Serological exposure of spotted fever group Rickettsia in capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) from urban parks in Campo Grande, Brazilian Midwest

ABSTRACT Background: Rickettsia of the spotted fever group (SFG) has been reported in ticks and domestic animals in Campo Grande (CG), Midwest Brazil. Methods: We searched for Rickettsia in the SFG in capybaras and their ticks in an urban park in the CG. Results: The seropositivity rate was 88.2% (15/17). Although 87.7% of the capybaras sampled showed infestations with Amblyomma sculptum, A. dubitatum, and Amblyomma spp., no molecular results were detected in ticks. Conclusions: Since Rickettsia from the SFG circulates among capybaras in the urban parks of Campo Grande, this large rodent species should be monitored within the One Health Agenda.

Serological occurrence for tick-borne agents in beef cattle in the Brazilian Pantanal / Ocorrência sorológica para agentes transmitidos por carrapatos em bovinos de corte no Pantanal Brasileiro

Abstract This study investigated the seropositivity for five different tick-borne agents, namely Anaplasma marginale, Babesia bovis, Babesia bigemina, Coxiella burnetii, Anaplasma phagocytophilum, and Trypanosoma vivax in beef cattle in the Brazilian Pantanal. The serum samples collected from animals (200 cows; 200 calves) were used in indirect enzyme-linked immunosorbent assays (iELISA) to detect IgG antibodies against A. marginale, B. bovis, B. bigemina, and T. vivax, and Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT) for detecting IgG antibodies against C. burnetii and A. phagocytophilum. No correlation was observed between seropositivity for C. burnetii and A. phagocytophilum with other agents whereas moderate correlation was observed for A. marginalexB. bigemina x B. bovis. Cows were more seropositive for T. vivax whereas calves were more seropositive for B. bovis and B. bigemina. The highest number of seropositive animals by a single agent was observed for T. vivax (15.2%). Co-seropositivity for T. vivax + A. marginale was higher in cows (25.5%) and for T. vivax + B. bovis + B. bigemina + A. marginale was higher in calves (57.5%). The high seropositivity correlation for A. marginale x B. bovis x B. bigemina is probably due to the presence of the tick biological vector, Rhipicephalus microplus, in the studied farms. Common transmission pathways, mediated by hematophagous dipterans and fomites, may explain the high co-seropositivity of cows for A. marginale and T. vivax. Low seropositivity to C. burnetii is probably due to the type of breeding system employed (extensive). Seropositivity for A. phagocytophilum in only one animal suggests the occurrence of a cross-serological reaction with another agent of the genus Anaplasma.

Resumo Este estudo teve como objetivo determinar a co-soropositividade para agentes transmitidos por carrapatos, como Anaplasma marginale, Babesia bovis, Babesia bigemina, Coxiella burnetii, Anaplasma phagocytophilum, e Trypanosoma vivax em bovinos de corte do Pantanal Brasileiro. Amostras de soro foram colhidas de 400 animais (200 vacas; 200 bezerros) e submetidas a Ensaios Imunoenzimáticos Indiretos (iELISA) para detecção de anticorpos IgG anti- A. marginale, anti- B. bovis, anti- B. bigemina e anti- T. vivax, e à Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para detecção de anticorpos IgG anti -C. burnetii e anti- A. phagocytophilum. Ausência de correlação foi vista entre os animais soropositivos para C. burnetii e A. phagocytophilum com os outros agentes e correlação moderada ocorreu entre A. marginale x B. bigemina x B. bovis. Vacas foram mais soropositivas que bezerros para T. vivax e bezerros mais soropositivos que vacas para B. bovis e B. bigemina. Maior número de animais soropositivos para um único agente foi visto para T. vivax (15,2%). Vacas demonstraram maior co-soropositividade para T. vivax + A. marginale (25,5%) e bezerros para T. vivax + B. bovis + B. bigemina + A. marginale (57,5%). A alta correlação entre a soropositividade para A. marginale x B. bovis x B. bigemina é provavelmente devida à presença do vetor biológico, o carrapato Rhipicephalus microplus, nas fazendas estudadas. As vias de transmissão comuns, mediadas por dípteros hematófagos e fômites, podem explicar a alta co-soropositividade das vacas para A. marginale e T. vivax. A baixa soropositividade para C. burnetii é provavelmente devida ao tipo de sistema de criação empregado (extenso). A soropositividade para A. phagocytophilum em apenas um animal sugere a ocorrência de reação sorológica cruzada com outro agente do gênero Anaplasma.

Phylogeography of msp4 genotypes of Anaplasma marginale in beef cattle from the Brazilian Pantanal / Filogeografia de genótipos msp4 de Anaplasma marginale em gado de corte no Pantanal brasileiro

Abstract The msp4 gene of A. marginale is unicodon, stable and mostly homogeneous, being considered as a useful marker for phylogeographic characterization of this bacterium. The objective of this work was to analyze the phylogeography of A. marginale based on the msp4 gene in beef cattle from the Brazilian Pantanal, compared to those found in other regions worldwide. The blood samples investigated were collected from 400 animals (200 cows and 200 calves) reared in five extensive breeding farms in this region. The results indicated that of the evaluated samples, 56.75% (227/400) were positive for A. marginale based on the msp1β gene by quantitatitve PCR (qPCR), while 8.37% (19/227) were positive for the msp4 gene in the conventional PCR. In the Network distance analysis, 14 sequences from the Brazilian Pantanal were grouped into a single group with those from Thailand, India, Spain, Colombia, Parana (Brazil), Mexico, Portugal, Argentina, China, Venezuela, Australia, Italy and Minas Gerais (Brazil). Among 68 sequences from Brazil and the world, 15 genotypes were present while genotype number one (#1) was the most distributed worldwide. Both Splitstree and network analyses showed that the A. marginale msp4 sequences detected in beef cattle from the Brazilian Pantanal showed low polymorphism, with the formation of one genogroup phylogenetically related to those found in ruminants from South and Central America, Europe, and Asia.

Resumo O gene msp4 de A. marginale é unicodon, estável e pouco heterogêneo, sendo considerado como um marcador útil para caracterização filogeográfica desta bactéria. Este trabalho teve como objetivo analisar a filogeografia de A. marginale com base no gene msp4 em bovinos de corte do Pantanal Brasileiro, comparativamente a outra regiões do mundo. Alíquotas de sangue foram colhidas de 400 bovinos (200 vacas e 200 bezerros) em cinco propriedades de cria e recria extensiva. Como resultado, 56,75% (227/400) mostraram-se positivas para A. marginale pela qPCR para o gene msp1β e destas, 8,37% (19/227) amostras foram positivas na PCR convencional para o gene msp4. Na análise de distância Network, 14 sequências do Pantanal brasileiro foram agrupadas em um único grupo com as da Thailândia, Índia, Espanha, Colômbia, Paraná (Brasil), México, Portugal, Argentina, China, Venezuela, Austrália, Italia e Minas Gerais (Brasil). Dentre 68 sequências do Brasil e do mundo, constatou-se a presença de 15 genótipos, sendo o genótipo número um (#1) o mais distribuído. As sequências msp4 de A. marginale detectadas em bovinos de corte no Pantanal brasileiro apresentaram baixo polimorfismo com formação de dois genogrupos filogeneticamente relacionados àqueles encontrados em ruminantes de países das América do Sul e Central, Europa e Ásia.

Serological detection of Toxoplasma gondii, Leishmania infantum and Neospora caninum in cats from an area endemic for leishmaniasis in Brazil / Detecção sorológica de Toxoplasma gondii, Leishmania infantum e Neospora caninum em gatos de uma área endêmica para leishmaniose no Brasil

An investigation was made into the occurrence of antibodies to Toxoplasma gondii, Leishmania infantum and Neospora caninum in 151 domestic cats, based on the indirect fluorescent antibody test (IFAT). Serum samples were collected from 151 domestic cats (65 free-roaming and 86 domiciled cats; 55 males and 96 females) in Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brazil between January and April 2013. IgG antibodies to T. gondii, L. infantum and N. caninum were found, respectively, in 49 (32.5%), 34 (22.5%) and 10 (6.6%) sampled cats. A positive correlation was found between T. gondii and N. caninum, T. gondii and L. infantum, and N. caninum and L. infantum (p <0.05) infections. Also, a significant interaction was identified between gender and area of activity on the probability of T. gondii (p = 0.0324) infection. However, no significant interaction was observed between gender and area of activity on infections by either N. caninum or L. infantum. This study showed that cats from an area endemic for visceral leishmaniasis in Brazil are exposed to three different protozoans, two of which are causal agents of important zoonosis.

O presente estudo teve como objetivo investigar a ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii, Leishmania infantum e Neospora caninum, em 151 gatos, por meio da Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Entre os meses de janeiro e abril de 2013, amostras de soro foram coletadas de 151 gatos domésticos (65 gatos errantes e 86 gatos domiciliados; 55 machos e 96 fêmeas), de Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil. Anticorpos IgG anti-T. gondii, anti-L. infantum e anti-N. caninum foram encontrados em 49 (32,5%), 34 (22,5%) e 10 (6,6%) gatos amostrados, respectivamente. Verificou-se uma associação estatisticamente significativa entre as infecções por T. gondii e N. caninum, T. gondii e L. infantum e N. caninum e Leishmania infantum (p <0,05). Além disso, foi observada uma interação significativa entre sexo, área de atividade na probabilidade de infecção por T. gondii (p = 0,0324). No entanto, não foi observada interação significativa entre sexo e área de atividade nas infecções por N. caninum e L. infantum. Este estudo mostrou que os gatos de uma área endêmica brasileira para leishmaniose visceral são expostos a três diferentes protozoários, sendo dois deles importantes agentes zoonóticos.

Molecular detection of hemotrophic mycoplasmas among domiciled and free-roaming cats in Campo Grande, state of Mato Grosso do Sul, Brazil / Detecção molecular de micoplasmas hemotróficos em gatos domiciliados e errantes em Campo Grande, estado do Mato Grosso do Sul, Brasil

Hemoplasmas are bacteria living in feline red blood cells. Feline hemoplasmosis is frequently associated with old male cats that have access to the streets. This study aimed to detect the presence of hemoplasma speciess in domiciled and free-roaming cats in Campo Grande, state of Mato Grosso do Sul (MS), Brazil, using molecular techniques. Between January 2013 and April 2013, EDTA-whole blood samples were collected from 151 domestic cats (65 free-roaming and 86 domiciled cats). Samples were subjected to PCR assays targeting hemoplasmas 16S rRNA, followed by sequencing, BLAST analysis and phylogenetic analysis. Results show an occurrence of 36.4% for hemoplasmas. Twenty-three cats (15.2%) were positive for ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’, 17 (11.2%) for M. haemofelis and 15 (9.9%) for ‘Candidatus M. turicensis’, from PCR. Coinfection by two or three hemoplasmas was found in 25 cats (16.6%). No statistically significant difference between genders or between lifestyles was observed for the presence of hemoplasmas among the cats. Results show different hemoplasma species are present in cat population (Campo Grande, MS, Brazil). It is suggested that a differential diagnosis for feline hemoplasmosis should be made when cats show nonspecific clinical signs of disease with systemic manifestation.

Hemoplasmas são bactérias encontradas aderidas aos eritrócitos de felinos. A hemoplasmose felina está frequentemente associada a gatos velhos machos, sem raça definida e com acesso à rua. O presente estudo objetivou realizar a detecção molecular de espécies de hemoplasmas em gatos domiciliados e errantes em Campo Grande, estado do Mato Grosso do Sul (MS), Brasil. Entre janeiro/2013 e abril/2013, amostras de sangue foram colhidas de 151 gatos domésticos (65 errantes e 86 domiciliados) e avaliadas por PCR frente à presença de sequências do gene do 16S rRNA de hemoplasmas, seguidas de sequenciamento, análise pelo BLAST e análise filogenética. Os resultados deste estudo mostraram uma ocorrência de 36,4%. Vinte e três (15,2%) gatos mostraram-se positivos na PCR para ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’, 17 (11,2%) para Mycoplasma haemofelis, e 15 (9,9%) para ‘Candidatus Mycoplasma turicensis’. A co-infecção por dois ou três hemoplasmas ocorreu em 25 gatos (16,6%). Não foi observada diferença estatística significativa entre sexo e estilo de vida dos gatos amostrados e a presença de hemoplasmas. O estudo mostrou que diferentes espécies de hemoplasmas circulam na população de gatos (domiciliados e errantes) na cidade de Campo Grande, MS, Brasil. Sugere-se o diagnóstico diferencial para hemoplasmose felina em gatos que apresentam sinais clínicos inespecíficos de doença com manifestação sistêmica.