfermidades uterinas. Lavado intrauterino de 1ml de PBS foi realizado em 25 peças uterinas de vacas vazias para mensuração da concentração de nitrito pela reação de Griess. Elevada concentração de nitrito exibiu relação significativa com distrofia angiomatosa (157,57±108,80mM), endometrite (102,96±87,58mM) e fibrose periglandular (99,15±89,75mM); e não significativa com e hiperplasida endometrial cística (94,07±18,89mM) e adenomiose (77,40±81,25mM). Contudo, elevada concentração de nitrito mostrou relação significativa com adenomiose acentuada profunda pelo teste t. Os resultados indicam que a síntese de óxido nítrico está elevada nessas enfermidades.

The occurrence of uterine pathologies was evaluated considering uterine nitrite concentration. The uterus of 25 non pregnant cows was washed with 1ml of PBS to measure the nitrite concentration using the Griess reaction . There was significant relationship between high nitrite concentration with angiomatosis dystrophy (157,57 ±108,80mM), endometritis (102,96±87,58mM) and periglandular fibrosis (99,15±89,75mM). No relation was found between nitrite concentration and cystic endometrial hyperplasia (94,07±18,89mM) and adenomyosis (77,40±81,25mM). However, high nitrite concentration showed a significant relationship with deep accentuate adenomyosis by t test. The data suggest that nitric oxide synthesis is elevated in these illnesses.