Molecular subtyping of Campylobacter jejuni subsp. jejuni strains isolated from different animal species in the state of São Paulo, Brazil

O objetivo do presente trabalho foi caracterizar geneticamente estirpes de Campylobacter jejuni subsp. jejuni isoladas de humanos e de diferentes origens animais (bovinas, suínas, cães, primatas, javalis, suínos e aves de corte). Um total de 828 amostras (fezes, carcaças, fetos abortados e útero histerectomizado) foram analisadas por métodos de rotina bacteriológica e 36 estirpes de C. jejuni foram isoladas. Trinta estirpes de origem fecal humana foram obtidas de laboratórios de análises clínicas da cidade de São Paulo. As 66 estirpes de C. jejuni isoladas foram submetidas à caracterização genética. Oligonucleotídeos baseados no gene fla A foram usados na reação de polimerase em cadeia (PCR) e amplificou um fragmento de 702 pb. Os produtos obtidos pela PCR foram avaliados pelas técnicas de seqüenciamento e análise genealógica. Análise da variabilidade genética das 66 estirpes revelou 44 diferentes subtipos de C. jejuni. Um subtipo de origem humana apresentou seqüência idêntica à de C. jejuni depositada no GenBank (GENBANK acesso número AF050186). A subtipagem das estirpes de C. jejuni baseadas no seqüenciamento da região variável do gene fla A e na análise do alinhamento das seqüências pelo método da Máxima Parcimônia, mostraram-se altamente discriminatórios fornecendo melhores condições para a correta diferenciação entre estirpes originárias de surto e as isoladas esporadicamente. Este foi o primeiro estudo de subtipagem molecular de estirpes de C. jejuni de origem humana e animal utilizando a técnica do seqüenciamento com análise genealógica realizado no Estado de São Paulo, Brasil.

Detecção de Campylobacter jejuni em carcaças e cortes de frangos, pela reação da polimerase em cadeia / Determination of Campylobacter jejuni in carcasses and cuts of chickens, by the polymerase chain reaction

As bactérias do gênero Campylobacter apresentam-se amplamente distribuídas na natureza, sendo isoladas de diversas espécies animais, tanto domesticas como silvestres. Atribui-se como via de transmissão para o ser humano, o contato direto com animais portadores, o consumo de água e alimentos de origem animal contaminados, mormente carnes de aves mal processadas e a ingestão de leite não pasteurizado. No Brasil, tem sido relatada a presença de Campylobacter spp. em casos de diarréia aguda ou crônica a até em indivíduos assintomáticos. O presente trabalho tem por objetivo pesquisar a presença de Campylobacter jejuni em amostras de carcaças e cortes de frangos, de abatedouros do Estado de São Paulo, pelas técnicas de isolamento bacteriano e pela Reação de Polimerase em Cadeia (PCR). Das 74 amostras analisadas, 5 (6,75 por cento) foram positivas pela PCR para Campylobacter jejuni. A técnica da PCR mostrou-se mais sensível e específica que o exame bacteriológico, que pode falhar na detecção de Campylobacter spp. em amostras muito contaminadas, congeladas ou aditivadas. Oferece também vantagens devido à rapidez e facilidade de execução, tendo em vista que o controle deste patógeno será cada vez mais exigido em função do mercado internacional de carne de frango.