Leukotriene B4 Loaded in Microspheres Inhibits Osteoclast Differentiation and Activation

Abstract To investigate osteoclast formation in vivo and if leukotriene B4 (LTB4) loaded in microspheres (MS) could be used as a therapeutical strategy to promote a sustained delivery of the mediator and prevent osteoclast differentiation. Methods: In vivo, apical periodontitis was induced in mice to investigate osteoclast differentiation and signaling in absence of 5-lipoxygenase (5-LO). In vitro, LTB4-MS were prepared using an oil-in-water emulsion solvent extraction-evaporation process. Characterization and efficiency of LTB4 encapsulation were investigated. J774A.1 macrophages were cultured in the presence of monocyte colony-stimulating factor (M-CSF) and ligand for receptor activator of nuclear factor kappa B (RANKL) and then stimulated with LTB4-MS. Cytotoxicity, in vitro MS-LTB4 uptake, osteoclast formation and gene expression were measured. Results: We found that 5-LO negatively regulates osteoclastic formation in vivo during apical periodontitis development. In vitro, LTB4-MS were up-taken by macrophages and were not cytotoxic to the cells. LTB4-MS inhibited osteoclast formation and the synthesis of osteoclastogenic genes Acp5, Mmp9, Calcr and Ctsk. LTB4-MS inhibited differentiation of macrophages into an osteoclastic phenotype and cell activation under M-CSF and RANKL stimulus.

Resumo O objetivo deste trabalho foi Investigar a formação de osteoclastos in vivo e se o leucotrieno B4 (LTB4) incorporado em microesferas (MS) poderia ser usado como estratégia terapêutica para promover uma entrega sustentada do mediador e prevenir a diferenciação dos osteoclastos. Métodos: In vivo, a periodontite apical foi induzida em camundongos para investigar a diferenciação e sinalização de osteoclastos na ausência de 5-lipoxigenase (5-LO). In vitro, LTB4-MS foi preparado usando um processo de evaporação e extração de solvente de emulsão de óleo em água. A caracterização e a eficiência do encapsulamento do LTB4 foram investigadas. Macrófagos J774A.1 foram cultivados na presença de fator estimulador de colônia de monócitos (M-CSF) e ligante para o receptor ativador do fator nuclear kappa B (RANKL) e, então, estimulados com LTB4-MS. Citotoxicidade, captação in vitro de MS-LTB4, formação de osteoclastos e expressão gênica foram avaliadas. Resultados: A via 5-LO regula negativamente a formação de osteoclastos in vivo durante o desenvolvimento da periodontite apical. In vitro, LTB4-MS foram fagocitadas pelos macrófagos e não foram citotóxicos para as células. LTB4-MS inibiu a formação de osteoclastos e a síntese dos genes pró-osteoclastogênicos Acp5, Mmp9, Calcr e Ctsk. Conclusões: LTB4-MS inibiu a diferenciação de macrófagos em um fenótipo osteoclástico e a ativação celular sob estímulo de M-CSF e RANKL.

Metaloproteinases da matriz: papel no desenvolvimento das lesões periapicais e modulação após tratamento endodôntico / Matrix metalloproteinases: role in the development of apical periodontitis and modulation after endodontic treatment

Introduction: Apical periodontitis represents a local immune response directed against the progression of microorganisms from the dental pulp to the apical foramen and periapical tissues, which results in bone and dental resorption. The aim of this review is to describe the expression of this group of proteases in apical periodontitis and its modulation during the periapical healing phase following root canal treatment. Literature review: The pathogenesis of apical periodontitis involves degradation of several extracellular matrix components. Matrix metalloproteinases (MMPs) are expressed in response to specific stimuli by resident cells of connective tissue during tissue remodeling and by inflammatory cells that arrive into the surrounding tissues during inflammatory events. MMPs have been reported in apical periodontitis, either experimentally induced or obtained from humans and there is evidence that these enzymes show diff erent expression patterns in granulomas and periapical cysts. Root canal therapy is important for the reduction of periapical inflammation as well as the synthesis of MMPs, especially when using a calcium hydroxide-based dressing. Conclusion: Apical periodontitis show high expression of matrix metalloproteinases and root canal treatment results in less expression of MMPs when compared to untreated apical periodontitis.

Introdução: A lesão periapical representa a resposta imunoinflamatória devido ao aumento do número e progressão de micro-organismos advindos dos canais radiculares contaminados em direção aos tecidos apicais e periapicais, resultando em reabsorção óssea. O objetivo desta revisão será abordar a importância das metaloproteinases da matriz no desenvolvimento das lesões periapicais e sua modulação durante a fase de reparação tecidual depois de instituído o tratamento endodôntico. Revisão da literatura: A patogênese da lesão periapical envolve a degradação progressiva de diversos componentes da matriz extracelular. Dentre as proteases responsáveis pela degradação destes componentes estão as metaloproteinases da matriz (MMPs). Estas proteinases são expressas em resposta a estímulos específicos pelas células residentes do tecido conjuntivo durante o processo de remodelação tecidual e por células inflamatórias que invadem os tecidos durante eventos inflamatórios. As MMPs foram descritas em lesões periapicais experimentais e em humanos e existem evidências de que estas enzimas apresentam padrões de expressões diferentes em granulomas e cistos periapicais. A terapia endodôntica é importante para a redução da inflamação periapical assim como da síntese das MMPs, principalmente quando utilizado um curativo de demora à base de hidróxido de cálcio. Conclusão: As lesões periapicais apresentam alta expressão de metaloproteinases da matriz e o tratamento endodôntico em dentes com lesão periapical resulta em menor expressão de MMPs quando comparado às lesões periapicais não tratadas.

Cirurgia do periápice para remoção de lesões granulomatosas: relato de caso / Periapical surgery to remove granulomatous lesion

Periapical granuloma is a histological term that refers to the formation of a mass of granulomatous tissue around the apex of a tooth resulting from inflammation and necrosis of the pulp tissue. It consists of an infiltrate of inflammatory cells such as macrophages, plasmocytes and lymphocytes, as well as fibroblasts, collagen fibers and capillaries. Periapical surgery is an alternative for preserving the tooth in the oral cavity in cases where periapical inflammation is persistent even after treatment of root canals. The objective of this study was to report a clinical case in which the surgical technique was used to remove granulomatous lesions from a patient, female, with a history of recurrent periapical abscess without painful symptomatology in the region of the anterior 11,12 and 13 teeth. The histopathological exam demonstrated the presence of a granulomatous tissue with intense inflammatory infiltrate mixed, permeated with lymphocytes and high number of plasmocytes, confirming the diagnosis of periapical granuloma. The treatment was considered successful since the patient remained asymptomatic and there was incorporation of the inorganic bovine bone graft and initiation of bone neoformation in the periapical region.

Granuloma periapical é um termo histológico que refere-se à formação de uma massa de tecido granulomatoso ao redor do ápice de um dente, decorrente da inflamação e necrose do tecido pulpar. É constituído por um infiltrado de células inflamatórias como macrófagos, plasmócitos e linfócitos, além de fibroblastos, fibras colágenas e capilares. A cirurgia do periápice é uma alternativa para preservação do dente na cavidade bucal nos casos em que a inflamação periapical é persistente mesmo após tratamento dos canais radiculares. O objetivo desse trabalho é relatar um caso clínico no qual a técnica cirúrgica do periápice foi utilizada para remoção de lesões granulomatosas de uma paciente, do sexo feminino, com histórico de abscesso periapical recidivante sem sintomatologia dolorosa na região dos dentes anteriores superiores 11, 12 e 13. O exame histopatológico demonstrou a presença de um tecido granulomatoso com intenso infiltrado inflamatório misto, permeado com linfócitos e elevado número de plasmócitos, confirmando o diagnóstico de granuloma periapical. O tratamento foi considerado exitoso, visto que a paciente se manteve asintomática e houve incorporação do enxerto ósseo bovino inorgânico e início da neoformação óssea na região periapical.

Avaliação da experiência odontológica prévia, hábitos alimentares e de higiene bucal em pacientes com paralisia cerebral / Evaluation of previous dental experience, eating habits and oral hygiene in patients with cerebral palsy

Avaliar descritivamente a experiência odontológica prévia, práticas de higiene bucal e hábitos alimentares de pacientes com Paralisia Cerebral (PC). Foi realizado um estudo observacional, do tipo transversal, com pacientes diagnosticados com PC através uma amostra de conveniência (n=27), com idade entre 3 e 14 anos, de ambos os sexos, que buscaram atendimento no ambulatório de pediatria do Hospital Universitário Materno Infantil, em São Luís ­ MA, no período de julho a outubro de 2018. Foi aplicado um questionário estruturado ao cuidador contendo história médica e odontológica da criança, avaliando também as práticas de higiene bucal e hábitos alimentares. Verificou-se que 66.67% dos pacientes eram do sexo masculino, com média de idade de 8,5 anos. Todos os acompanhantes eram do sexo feminino e a maior parte apresentou baixa escolaridade. Dentro os participantes, 92,59% não apresentavam habilidade para realizar escovação dentária e 51,85% dos cuidadores nunca receberam orientação sobre os cuidados de higiene bucal; 70,37% dos participantes fazem o consumo de alimentos açucarados e pastosos, e mais da metade já tiveram experiência de cárie. O estudo mostrou deficiência na higienização e um alto consumo de açúcar. Nesse sentido, práticas de higiene bucal e instruções dietéticas devem ser reforçadas e orientadas aos cuidadores a fim de contribuir para melhor assistência e prevenção à saúde.

Descriptively evaluate the previous dental experience, oral hygiene practices and eating habits of patients with Cerebral Palsy (CP). An observational, cross-sectional study was carried out with patients diagnosed with CP through a convenience sample (n = 27), aged between 0 and 18 years, of both sexes, who sought care at the pediatric outpatient clinic of Materno Infantile University Hospital, at Federal University of Maranhão, in São Luís - MA, from July to October 2018. A structured questionnaire was applied to the caregiver containing the child's medical and dental history, also evaluating oral hygiene practices and eating habits. It was found that 66.67% of the patients were male, with a mean age of 8.5 years. All companions were female and most had low education. Within the participants, 92.59% did not have the ability to perform tooth brushing and 51.85% of the caregivers never received guidance on oral hygiene care; 70.37% of participants consume sugary and pasty foods, and more than half have had caries experience. The study showed poor hygiene and a high consumption of sugar. In this sense, oral hygiene practices and dietary instructions should be reinforced and oriented to caregivers in order to contribute to better health care and prevention.