RESUMO
Se evaluó la actividad antifúngica in vitro de 4 cepas de Burkholderia cepacia aisladas de rizósfera de maíz amarillo (Zea mays L.) de diferentes plantaciones del municipio Montes, estado Sucre, Venezuela, contra hongos fitopatógenos. Se comparó la actividad antagónica con una cepa control de origen ambiental CVCM 626 (ATCC 25416) y un aislado clínico CVCM 1282, empleando el método directo de enfrentamientos duales y un método indirecto de difusión con discos de agar. Las pruebas se realizaron por triplicado, se midió el diámetro de los halos de inhibición formados y se aplicó un análisis de varianza de una vía, así como la prueba Tukey. Las cuatro cepas aisladas (SR2, ER3, LG12 y N10) mostraron una actividad antifúngica similar sobre Trichoderma viride y ocasionaron una inhibición total o parcial de la esporulación en hongos como Fusarium moniliforme, Fusarium solani, Aspergillus niger y Penicillium expansum. Los mayores halos de inhibición fueron producidos por la cepa control CVCM 626, observándose un promedio de 9,9 mm. No se evidenció ningún nivel de antagonismo utilizando el aislado clínico CVCM 1282. B. cepacia mostró un aumento de la actividad antagónica en presencia de algunas fuentes de carbono como xilosa, maltosa, manosa y fructosa y de aminoácidos como cistina, valina y leucina, en un rango de pH ácido (4 a 5,5), y a una temperatura de 35 ºC.
The antifungal activity against phytophatogenic fungi of four Burkholderia cepacia strains isolated from yellow corn (Zea mays L.) from different plantations at the Montes Municipality, Sucre State, Venezuela, was evaluated in vitro. The antagonist activity was compared by using a control strain of environmental origin CVCM 626 (ATCC 25416) and one clinical isolate CVM 1282, with the direct dual confrontation method, and an indirect method with agar-diffusion disks. The tests were done in triplicate, measuring the inhibition halos that occurred, and applying a one way variance analysis, as well the Tukey test. The four isolated strains (SR2, ER3, LG12 and N10) showed similar antifungal activity over Trichoderma viride and produced a total or partial inhibition of sporulation of fungi such as Fusarium moniliforme, Fusarium solani, Aspergillus niger and Penicillium expansum. The largest inhibition halos were produced by the control strain CVCM 626, with a 9,9 mm average. There was no evidence of any antagonism level using the clinical isolate CVCM 1282. Burkholderia cepacia showed an increase of antagonist activity in presence of some carbon sources such as xilose, maltose, mannose, and fructose and of amino-acids such as cystine, valine and leucine, in an acid pH range (4 to 5.5), and a 35ºC temperature.
RESUMO
Se evaluó la presencia de aflatoxinas totales en muestras de alimentos concentrados para pollos de engorde y se aplicaron técnicas de control para los hongos aflatoxigénicos y sus toxinas (aflatoxinas), utilizando un extracto comercial de Citrus limon. Para ello se recolectaron al azar 50 muestras de un lote de alimentos concentrados para pollos de engorde. Se cuantificaron las concentraciones de aflatoxinas a través del método de enzimoinmunoensayo competitivo (ELISA) y se aplicó un sistema de control contra aflatoxinas, utilizando un extracto de Citrus limon. Finalmente, se determinó la capacidad antifúngica del extracto sobre el crecimiento de los hongos aflatoxigénicos aislados de las muestras. Se detectó que el 90% de las muestras analizadas estaban contaminadas con aflatoxinas, encontrándose en el 54% de las mismas un rango de concentraciones entre 5 a 14 µg/kg. El extracto de Citrus limon resultó ser un potente antiaflatoxigénico y antifúngico, reduciendo las concentraciones de aflatoxinas en las muestras de alimentos para pollos de engorde hasta en un 73,6%, e inhibiendo por completo el crecimiento de los hongos descritos como aflatoxigénicos.
The presence of total aflatoxins in samples of concentrated chicken feed was evaluated, and control techniques for aflatoxigenic fungi and their toxins (aflatoxins) using a Citrus limon commercial extract were applied. For this purpose, 50 samples were collected randomly from a lot of concentrated chicken feed. The aflatoxin concentrations were quantified through a competitive enzyme-linked-immunosorbent-assay (ELISA), and an aflatoxin control system was applied using a Citrus limon extract. Finally, the antifungal capacity of the extract over the growth of the aflatoxigenic fungi isolated from the samples was determined. It was established that 90% of the analyzed samples were contaminated with aflatoxins, and 54% of them had a 5-14 µg/kg concentration range. The Citrus limon extract was a potently antiaflatoxigenic and antifungal, reducing the aflatoxin concentrations in the chicken feed samples in up to 73.6%, and totally inhibiting the growth of fungi described as aflatoxigenic.
RESUMO
Se evaluó la calidad microbiológica de camarones (Litopenaeus schmitti), mejillones (Perna viridis) y calamares (Loligo plei) congelados producidos en Cumaná, Estado Sucre, Venezuela. Para ello, se recolectaron 60 muestras divididas en dos marcas comerciales distintas: 20 muestras correspondieron a camarones (Litopenaeus schmitti), 20 a mejillones (Perna viridis) y 20 a calamares (Loligo plei). Se determinaron las Unidades Formadoras de Colonia por gramo (UFC/g) aplicando el método de las diluciones decimales seriadas. Posteriormente, se aislaron e identificaron las especies bacterianas mesófilas y psicrotróficas presentes. Se estableció la frecuencia de los microorganismos aislados y finalmente fue determinada la actividad enzimática de los microorganismos aislados con mayor frecuencia. Los recuentos promedio de las UFC/g de las bacterias en las muestras de camarones se ajustan a la Normativa para ellos; sin embargo, los recuentos de las UFC/g en las muestras de mejillones y calamares superaron los límites establecidos internacionalmente. La mayor frecuencia de bacterias mesófilas y psicrotróficas aisladas de las muestras de camarones (Litopenaeus schmitti) fue para Acinetobacter (65 % y 85 %, respectivamente); en las muestras de mejillones (Perna viridis) el género mesófilo más aislado fue Micrococcus (65 %) y el género psicrotrófico aislado con mayor frecuencia fue Acinetobacter (50 %). En las muestras de calamares (Loligo plei), Micrococcus fue la bacteria mesófila aislada con mayor frecuencia, mientras que Achromobacter resultó la más aislada dentro de las bacterias psicrotróficas (55 %). Las enzimas producidas por las bacterias aisladas con mayor frecuencia fueron: fosfohidrolasas, esterasas, esterasa-lipasa. Los microorganismos que presentaron mayor actividad enzimática fueron: Aeromonas salmonicida y Micrococcus nishinomiyaensis.
The microbiological quality of frozen shrimps (Litopenaeus schmitti), mussels (Perna viridis) and squids (Loligo plei) produced in Cumana, Estado Sucre, Venezuela. For this, 60 samples from two different commercial labels were collected corresponding to: 20 samples of shrimps (Litopenaeus schmitti), 20 of mussels (Perna viridis) and 20 of squids (Loligo plei). The Colony Forming Units per gram (CFU/g) were determined through the serial decimal dilution method. Later, mesophil and psychotrophic bacterial species present were isolated and identified. The frequency of the isolated microorganisms was established and finally the enzymatic activity of the most frequent microorganisms isolated was determined. The mean CFU/g and bacterial counts in the prawn samples correspond to those previously established; nevertheless, the CFU/g counts in the mussel and squid samples were higher than internationally established limits. The highest frequency of mesophil and psychotrophic bacteria isolated from shrimps samples (Litopenaeus schmitti) corresponded to Acinetobacter (65% and 85% respectively); in the mussel samples (Perna viridis) the mesophil genus most frequently isolated was Micrococcus (65%) and the psychotrophic genus most frequently isolated was Acinetobacter (50%). In the squid (Loligo plei) samples, the mesophil bacterium most frequently isolated was Micrococcus, while Achromobacter turned out to be the most frequently isolated within the psychotrophic bacteria (55%). The enzymes produced by the most frequently isolated bacteria were: phosphohydrolases, stereases, and estero-lipases. The microorganisms that showed greatest enzymatic activity were: Aeromonas salmonicida and Micrococcus nishinomiyaensis.