Estado nutricional, síndrome metabólico e inflamación en pacientes con enfermedad de Chagas / Nutritional condition, metabolic syndrome and inflammation in patients with Chagas disease

El propósito de este estudio fue describir la asociación entre el estado nutricional, la presencia de síndrome metabólico (SM), y el estado inflamatorio, en pacientes con Enfermedad de Chagas (ECh), atendidos en la consulta externa del Instituto de Medicina Tropical en Caracas. El estudio fue de tipo transversal y correlacional, en el cual se seleccionaron 34 pacientes a los cuales se les realizó un diagnóstico parasitológico, inmunológico y molecular de la ECh. Se evaluaron variables antropométricas, clínicas y bioquímicas, así como el SM el cual fue determinado por los criterios del III Panel estadounidense para el Tratamiento de Adultos del Programa Nacional de Educación sobre el Colesterol (ATP-III, por sus siglas en inglés). Se encontró que la mayoría de los pacientes presentaron sobrepeso u obesidad (73,5%), un porcentaje de grasa corporal (% GC) alto o muy alto (82,3%), y obesidad abdominal (61,8 %). La frecuencia de SM fue de 29,4% y más del 90% mostraron valores elevados de Proteína C Reactiva ultrasensible (PCRus). Valores más elevados del IMC se asociaron con un estadio más avanzado de la ECh. Los sujetos con presencia de ADN de Tripanosoma cruzi (T. cruzi) circulante en sangre, presentaron mayor % GC, y en su mayoría, fueron diagnosticados con SM. En conclusión, los pacientes evaluados mostraron un exceso de adiposidad, que puede favorecer el estado inflamatorio, el desarrollo de SM y la progresión de la ECh(AU)

The purpose of the study was to describe the association between nutritional and inflammatory status and the presence of metabolic syndrome (MS) on patients with Chagas disease (CD) treated at the Outpatient Services of the Tropical Medicine Institute in Caracas, Venezuela. The study was cross-sectional and correlational. Thirty-four (34) patients were selected and a molecular, immunological, and parasitological diagnostic test was ran for Chagas disease. Anthropometric, clinic, and biochemical variables were evaluated, and the MS was determined using National Cholesterol Education Program Expert/Adult Treatment Panel III (ATP-III) criteria. The results showed a high percentage of patients overweight or presenting obesity (73.5%), a high and very high percentage of body fat (82.3%), and abdominal obesity (61.8%). The prevalence of MS was 29,4% and more than 90% of patients showed elevated values of high sensitivity C-reactive protein (hsCRP). Higher body-mass index values were associated with advanced stages of the CD. Subjects in the presence of T. cruzi DNA in the blood showed a greater percentage of body fat and, most of them, were diagnosed with MS. In conclusion, the evaluated patients showed an excess of adiposity which may favor an inflammatory status, the development of the MS, and the progress of the CD(AU)

Proliferación de trypanosoma cruzi en la membrana peritoneal y líquido ascítico de ratones con infección aguda / Proliferation of trypanosoma cruzi in the peritoneal membrane and ascitic liquid of mice with acute infection

En este estudio fue analizada la parasitemia y el parasitismo en el líquido ascítico (LA), membrana peritoneal (MP) y en otros tejidos de 40 ratones machos NMRI durante la infección aguda. Los ratones (20 ratones por grupo) fueron inoculados por vía intradérmica con tripomastigotos metacíclicos linaje T.cr I de las cepas P6 y P11 obtenidos de Rhodnius prolixus. Formas delgadas y gruesas de tripomastigotos fueron encontradas en la sangre de todos los ratones. En los ratones infectados con la cepa P6 los tripomastigotos aparecieron primero en él LA a los 13 días pi y en la sangre a los 18 días pi, en los ratones infectados con la cepa P11 los parásitos se observaron primero en la sangre a los 15 días pi y en él LA a los 22 días pi. Los ratones desarrollaron emaciación, disnea, hirsutismo, pérdida de la actividad motora de las patas posteriores y hepatoesplenomegalia. Los ratones fueron sacrificados a los 39 días pi. El estudio histológico mostró que T. cruzi prolifera formando nidos de amastigotos y tripomastigotos en la MP. Los parásitos también fueron encontrados en el músculo esquelético y en el corazón de los ratones infectados con la cepa P6. La inmunotinción con PAP reveló antígeno de T. cruzi en las secciones de esófago, estómago, intestino delgado y grueso, bazo, riñón, hígado, próstata y pene de los ratones. Estos resultados confirmaron que las cepas P6 y P11 desarrollaron anormalidades histopatológicas en el tracto gastrointestinal, renal y órgano reproductivo. La localización intra-peritoneal de los parásitos y la acumulación de fluido peritoneal, reveló ascitis y peritonitis causada por el incremento de líquido en la cavidad peritoneal y destrucción del tejido peritoneal de los ratones. El presente estudio reporta por primera vez la proliferación de tripomastigotos en la cavidad peritoneal cinco días antes de encontrarse en la sangre periférica para la cepa P6 causando daño intraperitoneal y muerte del modelo murino utilizado.

In this study we analyzed the parasitemia and parasitism in the ascitic fluid (AF), peritoneal membrane (PM) and in other tissues of 40 NMRI male mice during acute infection. Mice (20 mice per group) were inoculated by intradermal route with metacyclic trypomastigotes T.cI lineage of P6 or P11 strains obtained from Rhodnius prolixus. Slender and stout forms were observed in the blood of all mice. In infected mice with P6 strain the trypomastigotes were observed first in the AF at day 13 pi and in blood at day 18 pi. Meanwhile in infected mice with P11 strain trypomastigotes were observed first in the blood at day 15 pi and in the AF at day 22 pi. Infected mice showed emaciation, dyspnea, bristled hair, loss of motor activities in the rear limbs and hepatosplenomegaly. Mice were sacrificed at day 39 pi. Histological finding indicated that T. cruzi proliferates forming amastigotes and trypomastigotes nests in the PM. Parasites were also observed in skeletal muscle of the mice and in the heart of infected mice with P6 strain. Imunostaining with PAP revealed T. cruzi antigen in esophagus, stomach, thin and thick intestine, spleen, and kidney, liver, prostate and penis. The results show that P6 and P11 colonized and produced abnormalities in the gastrointestinal tract, renal and reproductive organs. Intra-peritoneal localization of parasites and accumulation of peritoneal fluid, revealed ascites and peritonitis caused by increase of fluid in the peritoneal cavity and destruction of the membrane peritoneal of the mice. This study reports for the first time the proliferation of trypomastigotes in the peritoneal cavity five days earlier than in peripheral blood for the P6 strain causing intra-peritoneal damage and death in the murine model used.

Tripanosomiasis en el embarazo / Trypanosomiasis in pregnancy

OBJETIVO: describir la morbimortalidad materna y perinatal causada por la tripanosomiasis en las gestantes que asisten a control en el Servicio Prenatal de la Maternidad “Concepción Palacios” y al Hospital Central de Biscucuy. MÉTODOS: Se incluyó una muestra de 828 pacientes, 178 de la zona rural y 650 de la urbana. Se realizó la pesquisa para tripanosomiasis mediante prueba rápida y confirmación por serología, de las madres positivas para tripanosomiasis. Se tomó muestra de la sangre del cordón umbilical para determinar la transmisión congénita de la enfermedad. RESULTADOS: Fueron positivas para enfermedad de Chagas 6 pacientes, para una frecuencia global de 0,72 %. Cinco de las pacientes provenían de la zona rural (2,8.%) y una del medio urbano (0,15 %). Entre las 6 pacientes positivas, 83,3 % provenía de la zona rural y 16,7 % de la urbana. La serología de los recién nacidos fue positiva en cuatro casos del medio rural y un caso del medio urbano. La reacción en cadena de la polimerasa fue positiva en 2 de los 6 neonatos de madres con la enfermedad. Las pruebas parasitológicas fueron negativas en el 100.% de los neonatos en riesgo. CONCLUSIONES: La frecuencia de tripanosomiasis fue de 0,72 %. No hubo transmisión congénita de la enfermedad.

OBJECTIVE: to describe maternal and perinatal morbidity and mortality caused by trypanosomiasis in pregnant women attending prenatal control in the obstetric service of Maternidad “Concepcion Palacios” and Hospital Central de Biscucuy. METHODS: A sample of 828 patients was included from both areas, 178 in rural and 650 urban. Research was performed by rapid test for trypanosomiasis and confirmation by serology, from mothers positive for trypanosomiasis. Sample was taken from the umbilical cord blood to determine congenital transmission of the disease. RESULTS: Were positive for Chagas disease 6 patients, for an overall frequency of 0.72 %. Five of the patients were from rural areas (2.8 %) and in urban areas (0.15 %). Between 6 positive patients, 83.3 % came from rural and 16.7 % urban areas. The newborns serology was positive in four cases of rural and urban case. The chain reaction polymerase was positive in 2 of the 6 infants of mothers with the disease. Parasitological tests were negative in 100 % of infants at risk. CONCLUSIONS: The frequency of trypanosomiasis was 0.72 %. There was not congenital transmission of the disease.

Electrocardiography repolarization abnormalities are characteristic signs of acute chagasic cardiomyopathy / Los trastornos de la repolarización ventricular son signos característicos de la cardiomiopatía chagásica aguda

Chagas disease is a tropical parasitic disease caused by the protozoan Trypanosoma cruzi (T. cruzi), whose reemergence as oral outbreaks is currently a public health problem in Venezuela. T. cruzi infection induces myocardial damage; which according to the microvascular theory, is derived from parasite-mediated disruption of the endothelium, inducing platelet aggregation and ischemia. In order to determine whether ventricular repolarization disorders observed in human patients are characteristic signs of the disease that can be reproduced in NMRI mice; we studied 12 patients with a well documented diagnosis of acute Chagas disease, based on epidemiological, clinical, parasitological and molecular data. Also, T. cruzi isolates from the blood of human patients from other Venezuelan geographical regions were characterized and inoculated in albino NMRI mice. A standard 12-lead and bipolar electrocardiogram configuration were done in human patients during the acute phase of the disease and in mice, after three weeks of infection. Results in human showed repolarization disorders, characterized by: negative, bimodal or biphasic T waves, ST segment depression or elevation and early repolarization. In mice a significant increase in T wave amplitude, increased QT interval duration and elevation or depression of ST segment were observed. These findings were evidenced in all infected mice, suggesting that electrocardiographic repolarization abnormalities in a well documented clinical and epidemiological context are signs that increase the sensitivity for the diagnosis of acute Chagas´ disease.

La enfermedad de Chagas es una hemoparasitosis causada por Trypanosoma cruzi (T. cruzi), cuya re-emergencia como epidemias por contaminación oral es actualmente un problema de salud pública en Venezuela. La infección por T. cruzi causa miocarditis; que de acuerdo con la teoría microvascular deriva del daño del endotelio vascular, al inducir agregación plaquetaria e isquemia. Con el objetivo de demostrar que los trastornos de repolarización son signos propios de la miocarditis chagásica aguda (MChA) reproducibles en modelos animales, estudiamos 12 pacientes humanos con diagnostico bien documentado de MChA, basado en datos epidemiológicos, clínicos, parasitológicos y moleculares. A partir de la sangre de los pacientes obtuvimos los aislados de T cruzi, los caracterizamos molecularmente y los inoculamos en ratones albinos NMRI; paralelamente, aislados de T cruzi provenientes de otras regiones de Venezuela fueron también ensayados. Tanto en los pacientes humanos como en los ratones con Chagas agudo, se realizaron estudios electrocardiográficos en 12 derivaciones estándares y en configuración bipolar, respectivamente. En humanos observamos trastornos de la repolarización ventricular caracterizados por: onda T negativa, bimodal o bifásica; elevación o depresión del segmento ST y despolarizaciones tempranas. En ratones observamos incrementos en la amplitud de la onda T, aumento en la duración del intervalo QT y elevación o depresión del segmento ST. Estos hallazgos fueron evidenciados en todos los ratones infectados con los diferentes aislados, sugiriendo que los trastornos de repolarización, en un adecuado y bien documentado contexto epidemiológico y clínico, son signos que aumentan la sensibilidad para el diagnóstico de MChA.

Infección por Trypanosoma cruzi y polimorfismo del Citocromo B del ADN mitocondrial en Triatoma maculata de Anzoategui y Portuguesa, Venezuela / Trypanosoma cruzi infection and cytochrome b polimorphism of mitochondrial dna in Triatoma maculata of Anzoátegui and Portuguesa states, Venezuela

Con el fin de entender la dinámica poblacional de Triatoma maculata, se analizó el polimorfismo genético y los índices de infección con Trypanosoma cruzi, utilizando triatominos provenientes de ecotopos y regiones geográficas diferentes. El índice de infección parasitaria para T. maculata, fue de 29.8% a través de la observación directa al microscopio y 40.3% utilizando el método de reacción en cadena de la polimerasa. Los niveles de infección encontrados incrementan la importancia de T. maculata como vector involucrado en el ciclo de transmisión de T. cruzi. El análisis del polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción de una región del gen Cyt B, permitió establecer en forma preliminar, diferencias en los patrones de bandas de este gen, según el origen geográfico de cada población. Esto puede asociarse a cambios relacionados con procesos adaptativos involucrados en la colonización de nuevos hábitats. No se observó variación genética para vectores capturados en diferentes ecotopos de una misma localidad. Sin embargo es evidente la participación del vector en el ciclo de transmisión, mostrando que la presencia de T. maculata en las casas no puede ser ignorada

In order to understand more about the populational dynamics of Triatoma maculata, the genetic polimorphism and the infection indexes of Trypanosoma cruzi were analysed, using triatomine obtained from different ecotopes and geographical regions. The parasitic infection index of T. maculata was 29.8% using the microscope direct observation, and 40.3% by the polymerase chain reaction method. Both methods were important for epidemiological screening of the vectors with low potential of infection. The amplification of one region the Cyt B gene of these organisms, followed by a restriction fragments length polymorphism analysis, allowed us to establish different patterns of bands according to the geographic origin of each population, which indicates the lack of migration between individuals of Portuguesa and Anzoátegui states. These genetic differences may be associated with changes in adaptative events involved in the colonization of new habitats. The lack of polymorphism among vectors collected in different habitats of the same region showed an important genetic flow which has epidemiological implications in the risk of transmission of the disease, showing that the presence of T. maculata in houses cannot be ignored

Efectos de la infección aguda por diferentes cepas de tripanosoma Cruzi en fetos de ratas / Effects of the Acute Infection by Different Trypanosoma cruzi Strains in Rats Fetuses

En el presente estudio se analizó el desarrollo intrauterino de los fetos de ratas Wistar, que recibieron una inyección por vía intraperitoneal de 2x10(5) tripomastigotes sanguícolas de las cepas Planalto (IP1) y ASM (IP2) de Trypanosoma cruzi. A los 12 días post-infección fueron apareadas; a los 20 días de preñez fueron sacrificadas y los fetos fueron extraídos de los sacos uterinos para ser evaluados. Ratas sanas preñadas (SP) y vírgenes (CI1, CI2) fueron usadas como controles. Los resultados indican que la parasitemia fue significativamente (P<0,05) mayor en las ratas preñadas en comparación con las ratas vírgenes CI1 y CI2 infectadas con diferentes cepas de T. cruzi. En las ratas IP1 se observaron 19 fetos con peso y longitud promedio de 2,86 ± 2,19 g y 2,63 ± 1,17; en una de las ratas se desarrolló un solo feto en el cuerno uterino izquierdo, en otra rata se observó inflamación del cuerno izquierdo, restos fetales, placentales y 6 fetos de aspecto normal en el cuerno derecho; en dos ratas se desarrollaron 8 y 4 fetos, respectivamente, de aspecto normal. En las ratas preñadas IP2, se desarrollaron 28 fetos con peso y longitud promedio de 2,77 ± 0,77 g y 3,31 ± 1,99 cm; en una rata los 4 fetos (57,14%) del cuerno uterino derecho presentaron malformaciones morfológicas sobre el lado dorsal del cuerpo, estrechamiento alrededor de la parte posterior y gran desarrollo de la base de la pata anterior derecha y en el cuerno izquierdo se observaron 3 fetos con aspecto normal; en otra rata se encontraron 2 fetos muertos y denso líquido amniótico en el cuerno uterino derecho y 5 fetos con aspecto normal en el cuerno izquierdo, y en dos ratas se observaron 8 y 6 fetos con aspecto normal, respectivamente. En las SP se desarrollaron 21 fetos con características físicas normales, con peso y longitud promedio de 6,16 ± 0,99 g y 2,88 ± 0,65 cm de longitud. La relación peso fetal/longitud fetal (g/cm) en los grupos de ratas preñadas IP1 e IP2 fue significantemente menor en comparación con los fetos de las ratas SP (P<0,00001). La comparación del peso fetal y diámetro de las placentas entre las ratas IP1, IP2 y SP resultó significativa (P<0,001). En conclusión, la infección por diferentes cepas de T. cruzi en las ratas preñadas produce restricción patológica del crecimiento fetal, anomalías morfológicas estructurales y funcionales en los fetos y muerte fetal. Los fetos de las ratas SP no mostraron ningun anomalía.

In the present study was analyzed the intrauterine development of Wistar rats fetuses that received an injection of 2x10(5) bloodstream trypomastigotes of Planalto (IP1) and ASM (IP2) Trypanosoma cruzi strains. The rats with 12 days post-infection were mated; at day 20 the pregnat rats were sacrificed and its fetuses were extracted from the uterine horns in order to be evaluated. Healthy pregnant rats (HP) and virgin rats (CI1, CI2) were used as controls. The results showed that parasitemia was significanty (P<0.05) higher in pregnancy rats in comparison with the virgins rats CI1 and CI2 infected with different T. cruzi strains. The rats IP1, showed 19 fetuses with weight and measure average of 2.86 g ± 2.19 and 2.63 ± 1.17 cm of length. One rat showed 1 fetus in the left uterine horn, other rat showed the left uterine horn with inflammated aspect and with fetal and placental rests, and 6 fetuses of normal aspect into right uterine horn; in two rats were observed 8 and 4 fetuses of normal aspect. The pregnant rats IP2, developed 28 fetuses with weight and measure average of 2.77 ± 0.77 g and 3.31 ± 1.99 cm; in one rat, the 4 fetuses (57.14%) of right uterine horn presented morphological malformations on the dorsal side of the body, tightness around the body and development his anterior right footpad with big size and the left uterine horn of same rat was observed 3 fetuses with normal aspect; other rat showed 2 fetuses dead and dense amniotic liquid into right horn, and 5 fetuses with normal aspect in the left uterine horn, in two rats were developed 8 and 6 fetuses with normal aspect respectively. The HP development 21 fetuses with normal aspect of weight and measure average of 6.16 ± 0.99 g and 2.88 ± 0.65 cm of length. The relation weight/length fetal (g/cm) in infected pregnant rats groups IP1 and IP2 was significantly less in comparison with fetuses of HP rats (P<0.00001). The comparison of the fetal weight and placental diameters of IP1, IP2 and HP rats were significant (P<0.001). In conclusion, acute infection with different T. cruzi strains in pregnant rats, produces pathologic restriction of fetal growth, functional structural morphological anomalies in the fetuses and death of some fetuses. The fetuses of HP rats did not show any anomaly.

Análisis de la composición poblacional de aislados venezolanos de Trypanosoma cruzi I, provenientes de un hospedador humano, un insecto triatomineo y un reservorio natural / Analysis of the population composition of venezuelans isolates of Trypanosoma cruzi I fron a human host, a triatomine insect and a nature reservoir

Se analizó la composición poblacional de aislados venezolanos pertenecientes al grupo Tel, provenientes de distintos hospedadores. El análisis fue realizado mediante la clonación de los aislados utilizando la técnica de plaqueo, de la cual se originaron clones de cada uno que posteriormente fueron comparados mediante la técnica de Amplificación Aleatoria de ADN Polimórfico (RAPD). La observación de los perfiles de bandas obtenidos mediante electroforesis en gel de agarosa, mostró diferencias en cuanto al número y la posición de bandas en los clones obtenidos de los aislados provenientes de humano y del reservorio natural (Dildelphis marsupiales), mientras que para el aislado proveniente del vector (Triatoma ningromaculata), todos los clones generaron perfiles de bandas similares. Estos resultados evidencian una heterogeneidad poblacional para el caso de los dos primeros aislados. El índice de variabilidad genética fue diferente para cada uno de los aislados, siendo mayor para dos aislados provenientes de dos pacientes chagásicos, mostrando un valor de 0.1652 y 0.0853 respectivamente, mientras que para el aislado proveniente del reservorio natural, se obtuvo un valor de 0.0312. Estos resultados indican polimorfismo existente entre clones provenientes de un mismo aislado, siendo indicativo de la existencia de heterogeneidad intrapoblacional, lo cual pudiese tener implicaciones en la diversidad de manifestaciones clínicas reportadas para infecciones con T. cruzi I.

It was analyzed the population composition of Venezuelan isolates belonging to the genotype Tel from different hosts. The analysis was carried out through the cloning of the isolates using the plating technique, obtaining clones of each one of them, which were afterward compared using the random amplified plymorphic DNA technique (RAPD). The observation of bands'profiles obtained by agarose gel electrophoresis, showed differences regarding to the number and position of the bands between the isolates from both humans and natural reservoir (Dildelphis marsupialis), except for the clones obtained from the vector isolate (triatoma nigromaculata), where all of them gave the same pattern of bands. This result reveals the presence of population heterogeneity for the isolates from human and natural host. The genetic variability index was different in each one of the isolates, being higher for the isolates fron two chagasic patientes, showing values of 0.1652 and 0.0853 respectivivly; and for the isolate fron the natural reservoir the index value was 0.0312. These results reveals the presence of polymorphism between the clones obtained from the same isolate, showing the existence of intra popultaion heterogenicity, wich might have implications on the diversity of clinical manifestations previously reported with T. cruzi I infections.

Trypanosoma cruzi: behavior of metatrypomastigotes from didelphis marsupialis and panstrongylus geniculatus

Trypanosoma cruzi coloniza las glándulas anales odoríferas de rabipelados o zarigüeyas donde se diferencia a metatripomastigotes que infectan a mamíferos por contaminación, en forma similar a los insectos vectores. Tripomastigotes metacíclicos obtenidos de las glándulas anales de Didelphis marsupialis y del intestino de Panstrongylus geniculatus, naturalmente infectados y capturados en áreas urbanas del valle de Caracas (Venezuela), fueron inoculados por vía intraperitoneal (i.p) en ratones NMRI para comparar su infectividad, tropismo tisular y virulencia. Metatripomastigotes de ambas fuentes produjeron 100 por ciento de infección y de mortalidad, con histotropismo en corazón, músculo esquelético, páncreas, colon, hígado y pulmón; sin embargo, tripomastigotes metacíclicos glandulares causaron niveles mas elevados de proliferación parasitaria en los tejidos. Ratones inoculados con metacíclicos de glándulas anales de rabipelados mostraron, adicionalmente, tropismo hacia la musculatura lisa de testículo, epidídimo, conducto deferente y vesícula seminal. Rabipelados controles inoculados i.p. con tripomastigotes luminales desarrollaron parásitos sanguíneos y glandulares; estos últimos inoculados i.p. en ratones produjeron parasitemias letales. Los resultados fueron discutidos en relación con la elevada variabilidad de las poblaciones de T. cruzi, la cual ha sido señalada como respuesta a diferentes y simultáneos ciclos de transmisión que se producen en ecótopos con particularidades propias. La importancia epidemiológica de la presencia de estadios metacíclicos de T. cruzi en las glándulas anales de rabipelados de áreas rurales y urbanas es enfatizada

Dietary fiber analysis of cassava using gravimetric methods

We report the application of a method which combines digestion with pancreatin and neutral detergent treatment in the analytical study of dietary fiber from cassava. The use of pancreatin previous to the detergent extraction enabled rapid filtration, thus giving more reproducible results for neutral detergent fiber (NDF). Acid detergent fiber (ADF), hemicellulose, lignin and pectin were also determined. The values obtained for NDF (4.65 per cent ) and pectin (1.17 per cent ) are very important, considering their role in the digestive process