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1.
Mem. Inst. Oswaldo Cruz ; 94(4): 469-75, July-Aug. 1999.
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-241557

RESUMO

Twenty-six human respiratory syncytial virus strains (subgroup A) isolated from three outbreaks in Havana City during the period 1994/95, 1995/96 and 1996/97 were analyzed to determine their antigenic and genetic relationships. Analyses were performed by monoclonal antibodies and restriction mapping (N gene) following amplification of the select region of the virus genome by polymerase chain reaction. All isolated strains were classified as subgroup A by monoclonal antibodies and they showed a restriction pattern NP4 that belonged to subgroup A. Thus the results obtained in this work, showed a close relation (100 percent) between antigenic and genetic characterization of the isolated strains in our laboratory. These methods permit the examination of large numbers of isolates by molecular techniques, simplifying the researchs into the molecular epidemiology of the virus


Assuntos
Embrião de Galinha , Criança , Lactente , Anticorpos Monoclonais/análise , Anticorpos Antivirais/análise , Infecções por Vírus Respiratório Sincicial/imunologia , Vírus Sincicial Respiratório Humano/isolamento & purificação , Cuba/epidemiologia , Surtos de Doenças , Reação em Cadeia da Polimerase , Infecções por Vírus Respiratório Sincicial , Infecções por Vírus Respiratório Sincicial/epidemiologia , Infecções por Vírus Respiratório Sincicial/virologia , Vírus Sincicial Respiratório Humano/genética , Mapeamento por Restrição
2.
Rev. bioméd. (México) ; 10(2): 77-84, abr.-jun. 1999. graf
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-254626

RESUMO

Se realizó el estudio de caracterización y análisis de la variabilidad antigénica con un panel de 10 anticuerpos monoclonales que reconocen a epítopes lineales de la protéina G, a 15 cepas de Virus Sincitial Respiratorio aisladas en dos brotes ocurridos en Ciudad Habana entre los meses de octubre a enero (1994-1995) y octubre (1996), respectivamente. Para ello se utilizaron dos cepas de referencia: la Cepa Long y la Cepa A/Mon/3/88. El ELISA fue el método empleado para los ensayos. Los resultados mostraron la variabilidad de la proteína G entre los aislamientos y su relación antigénica con la cepa prototipo Long, además de confirmar que todas las cepas que habían circulado en estos períodos correspondían antigénicamente al Subgrupo A


Assuntos
Humanos , Anticorpos Monoclonais , Variação Antigênica , Surtos de Doenças , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Vírus Sincicial Respiratório Humano/isolamento & purificação , Vírus Sincicial Respiratório Humano/genética , Vírus Sincicial Respiratório Humano/imunologia , Cuba/epidemiologia , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática
3.
Rev. cuba. med. trop ; 50(1): 36-41, 1998. tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-242559

RESUMO

Con el objetivo de identificar en forma rápida los virus de influenza, se estudiaron 148 muestras de pacientes con sintomatología compatible con esta entidad Para ello fue desarrollado un cultivo rápido de células MDCK-1, en placas de 96 pozuelos, donde fueron inoculados los exudados nasofaríngeos o gargarismos, e incubados durante una noche a 37 grados C, el medio fue eliminado y las células fueron lavadas con buffer fosfato salina; posteriormente fueron fijadas con metanol y los antígenos virales detectados por la técnica de inmunoperoxidasa mediante un pool de anticuerpos monoclonales contra la influenza A y otro contra la influenza B. Para el subtipaje en A (H3N2) y A (H1N1). Del total de muestras positivas (136) correspondió 72,1 porciento para el tipo A y a los subtipos H1 y H3, 34,6 y 37,5 porciento, respectivamente. La influenza B se detectó en 27,9 porciento de las 148 muestras investigadas, sólo 12 resultaron negativas (8,1 porciento). Se recomienda la utilización de esta técnica como un método de diagnóstico rápido, sensible, conveniente y fácil de realizar e interpretar para la detección t caracterización en tipo y subtipo de los virus de influenza a partir de exudados nasofaríngeos o gargarismos


Assuntos
Técnicas de Cultura de Células , Exsudatos e Transudatos , Técnicas Imunoenzimáticas , Vírus da Influenza A/isolamento & purificação , Vírus da Influenza B/isolamento & purificação , Nasofaringe/imunologia
4.
Mem. Inst. Oswaldo Cruz ; 92(3): 389-93, May-Jun. 1997. ilus, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-189312

RESUMO

The aim of this study was to develop a polymerase chain reation (PCR) for detection of respiratory syncytial virus (RSV) genomes. The primers were designed from published sequences and selected from conserved regions of the genome encoding for the N protein of subgroups A and B of RSV. PCR was applied to 20 specimens from children admitted to the respirary ward of "William Soler" Pediatric Hospital in Havana City with a clinical diagnosis of bronchiolitis. The PCR was compared with viral isolation and with an indirect immunofluorescence technique that employs monoclonal antibodies of subgroups A and B. Of 20 nasopharyngeal exudates, 10 were found positive by the three assayed methods. In only two cases, samples that yielded positive RNA-PCR were found negative by indirect immunofluorescence and cell culture. Considering viral isolation as the "gold standard" technique, RNA-PCR had 100 per cent sensitivity and 80 per cent specificity. RNA-PCR is a specific and sensitive technique for the detection of the RSV genome. Technical advantages are discussed.


Assuntos
Humanos , Criança , Reação em Cadeia da Polimerase , Vírus Sinciciais Respiratórios , Bronquiolite/diagnóstico , Cuba , Mapeamento por Restrição
5.
Rev. cuba. med. trop ; 49(2): 120-4, 1997. tab, graf
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-228073

RESUMO

Se purificó una inmunoglobulina G de ratón a partir de suero por cromatografía de afinidad en proteína A. Con esta preparación se inmunizaron los conejos cuyos sueros fueron capaces de reconocer al antígeno inyectado mediante inmunodifusión doble. Los anticuerpos fueron precipitados del suero de conejo y purificados mediante cromatografía de intercambio iónico. Esta preparación fue conjugada a isotiocianato de fluorescencia según la tecnología convencional. El conjugado obtenido fue evaluado con las cepas de referencia de virus Parainfluenza 1, 2, 3; Adenovirus; virus sincitial respiratorio y virus influenza A y B por una técnica de inmunofluorescencia indirecta y muestras positivas de VIH mediante citometría de flujo. En ambos casos se utilizaron anticuerpos monoclonales específicos. Se evaluaron muestras clínicas de pacientes con infección respiratoria aguda


Assuntos
Animais , Camundongos , Coelhos , Cromatografia de Afinidade , Cromatografia por Troca Iônica , Citometria de Fluxo/métodos , Técnica Indireta de Fluorescência para Anticorpo , Imunoglobulina G/isolamento & purificação , Camundongos/sangue , Punções , Proteína Estafilocócica A
6.
Rev. cuba. med. trop ; 49(1): 21-3, 1997. ilus, tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-208295

RESUMO

Se desarrolló la reacción en cadena de la polimerasa (RCP) para la identificación del virus sincitial respiratorio (VSR) con el uso de la cepa de referencia. La alta sensibilidad y la especifidad obtenidas en nuestro trabajo demuestran la utilidad de la RCP para la detección del genoma del VSR y su aplicación en el diagnóstico


Assuntos
Humanos , Reação em Cadeia da Polimerase , Vírus Sincicial Respiratório Humano/isolamento & purificação , Genoma Viral , Vírus Sincicial Respiratório Humano/genética
8.
Rev. cuba. med. trop ; 48(2): 136-7, mayo-ago. 1996.
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-184526

RESUMO

Se detecto un alto numero de casos de enfermedades repiratorias agudas en ninos menores de 1 ano, ingresados en un hospital de Ciudad de La Habana. De 93 pacientes estudiados se obtuvieron 25 cepas del virus sincitial respiratorio. Los aislamientos virales fueron multiplicados en celulas HEP-2, y despues de observarse un efecto citopatico del 80 por ciento se clasificaron en subgrupos por la tecnica de immunofluorescencia indirecta del subgrupo A. Este tipo de estudio es el primero realizado en nuestro pais, lo cual nos permitio profundizar en la causa viral de estas enfermedades y conocer que durante el brote circulo el subgru-po A del virus sincitial respiratorio


Assuntos
Humanos , Recém-Nascido , Lactente , Imunofluorescência , Vírus Sincicial Respiratório Humano/classificação , Vírus Sincicial Respiratório Humano/isolamento & purificação , Infecções Respiratórias
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