Lentivirus vectors fail to deliver transgenes into bovine zygotes after co-incubation with sperm during in vitro fertilization / [Lentivírus falham na entrega de transgenes em zigotos bovinos após coincubação com espermatozoide, durante fertilização in vitro]

As vantagens dos animais transgênicos têm sido demonstradas em diferentes aplicações, entretanto muitas metodologias usadas para gerar animais geneticamente modificados (GM) apresentam baixas taxas de eficiência. O objetivo deste estudo foi avaliar a entrega dos vetores lentivirais (VLs) em zigotos durante a fertilização in vitro (FIV), para gerar embriões GM, com o gene da proteína verde fluorescente (GFP) ou do fator IX de coagulação humana (FIX). Vetores lentivirais com os genes GFP (pLGW-GFP-LV) ou FIX (pLWE2-FIX-LV) foram utilizados na FIV ou na cultura de embriões in vitro (CIV). A coincubação de pLWE2-FIX-LV com espermatozoides e complexos oócitos-células do cumulus (COCs) durante a FIV diminuiu (P<0,05) as taxas de clivagem e de blastocistos, enquanto com pLGW-GFP-LV diminuiu (P<0,05) a taxa de blastocisto quando se comparou ao controle sem VL. A coincubação de pLWE2-FIX-LV e pLGW-GFP-LV com presumíveis zigotos durante a CIV não afetou (P>0,05) o desenvolvimento embrionário. A expressão da proteína GFP não foi detectada em embriões após a coincubação de FIV ou CIV, embora as células do cumulus expressassem a proteína até o dia oito de cultivo in vitro. Reações em cadeia da polimerase (PCR) não detectaram os genes GFP ou FIX em embriões, mas ambos foram detectados em células do cumulus. Assim, a coincubação de VL com espermatozoide bovino e COCs não é eficaz para produzir embriões geneticamente modificados por meio de FIV.(AU)

Quantificação do DNA e genotipagem de biópsias de embriões bovinos Gir e Girolando produzidos in vitro / DNA quantification and genotyping of biopsies obtained from Gyr and Girolando in vitro produced bovine embryos

A biópsia embrionária associada à genotipagem permite a obtenção de informações genômicas antes mesmo da transferência dos embriões. Neste estudo, foram avaliadas amostras biopsiadas de blastocistos bovinos transferidos para receptoras (n=47), sob a hipótese de que a raça (Gir ou Girolando), o estádio embrionário (blastocisto ou blastocisto expandido) e a competência para estabelecimento de prenhez (positiva ou negativa) afetariam a quantidade e a qualidade do DNA da amostra obtida. O DNA foi extraído, amplificado, quantificado por eletroferograma e genotipado. O parâmetro call rate (CR) foi adotado para mensurar a qualidade da genotipagem. Obteve-se concentração de DNA de 86,07±171,66ng/µL e CR 0,73±0,17. O CR não variou em função da quantidade de DNA nas amostras. As variáveis raça e estádio embrionário não influenciaram a concentração de DNA, nem o CR. Houve efeito da prenhez sobre o CR (P=0,0187), mas, como houve maior CR nas amostras provenientes do grupo prenhez negativa, não foi possível associar esse parâmetro à qualidade embrionária. Concluiu-se que a raça e a qualidade embrionária não afetam os parâmetros aqui estudados em amostras embrionárias, ou seja, embriões com maiores chances de implantação não refletem alta qualidade nas amostras de biópsia genotipadas.(AU)

Embryo biopsy associated with genotyping allows genomic information before embryo transfer. In this study, blastocyst biopsy samples from embryos transferred to recipients (n= 47) were evaluated, under the hypothesis that breed (Gyr or Girolando), embryonic stage (blastocyst or expanded blastocyst) and competence to establish pregnancy (positive or negative) would affect the quantity and DNA quality of samples. DNA was extracted, amplified, quantified by electropherogram and genotyped. The parameter call rate (CR) was used to measure the quality of genotyping. DNA concentration of 86.07±171.66ng/µl, and CR 0.73±0.17 was obtained. CR did not vary according to the amount of DNA in the samples. The variables breed and embryonic stage had no influence on DNA concentration or CR. There was pregnancy effect on the CR (P= 0.0187), but since there was a higher CR in the samples from the negative pregnancy group, it was not possible to associate this parameter with the embryonic quality. We conclude that the breed and embryo quality do not affect the evaluated parameters in embryonic samples. Embryos with higher chances of implantation do not reflect high quality in embryo biopsy genotyped samples.(AU)

Cloprostenol administration in the first week postpartum reduces expression of oxytocin receptors in the endometrium in Holstein-Zebu cows / Administração de cloprostenol na primeira semana pós-parto pode reduzir a expressão de receptores de ocitocina no endométrio de vacas mestiças Holandês-Zebu

The present study investigated the hormonal profile and expression of prostaglandin F2α (PGF2α), oxytocin and estrogen receptors in uterine tissues of postpartum cows treated with cloprostenol. Twenty Holstein-Zebu crossbred cows were treated with saline solution (treatment CONT) or cloprostenol (treatment CLO), both administered two and five days postpartum. Blood samples were collected on days two, seven, 14, 21 and 28 postpartum for progesterone, PGF2α metabolite (PGFM) and estradiol determination, and endometrial biopsy was performed in order to quantify the expression of oxytocin receptor (OXTR), prostaglandin F receptor (PTGFR) and estrogen receptor 1 (ERS1) genes. In the CLO treatment, expression of OXTR was reduced (P<0.05) but no difference (P>0.05) between treatments was found for PTGFR and ERS1 expression. Estrogen concentrations increased progressively until day 14 (P<0.05) and the highest OXTR expression and lowest PTGFR expression were observed on day 14 (P<0.05) in both treatments. Serum PGFM concentrations were high throughout the experiment. In conclusion, cloprostenol administration at days two and five of postpartum seems to reduce OXTR expression in the endometrium in crossbred cows.(AU)

O presente estudo avaliou o perfil hormonal e a expressão gênica de receptores de prostaglandina F2α (PGF2α), ocitocina e estrógeno no endométrio de vacas pós-parto tratadas com cloprostenol. Vinte vacas mestiças Holandês-Zebu foram tratadas com solução salina (tratamento CONT, n = 10) ou cloprostenol (tratamento CLO, n = 10), ambos administrados dois e cinco dias após o parto. Amostras de sangue foram coletadas nos dias dois, sete, 14, 21 e 28 pós-parto para mensuração de progesterona, de metabólito de PGF2α (PGFM) e de estradiol, e foram obtidas biópsias endometriais para quantificar a expressão de PTGFR, OXTR e ESR1. No tratamento CLO, a expressão gênica de receptores de ocitocina foi menor (P<0,05). As concentrações de estrógeno aumentaram progressivamente até o dia 14 (P<0,05). A maior expressão de OXTR foi observada no dia 14 (P<0,05). A expressão de ESR1 foi semelhante entre os tratamentos (P>0,05). Os níveis de PGFM foram altos durante todo o estudo. Conclui-se que a administração de cloprostenol nos dias dois e cinco pós-parto parece diminuir a expressão de OXTR no endométrio em vacas mestiças.(AU)

Association between the sitting posture and back pain in college students / Asociación entre la postura en sentado y el dolor de espalda en estudiantes universitarios

Introduction: Back pain is a significant public health problem, its prevalence among college students is high, 30 - 70%; Its association with the sitting position in workers has been reported, but its study in university populations is limited. Objective: To evaluate the association between sitting posture with back pain among college students. Methods: Cross-sectional study. Explanatory variables: sociodemographic characteristics, adequate lighting in the classroom, sitting posture and type of chair. Outcome variables: neck or back pain the day of the survey, acute and chronic. Log-binomial regression models estimated prevalence ratios (PR) and their 95% CI. Results: 516 students from health deparment, age 21.3 ± 2.6 years, 69.2% women, 29,5% were in third year; 72,8% belong to middle socioeconomical level (3 and 4); and 18,4% of the students had an additional working activity. 87,8% of the classrooms had adequate lighting. Sitting posture with rounded back, feet supported on another chair and crossed legs was associated with neck pain the day of the survey (PR: 2.84), acute (PR: 2.41) and chronic (PR: 4.13). Other sitting posture with rounded back and crossed leg was associated with back pain the day of the survey (PR: 1.81) and acute (PR: 2.0). The screen time at the computer was associated with the outcome variables (PR 1.01 - 2.08). Conclusion: The results support the implementation of policies and institutional projects in order to prevent and control the back pain in college students.

Introducción: El dolor de espalda es un problema importante de salud pública, su prevalencia en estudiantes universitarios está entre el 30 al 70%; su asociacion con la postura sentada en trabajadores ha sido reportada, pero en poblacion universitaria su estudio es limitado. Objetivo: Evaluar la asociación entre la postura en sentado con el dolor de espalda en estudiantes universitarios. Métodos: Estudio de corte transversal. Variables explicatorias: características sociodemográficas, iluminación del salón de clase, postura en sedente y tipo de silla. Variables de salida: dolor de cuello o espalda el día de la encuesta, agudo y crónico. Modelos de regresión log-binomial estimaron las razones de prevalencia (RP) y sus IC95%. Resultados: Participaron 516 estudiantes de la facultad de salud, edad 21,3±2,6 años, 69,2% mujeres, 29,5% estaban en tercer año; y el 72,8% pertenecía a los estratos socioeconómicos 3 y 4, con un 18,4% de los estudiantes, que además de estudiar desarrollaban actividades laborales. El 87,8% de los salones de clase presentan iluminación adecuada. La postura en sedente con espalda redondeada, pies en otra superficie y pierna cruzada se asoció con dolor de cuello el día de la encuesta (RP: 2,84), agudo (RP: 2,41) y crónico (RP: 4,13). Otra postura sentada con espalda redondeada y una pierna cruzada se asoció con dolor de espalda el día de la encuesta (RP: 1,81) y agudo (RP: 2,0). El tiempo en computador se asoció con las variables de salida (RP 1.01 - 2,08). Conclusión: Los resultados apoyan la implementación de políticas y proyectos institucionales dirigidos a prevenir y controlar el dolor de espalda en universitarios.

Antioxidant and antifungal activities of Camellia sinensis (L) Kuntze leaves obtained by different forms of production / Atividade antioxidante e antifúngica das folhas de Camellia sinensis (L) Kuntze, obtidas por diferentes formas de produção

Abstract The antioxidant and anticandidal activities of leaves obtained from Camellia sinensis by non-fermentation (green and white teas), semi-fermentation (red tea) and fermentation method (black tea) were investigated. It was evaluated the total phenolic content by Folin-Ciocalteau assay; antioxidant capacities were evaluated in vitro using DPPH and ABTS radicals, hypochlorous acid and superoxide anion scavenger assays, induced hemolysis, lipid peroxidation by conjugated diene formation and myeloperoxidase activity. Anticandidal activity was performed on three strains of Candida spp. The results showed that non-fermented teas have a higher concentration of phenolic compounds, and then presented the best inhibitory activity of AAPH-induced hemolysis, the best inhibition of conjugated diene formation and more pronounced antioxidant activity in all tests. The highest anticandidal activity was obtained from fermented tea, followed by non-fermented tea. These results indicate that the antioxidant activity demonstrated has no direct relation with the anticandidal activity.

Resumo A atividade antioxidante e antifúngica das folhas obtidas da Camellia sinensis pelos métodos de não-fermentação (chás verde e branco), semi-fermentação (chá vermelho) e fermentação (chá preto) foram investigadas. Foi avaliado o conteúdo total de compostos fenólicos pelo método de Folin-Ciocalteau; a capacidade antioxidante foi avaliada in vitro usando os radicais artificiais DPPH e ABTS, o ácido hipocloroso, ensaios do ânion superóxido, hemólise induzida, peroxidação lipídica por formação de dienos conjugados e atividade da Mieloperoxidase. A atividade antifúngica foi obtida sobre três cepas de Candida spp. Os resultados obtidos mostram que os chás não fermentados apresentam a maior concentração de compostos fenólicos e também, apresentam a melhor atividade inibitória, sobre hemólise induzida por APPH, sobre a formação de dienos conjugados e a mais pronunciada atividade antioxidante sobre todos os testes. A maior atividade antifúngica foi obtida pelo chá fermentado, seguido pelo semi-fermentado e não-fermentados. Os resultados obtidos demonstram que a atividade antioxidante observada não apresenta relação com a atividade antifúngica.

Redescription of Campoletis sonorensis (Cameron, 1886) (Hymenoptera, Ichneumonidae, Campopleginae), parasitoid of Spodoptera frugiperda (J. E. Smith, 1797) (Lepidoptera, Noctuidae) in Brazil / Redescrição de Campoletis sonorensis (Cameron, 1886) (Hymenoptera, Ichneumonidae, Campopleginae), parasitoide de Spodoptera frugiperda (J. E. Smith, 1797) (Lepidoptera, Noctuidae) no Brasil

Abstract The fall armyworm Spodoptera frugiperda (Lepidoptera; Noctuidae) is a voracious pest of numerous crops of economic importance throughout the New World. In Brazil, its larvae are attacked by several species of parasitoid wasps, making them potential candidate as biological control agents against this pest. A survey of the parasitoid fauna on S. frugiperda in maize crops throughout Brazil reveals two species of Campoletis, which are morphologicaly very similar species. In this paper we combine these data with pictures from the type material of C. sonorensis and C. flavicincta, as well as their descriptions to provide a redescription to Campoletis sonorensis (Cameron, 1886) using for this both morphological characters and DNA Barcoding (Hebert et al., 2003) information, in an attempt to help with the correct identification of the taxa to improve biological control studies.

Resumo Spodoptera frugiperda é uma praga voraz de diversas culturas de importância econômica no Novo Mundo. No Brasil, suas larvas podem ser atacadas por diversas espécies de vespas parasitóides que são candidatos a agentes de controle biológico contra essa praga. Pesquisando os parasitóides da fauna de Spodoptera frugiperda em cultivos de milho no Brasil foram encontradas duas espécies do gênero Campoletis, muito similares morfologicamente. Este trabalho apresenta uma redescrição para Campoletis sonorensis usando caracteres morfológicos e DNA Barcoding (Hebert et al., 2003) com o objetivo de evitar erros de identificação desse grupo, aprimorando estudos de controle biológico.

Effects of simvastatin/ezetimibe on microparticles, endothelial progenitor cells and platelet aggregation in subjects with coronary heart disease under antiplatelet therapy

It is not known whether the addition of ezetimibe to statins adds cardiovascular protection beyond the expected changes in lipid levels. Subjects with coronary heart disease were treated with four consecutive 1-week courses of therapy (T) and evaluations. The courses were: T1, 100 mg aspirin alone; T2, 100 mg aspirin and 40 mg simvastatin/10 mg ezetimibe; T3, 40 mg simvastatin/10 mg ezetimibe, and 75 mg clopidogrel (300 mg initial loading dose); T4, 75 mg clopidogrel alone. Platelet aggregation was examined in whole blood. Endothelial microparticles (CD51), platelet microparticles (CD42/CD31), and endothelial progenitor cells (CD34/CD133; CDKDR/CD133, or CD34/KDR) were quantified by flow cytometry. Endothelial function was examined by flow-mediated dilation. Comparisons between therapies revealed differences in lipids (T2 and T3<T1 and T4 for total cholesterol, LDL-C, and triglycerides; P<0.002 for all), as well as for endothelial function (T2>T1 and T4, P=0.001). Decreased platelet aggregation was observed after aspirin (arachidonic acid, T1<T3 and T4, P=0.034) and clopidogrel (adenosine, T3 and T4<T1 and T2, P<0.0001) therapy. Simvastatin/ezetimibe diphosphate did not change platelet aggregation, the amount of circulating endothelial and platelet microparticles, or endothelial progenitor cells. Cardiovascular protection following therapy with simvastatin/ezetimibe seems restricted to lipid changes and improvement of endothelial function not affecting the release of microparticles, mobilization of endothelial progenitor cells or decreased platelet aggregation.

Anti-Escherichia coli activity of Brazilian plant extracts: New trends in Veterinary research / Atividade anti-Escherichia coli de extratos de plantas brasileiras: Novas tendências em pesquisa veterinária

Escherichia coli é uma bactéria presente no trato intestinal de animais de sangue quente. Entretanto, a perda do equilíbrio em sua relação com o hospedeiro pode causar doenças que levam a perdas econômicas, quando se trata de animais de produção, e perdas incalculáveis, quando se trata de animais silvestres. O presente estudo testou diversos extratos aquosos e orgânicos, obtidos de plantas da Amazônia brasileira, contra Escherichia coli (ATCC 25922). Usando o ensaio de disco difusão em ágar Mueller-Hinton (DDA), foram testados 1.791 extratos quanto à sua atividade antibacteriana. Os extratos que mostraram halo de inibição de crescimento bacteriano foram testados no modelo da microdiluição em caldo (MDBC) contra uma suspensão bacteriana preparada na escala de 0,5 McFarland para determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM). Dois extratos orgânicos (EB 127 e EB725) e dois extratos aquosos (EB 272 e EB 934) testados inibiram o crescimento bacteriano no modelo DDA. O extrato orgânico EB127, obtido de Microplumeria sp., apresentou CIM e CBM≥700mg/mL; o extrato aquoso EB272, obtido de Casearia sp., apresentou CIM=CBM=600mg/mL; o extrato orgânico EB725, obtido de Buchenavia sp., apresentou CIM=CBM<400mg/mL; e o extrato aquoso EB934, obtido de Caryocar sp., apresentou 400mg/mL

Tomografia computadorizada da matriz óssea mineralizada heteróloga fragmentada e metilmetacrilato na reparação de falhas ósseas segmentares produzidas em tíbia de coelhos / Computed tomography to evaluate the association of fragmented heterolog cortical bone and methylmethacrylate to repare segmental bone defect produced in tibia of rabbits

Foi realizada falha segmentar de 6mm na região metafisária medial da tíbia de 12 coelhos, seguida de preenchimento desta por matriz óssea mineralizada heteróloga fragmentada conservada em glicerina (98%) e metilmetacrilato autoclavado, bem como avaliação por meio da tomografia computadorizada de feixe cônico (cone beam) aos 30, 60 e 90 dias. Houve incorporação gradativa do implante no leito receptor em relação ao tempo em 100% dos casos, o que mostra ser este biologicamente compatível, ao promover reparação da falha óssea, sem sinais de infecção, migração e/ou rejeição, caracterizando-se, assim, como nova opção de substituto ósseo para preenchimento de falhas ósseas.

A 6mm segmental defect was performed on the metaphyseal region of the tibia of 12 rabbits and the autoclaved fragmented heterolog cortical bone conserved in glycerin (98%) and methylmethacrylate was used as a bone graft for the reconstruction. The graft was placed in the receptor bed and its integration was evaluated by computed tomography after 30, 60 and 90 days. There was gradual bone graft incorporation in the receptor bed during the time in 100% of the cases. Fragmented cortical bone heterograft and methylmethacrylate was biologically compatible and promotes bone defect reparation without signs of infection, migration and or rejection, featuring a new option of osseous substitute to fill in bone defects.

Políticas de inclusión educativa del discapacitado. barreras y facilitadores para su implementación: Bucaramanga, 2010 / Policies for including disabled people in education. obstacles and facilitating factors for their implementation: Bucaramanga, 2010

OBJETIVO: explorar factores barrera y facilitadores para la implementación de las políticas de inclusión educativa de la persona discapacitada en Bucaramanga, Colombia. METODOLOGIA: estudio descriptivo con participación de representantes de los entes gubernamentales, directivos de instituciones educativas y acudientes de personas en situación de discapacidad. Se analizaron barreras y facilitadores de orden físico, social, político y asistencial, que podrían determinar la implementación de las políticas mencionadas. La información se recolectó mediante entrevistas. RESULTADOS: participaron dos personas de los grupos entes gubernamentales, 32 directivos de instituciones educativas y 34 acudientes de personas en situación de discapacidad. Se identificaron como barreras la falta de estrategias de apoyo a las instituciones educativas, escasa o limitada capacitación docente en el tema, altos costos de las pensiones y actitud negativa frente a la discapacidad. Entre los facilitadores se cuentan la disponibilidad de cupos, inclusión del tema en la agenda política e interés familiar porque la persona en situación de discapacidad estudie. DISCUSION: los hallazgos proporcionan información útil para posteriores estudios sobre esta temática y muestran cómo se han desarrollado las acciones, así como la urgencia de establecer una relación directa entre la academia y el sector público para proponer estrategias de evaluación y reorientación de estas políticas.

OBJECTIVE: to explore the factors enabling or hindering the implementation of inclusive education policies for the disabled population of Bucaramanga. METHODOLOGY: a descriptive study, involving representatives from governmental agencies (EG), members of the faculty boards of educational institutions (DIE) and guardians of disabled individuals (APSD). Physical, social, and political obstacles and facilitating factors that could potentially determine the implementation of these policies were analyzed. Data was collected through interviews. RESULTS: there was a total of 2, 32, and 34 participants from the EG, DIE, and APSD groups respectively. Identified obstacles included: lack of strategies to support educational institutions, poor or limited teacher training, high tuition fees, and negative attitude towards disability. The facilitating factors included: availability of places, inclusion of this issue in the political agenda, and desire of the disabled individuals' families to provide them with education. DISCUSSION: These findings provide useful information for further research on this issue and show how action has been taken, as well as how urgent it is to establish a direct relationship between academia and the public sector to propose strategies for assessing and modifying these policies.

Efecto de tres modalidades de crioterapia sobre la temperatura de la piel durante las fases de enfriamiento y recalentamiento / Effects of three cold modalities on skin temperature during the cooling and rewarming phases

Introducción: La crioterapia es útil en el manejo de las lesiones músculo esqueléticas, debido a los efectos derivados del enfriamiento tisular, sin embargo, pocos estudios han evaluado la efectividad de distintas modalidades de crioterapia para mantener el enfriamiento después de la aplicación y los efectos de la actividad post-enfriamiento sobre la recuperación de la temperatura. Objetivo: Comparar los efectos de tres modalidades de crioterapia y de la actividad post-enfriamiento, sobre la recuperación de la temperatura de la piel. Métodos: Estudio experimental con 36 sujetos sanos aleatorizados en tres grupos: paquete de hielo, inmersión en agua helada o criomasaje. Las modalidades se aplicaron por 15min en la pantorrilla. Posteriormente, cada grupo se subdividió aleatoriamente en reposo o marcha seguida de reposo. Para el análisis se aplicaron t de student apareda y ANOVA de mediciones repetidas (α=0,05). Resultados: Las tres modalidades disminuyeron la temperatura de la piel, con un efecto mayor causado por el criomasaje (-27,6°C). Durante el recalentamiento los tres grupos aumentaron la temperatura, independientemente de la actividad post-enfriamiento (p<0,0001). La recuperación de la temperatura fue menor en el grupo de inmersión en agua helada. Solo el grupo que recibió el paquete de hielo y realizó marcha seguida de reposo alcanzó la temperatura inicial. Conclusión: Las tres modalidades disminuyeron la temperatura de la piel, con un mayor efecto producido por el criomasaje; sin embargo, la inmersión mantuvo por más tiempo su efecto sin importar el tipo de actividad post-enfriamiento. Salud UIS 2011; 43 (2): 119-129.

Introduction: Cryotherapy is useful in the management of muscle-skeletal injuries, due to the effects of tissue cooling; however, few studies have evaluated the effectiveness of diferents forms of cryotherapy to maintain cooling after application and the effects of post-cooling activity on the recovery on the skin temperature. Objectives: To compare the effects of three modalities of cryotherapy on the skin temperature (ST) and its variation during the rewarming, under two different activities. Methods: An experimental study with 36 subjects randomly allocated to either three groups: crushed ice pack (CI), massage with ice (MI) or ice-water immersion (WI), these modalities were applied for 15min in the calf. Subsequently each group was subdivided randomly in: rest or gait followed by rest. For the analysis a paired Student's t test and ANOVA for repeated measurements were applied with α=0.05. Results: The three modalities decreased skin temperature, with a greater effect caused by MI (-27.6°C). During rewarming the three groups increased temperature, regardless the activity post-cooling (P <0.0001). The ST recovery was minor in the WI group. Only the group that received CI and the rewarming was walking followed by rest, reached the initial ST. Conclusions: The three modalities decreased skin temperature but the MI showed the greatest cooling on ST, however the WI maintained by major time this decreasing during the rewarming without influence of activity. Salud UIS 2011; 43 (2): 119-129.

Quantificação de transcritos maternos em oócitos bovinos submetidos a diferentes condições de maturação / Quantification of maternal transcripts in bovine oocytes under different maturation systems

Comparou-se a quantidade relativa de transcritos de origem materna entre oócitos bovinos maturados in vivo e maturados em diferentes condições in vitro. Avaliou-se também o efeito dos sistemas de maturação in vitro sobre a viabilidade das células do cumulus. Para a maturação in vivo, os oócitos foram coletados 19-20h após aplicação de gonadorelina em doadoras superestimuladas com FSH e sincronizadas com implante de progesterona. Para a maturação in vitro, oócitos imaturos, obtidos de ovários coletados em matadouro, foram maturados sob diferentes tensões de oxigênio e suplementação proteica. Avaliou-se a abundância dos transcritos de Zar1, MATER e GDF9 por PCR em tempo real. A viabilidade das células do cumulus de oócitos maturados in vitro foi analisada pela coloração de Azul de Tripan. Observou-se sub-regulação (P<0,05) dos transcritos em oócitos submetidos às diferentes condições de maturação in vitro em relação aos maturados in vivo. Não houve diferença (P>0,05) na viabilidade das células do cumulus. Conclui-se que o sistema de maturação influencia a quantidade de transcritos de origem materna armazenados no citoplasma de oócitos bovinos.

The relative abundance of maternal transcripts among bovine oocytes in vivo matured or under different in vitro conditions was compared. Viability of cumulus cells of in vitro matured oocytes was also evaluated. For in vivo maturation, oocytes were recovered from 19 to 20h after gonadorelin injection in donor cows, which were previously superestimulated with FSH and synchronized with progesterone implant. For in vitro maturation, immature cumulus-oocyte complexes, obtained from ovaries collected at slaughterhouse, were matured under different oxygen tensions and protein supplementation. Relative amount of Zar1, MATER, and GDF9 transcrispts were analyzed by real time PCR. Cumulus cell viability was analyzed by trypan blue. The expression of maternal effect genes were down-regulated (P<0.05) in oocytes matured under different in vitro conditions when compared to those in vivo matured. There was no difference (P>0.05) on cumulus cell viability among different in vitro maturation conditions. In conclusion, different maturation conditions affect the relative abundance of maternal transcripts stored into oocyte cytoplasm.

Manejo químico da ferrugem asiática da soja, baseado em diferentes métodos de monitoramento / Chemical management of the soybean asian rust based on different monitoring methods

O objetivo do trabalho foi determinar o momento ideal da aplicação dos fungicidas de ação preventiva, (Opera + Assist)* e (PrioriXtra + Nimbus)*, baseado na detecção inicial de primeiros esporos associado às condições ambientais, monitoramento climático e monitoramento convencional (após a detecção dos primeiros sintomas), verificando sua eficiência no controle da ferrugem asiática da soja. O trabalho foi desenvolvido na fazenda Escola da Universidade Estadual de Londrina, onde foram instalados coletores de esporos na área para detecção dos primeiros esporos e também se fez anotação das condições climáticas obtidas em estação metereológica. As aplicações foram feitas a 1, 7, 14 e 21 dias após detecção dos primeiros esporos, seguindo o monitoramento climático e monitoramento convencional. Foram avaliadas a porcentagem da área foliar infectada, desfolha e produtividade de grãos. Observou-se uma menor porcentagem de infecção foliar, quando os produtos foram aplicados logo no início da detecção dos primeiros esporos (1, 7 e 14 dias após detecção) e seguindo o monitoramento climático e, apesar do produto (PrioriXtra +Nimbus)* ter apresentado menores porcentagens de infecção foliar e desfolha quando aplicado nos diferentes momentos, observou-se que na produtividade de grãos não houve diferença entre os produtos testados.

The objective of this study was to determine the ideal time for the application of the fungicides of preventive action (Opera + Assist)* and (PrioriXtra + Nimbus)*, based on the initial detection of early spores associated with environmental conditions, climate monitoring and conventional monitoring (after the detection of the first symptoms), verifying their effectiveness in the control of Asian soybean rust. The study was conducted at the Londrina State University Experimental Station, where spore collectors were installed in the area for early detection of spores and the climate conditions were monitored in a climate station. The applications were made at 1, 7, 14 and 21 days after first detection of spores, according to the climate monitoring and conventional monitoring. Evaluations were made of the infected leaf area, defoliation and soybean yield. There was a lower percentage of leaf infection when the products were applied early in the detection of spores (1, 7 and 14 days after detection), and according to the climate monitoring. Moreover, despite that the product (Nimbus + PrioriXtra)* presented lower percentages of infected leaf and defoliation when applied at the different times, it was observed that in the final yield of the crop there was no difference between the products tested.

Anticorpos anti-Leptospira spp. em ovinos do município de Monte Negro, estado de Rondônia / Anti-Leptospira spp. antibodies in ovines from Monte Negro municipality, Rondonia state, Brazil

O presente estudo determinou a prevalência de anticorpos anti-Leptospira spp. em ovinos do Município de Monte Negro, RO. Foram examinados soros de 141 ovinos de raça, idade e sexo variados provenientes de 15 fazendas, pela técnica de Soroaglutinação Microscópica. Doze (80,0%) propriedades apresentaram pelo menos um animal reagente. Títulos de anticorpos iguais ou superiores a 100 foram detectados em 47 (33,3%) animais, e os sorovares mais frequentes foram Patoc (29,7%), Autumnalis (14,8%), Pyrogenes (10,6%), Australis (4,2%), Bratislava (4,2%), Hardjo (4,2%), Icterohaemorrhagiae (4,2%), Castellonis (2,1%) e Hebdomadis (2,1%). Em 11 (23,4%) soros não foi possível a determinação do provável sorovar envolvido na reação. Alerta-se também para a possibilidade de infecção no homem, tendo em vista as características regionais de fronteira agrícola amazônica.

The present study determined the prevalence of anti-Leptospira spp.antibodies in 141 ovines from 15 farms of the Monte Negro Municipality, Rondonia State, Brazil, by the microscopic agglutination test. Twelve (80.0%) farms presented at least 1 reactive animal. Antibodies titers of ? 100 were detected in 47 (33.3%) animals, the most frequent serovars being Patoc (29.7%), Autumnalis (14.8%), Pyrogenes (10.6%), Australis (4.2%), Bratislava (4.2%), Hardjo (4.2%), Icterohaemorrhagiae (4.2%), Castellonis (2.1%) and Hebdomadis (2.1%). In 11 (23.4%) sera it was not possible to determine the most frequent serovar involved. The results raise a warning as to the possibility of infection in the human being by Leptospira in light of the regional characteristics of the Amazon agricultural frontier.

Aspectos histológicos de fragmentos esplênicos autotransplantados em ratos / Histopathologic aspects of splenic fragments autotransplanted in rats

Estudou-se a viabilidade do autotransplante de tecido esplênico, um terço do baço, associado à esplenectomia parcial, e verificou-se a cinética evolutiva de sua regeneração, sob o aspecto macroscópico e histológico. Foram utilizados 28 ratos Wistar, adultos, machos, com média de peso de 300g, distribuídos em quatro grupos experimentais. Cada animal foi submetido à esplenectomia parcial, e um fragmento de baço foi transplantado para o omento maior, por períodos de 30, 60, 90 e 120 dias. Após cada período pré-estipulado, os tecidos esplênicos autotransplantados foram coletados e analisados histologicamente. Os resultados mostraram regeneração da cápsula esplênica, dos vasos sanguíneos e das polpas branca e vermelha. Aos 90 dias, a arquitetura microscópica apresentava-se semelhante à do baço normal.

The splenic tissue autograft viability (one third of the spleen) associated to parcial splenectomy was studied to verify the evolutive kinetic of its regeneration by macroscopic and histological aspects. Twenty-eight adult male Wistar rats, weighting 300g, were distributed in four experimental groups. Each animal was submitted to parcial splenectomy and one fragment of each spleen was autotransplanted to the greater omentum, for a period of 30, 60, 90, and 120 days. After each period, the autotransplanted splenic tissues were collected and histopathologically analyzed. The results showed regeneration of the splenic capsule, blood vessels, white pulp, and red pulp. After 90 days, the microscopic architecture was similar to the normal spleen.

Danos causados pela infecção de oídio em diferentes estádios fenológicos da soja / Damages caused by infection of powdery mildews in different phenological stages of soybeans

Ainda não há estudos precisos que quantifiquem os prejuízos decorrentes de infecção por oídio e/ou outras doenças foliares, para a maioria das culturas de importância econômica no Brasil. O objetivo foi quantificar as perdas causadas por oídio (Microsphaera diffusa) infectando a cultura da soja em diferentes estádios fenológicos e relacioná-las ao desenvolvimento e produtividade da cultura. O experimento foi desenvolvido em ambiente protegido, e os tratamentos foram testemunha controlada, testemunha sem controle, infecção iniciada em R1 ­ R2, infecção iniciada em R ­ R, infecção iniciada em R ­ R e infecção iniciada em R ­ R. A avaliação foi feita 345.15.25.35.4 semanalmente, considerando a porcentagem da área foliar infectada. Os resultados mostraram que, no tratamento em que houve infecções iniciadas em R1-R2 e R3-R4, a porcentagem de área foliar afetada foi maior (41% e 38%, respectivamente), com consequente menor produtividade (1.186,6 e 1.309,5 kg.ha-1 respectivamente). No tratamento em que a infecção ocorreu em R ­ R, houve 5.35.4 a menor média de área foliar afetada pela doença (24%) e a produtividade teve queda de 26%. Os resultados mostraram que as perdas de produtividade pelo oídio na cultivar Embrapa 48 variaram ao redor de 26 a 50%, e que a recomendação oficial para o início de controle do oídio da soja, quando esta se apresentar entre 40 e 50% de severidade, deve ser questionada e outros trabalhos neste âmbito devem ser desenvolvidos para determinação das perdas ocasionadas por esta doença na cultura.

At present there are no precise studies quantifying the damages caused by powdery mildews and other foliar diseases for the majority of economically important crops in Brazil. The objective of the present study was to quantify the losses caused by powdery mildews (Microsphaera diffusa) in soybeans in different phenological stages, and to correlate them with the development and yield of the crop. The trials was carried out in the greenhouse and the treatments were: controlled check, noncontrolled check, infection initiated at stage R1-R2, infection initiated at stage R3-R4, infection initiated at stage R5.1-R5.2, infection initiated at stage R5.3-R5.4. The evaluation was done weekly considering the percentage of infected leaf area. The results showed that for the infection beginning at stages R1-R2 and R3-R4 the percentage of affected leaf area was higher (41% and 38%), with consequently lower yields (1,200 and 1,240 kg ha-1). When the infection occurred later at stage R5.3-R5.4, a lower affected leaf area (24%) was observed, and the yield decreased 26%. The results showed that the loss of yield by powdery mildew in cultivar Embrapa 48 ranged from around 26 to 50%, and that the official recommendation for the beginning of control of powdery mildew of soybean, where it presents between 40 and 50% of severity, should be questioned, and other work in this area should be undertaken to determine the loss caused by this disease in the crop.

Aspectos morfológicos, morfométricos e ultraestruturais do baço de ratos após o clampeamento total do pedículo hepático / Morphologic, morphometric, and ultrastructural aspects of the spleen of rats after hepatic pedicle total clamping

Avaliaram-se as alterações morfológicas, morfométricas e ultraestruturais que ocorreram no baço devido à isquemia produzida pelo clampeamento total do pedículo hepático. Para tanto, foram utilizados 40 ratos machos, distribuídos em quatro grupos de 10 animais. O grupo-controle (C) não foi submetido à isquemia, e os grupos tratados (E1, E2e E3) foram submetidos ao clampeamento por 10, 20 e 30 minutos, respectivamente. Fragmentos do baço foram retirados e analisados histologicamente pela microscopia de luz (hematoxilina-eosina, ferrocianeto-férrico) e pela microscopia eletrônica de transmissão. Os resultados demonstraram que 10 minutos de clampeamento do pedículo hepático são suficientes para apresentar sinais de congestão esplênica e 20 e 30 minutos promovem intensa digestão de hemácias pelos macrófagos, com presença de grânulos de ferro (hemossiderina) no parênquima esplênico.

The macro and microscopic alterations that occurred in the spleen during an ischemia produced by the hepatic pedicle total clamping were studied. Forty male rats were distributed in four groups of 10 animals each. The control group (C) was not submitted to ischemia and the treated groups (E1, E2, and E3) were submitted to the clamping during 10, 20, and 30 minutes, respectively. Spleen fragments were collected and histologically analyzed by the light microscopy (eosin-hematoxilin and ferric ferrocyanide) and by the transmission electron microscopy. The results showed that 10 minutes of hepatic pedicle total clamping was enough produce signs of splenic congestion and 20 and 30 minutes promoted intense red bood cels digestion by the macrophages with the presence of iron granules (hemosiderin) in the splenic parenchyma.

Efeito do citrato e taurina em meio CR2aa no desenvolvimento de embriões bovinos fecundados in vitro / Effect of citrate and taurine added to CR2aa medium on the development of in vitro-fertilized bovine embryos

Avaliou-se o efeito do citrato em meio CR2aa suplementado com soro fetal bovino (SFB) ou livre de proteínas séricas e sua associação com taurina no desenvolvimento de embriões bovinos fecundados in vitro. Embriões foram cultivados em CR2aa contendo 0, 0,5, 1,0 e 3,0mM citrato, suplementado com 10 por cento SFB (experimento 1) ou com álcool polivinil (PVA; experimento 2). No terceiro experimento, embriões foram cultivados em meio com 0,5mM citrato, ou 7mM taurina, ou com a associação de ambos, suplementado com SFB. Os cultivos foram realizados com células do cumulus em ambiente a 38,8ºC com 5 por cento de CO2 em ar atmosférico. Melhora no desenvolvimento embrionário foi observado no cultivo de embriões em CR2aa com 0,5 e 1,0mM citrato na ausência de SFB (P<0,05), 8,6 por cento e 11,3 por cento de blastocistos, respectivamente, porém com valores mais baixos (P<0,05) que embriões cultivados em CR2aa com SFB (31,9 por cento). Associação de citrato com taurina em meio com SFB não influenciou (P>0,05) a produção de embriões ou o número de células. Citrato em meio CR2aa pode ser uma alternativa para cultivo embrionário em condições atmosféricas com 5 por cento de CO2 em ar na ausência de proteína sérica.

The effect of citrate added to CR2aa medium supplemented with fetal calf serum (FCS) or serum-proteinfree and its association with taurine on the development of in vitro-fertilized bovine embryos was evaluated. Embryos were cultured with 0, 0.5, 1.0, and 3.0mM citrate, in CR2aa supplemented with 10 percent FCS (experiment 1), or polyvinyl alcohol (PVA; experiment 2). In experiment 3, embryos were cultured with 0.5mM citrate, 7.0mM taurine or with association of both, in medium supplemented with FCS. Embryo culture was performed with cumulus cells at 38.8ºC in 5 percent CO2 under air for all experiments. Positive effect on embryo development was only observed with 0.5 and 1.0mM citrate in FCS-free CR2aa (P<0.05; 8.6 percent and 11.3 percent blastocyst, respectively), however with lower embryo rate than CR2aa with FCS (31.9 percent). Association between citrate and taurine in medium supplemented with FCS did not affect (P>0.05) embryo rate nor total cell number. Citrate in CR2aa medium can be an alternative for serumfree embryo culture under 5 percent CO2 in air, absence of serum protein.

Educación, Bioética y toma de decisiones éticas en unidades de cuidado intensivo / Education, bioehhics and ethical decision making in intensive care units

En el mundo médico, las decisiones del personal de Unidad de Cuidado Intensivo (UCI), Influyen tanto de manera positiva como negativa en el entorno de un paciente y su familia. El personal de salud que está vinculado al cuidado del paciente en UCI, debe ser capaz de resolver y tomar decisiones que son trascendentales para el futuro de una persona que se encuentra entre la vida y la muerte. A pesar de esta obligación moral y profesional, no existe un consenso ampliamente conocido para la toma de decisiones, que facilite al personal afrontar la situación de un paciente en estado crítico. Razón por la cual la educación universitaria en bioética es de vital Importancia, para la formación de profesionales competentes, libre pensadores con responsabilidad social, que actúen como defensores y promotores de la vida.

In the medical world, decisions of staff of Intensive Care Unit, both in a positive and negative way, may affect the patient's environment and family. The health team in charge of the patient care in critical condition should be, able to make decisions important for the future of someone who is between life and death. Despite this moral and professional duty, there is no consensus widely known for decision-making, to provide the staff means to deal this situation, a patient in critical condition. For that reason bioethics education performs vital importance for the training of competent professionals, thinkers open to social responsibility, acting as defenders and promoters of life.

Differential response to gepirone but not to chlordiazepoxide in malnourished rats subjected to learned helplessness

The learned helplessness (LH) paradigm is characterized by learning deficits resulting from inescapable events. The aims of the present study were to determine if protein-calorie malnutrition (PCM) alters learning deficits induced by LH and if the neurochemical changes induced by malnutrition alter the reactivity to treatment with GABA-ergic and serotonergic drugs during LH. Well-nourished (W) and PCM Wistar rats (61 days old) were exposed or not to inescapable shocks (IS) and treated with gepirone (GEP, 0.0-7.5 mg/kg, intraperitoneally, N = 128) or chlordiazepoxide (0.0-7.5 mg/kg, intraperitoneally, N = 128) 72 h later, 30 min before the test session (30 trials of escape learning). The results showed that rats exposed to IS had higher escape latency than non-exposed rats (12.6 ± 2.2 vs 4.4 ± 0.8 s) and that malnutrition increased learning impairment produced by LH. GEP increased the escape latency of W animals exposed or non-exposed to IS, but did not affect the response of PCM animals, while chlordiazepoxide reduced the escape deficit of both W and PCM rats. The data suggest that PCM animals were more sensitive to the impairment produced by LH and that PCM led to neurochemical changes in the serotonergic system, resulting in hyporeactivity to the anxiogenic effects of GEP in the LH paradigm.