Atividade antifúngica, in vitro, do óleo de café verde / Antifungal activity, in vitro, of the green coffee oil

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do contato direto e da fração volátildo óleo de café verde, testado nas concentrações de 500, 1.000, 1.500 e 2.000 µL L-1, sobre o crescimento micelial e a esporulação dos fungos Penicillium roqueforti e Rhizopus stolonifer. O óleo essencial de cravo-da-índia na concentração de 800 µL L-1 foi utilizado para comparação. Nas concentrações de 1.500 e 2.000 µL L-1, o óleo de café verde em contato direto proporcionou redução da esporulação do fungo R. stolonifer , sendo estatisticamente semelhante ao óleo de cravo-da-índia. Na fração volátil do óleo de café verde, observou-se redução significativa da esporulação de P. roqueforti e R. stolonifer na concentração de 2.000 µL L-1. O óleo de café verde, em contato direto ou por volatilização, reduziu significativamente o crescimento micelial e a esporulação de ambos os fungos em comparação com a testemunha.(AU)

The objective of this study was to evaluate the effect of direct contact and volatile fraction of from green coffee oil, tested at concentrations of 500, 1,000, 1,500 and 2,000 µL L-1, on mycelial growth and sporulation of Penicillium roqueforti and Rhizopus stolonifer . The essential oil of clove at a concentration of 800 µL L-1 was used for comparison. At concentrations of 1,500 and 2,000 µL L-1, the green coffee oil in direct contact caused a reduction of sporulation for R. stolonifer, similar to clove oil. In the volatile fraction of the green coffee oil, there was a significant reduction in sporulation of P. roqueforti and R. stolonifer at a concentration of 2,000 µL L-1. The green coffee oil, in direct contact or by volatilization, significantly reduced the mycelial growth and sporulation of both fungi compared to the control.(AU)

Imobilização de fungos filamentosos com potencial para uso agroindustrial / Immobilization of filamentous fungi with potential for agribusiness

A imobilização celular representa uma alternativa para a condução de bioprocessos. As células ficam retidas em matrizes e podem ser utilizadas por longos períodos. O objetivo deste trabalho foi testar uma nova metodologia de imobilização de fungos com custo reduzido, avaliar a viabilidade e segurança dos fungos submetidos ao novo método de encapsulamento e determinar a temperatura ideal para armazenar os fungos imobilizados. Os micélios dos fungos Aspergillus niger, Cladosporium cladosporioides e Penicillium solitum foram misturados com 15 g de arroz triturado e 3 g de alginato de sódio, que gotejava em uma solução de cloreto de cálcio a 0,25 M para a formação dos grânulos. Após a secagem em estufa a 26ºC, os grânulos foram armazenados em temperaturas ambiente, geladeira e freezer. Os plaqueamentos foram realizados a cada 15 dias em meio de cultura. As avaliações do tamanho das colônias e esporulação foram realizadas 7, 14 e 21 dias após o plaqueamento, durante 195 dias para A. niger, 225 dias para C. cladosporioides e 210 dias para P. solitum. A temperatura de armazenamento não afetou o desenvolvimento micelial de A. niger e P. solitum. Porém, a esporulação foi reduzida para os grânulos armazenados no freezer. O desenvolvimento micelial de C. cladosporioides foi influenciado pela temperatura. Os grânulos conservados em temperatura ambiente tiveram menor viabilidade. Na análise de microscopia eletrônica de varredura, observou-se que a imobilização é um método seguro no qual o micélio fúngico permanece no interior do grânulo, facilitando o transporte, o armazenamento e a aplicação de micro-organismos.(AU)

Cellular immobilization represents an alternative for the bioprocess conduction, in which the cells are kept in a matrix and can be used over long periods. The objective of this work was to test a new fungi immobilization methodology with reduced cost to evaluate the viability of these fungi when submitted to the new encapsulation method, and to determine the ideal temperature to store the immobilized fungi. The mycelium of the fungi Aspergillus niger, Cladosporium cladosporioides and Penicillium solitum were mixed with 15 g of titrated rice and 3 g of sodium alginate, which was dripped in a 0.25 M calcium chloride solution for the formation of pellets. After drying in an oven at 26ºC, the granules were stored at three temperatures: room, refrigerator and freezer. The platings were carried out every 15 days in culture medium. The evaluations of the colony size and sporulation were carried out 7, 14 and 12 days after plating, for 195 days for A. niger, 225 days for C. cladosporioides, and 210 days for P. solitum. Storage temperature did not affect the mycelial development of A. niger and P. solitum. However, sporulation was reduced for the granules stored in the freezer. The mycelial development of C. cladosporioides was influenced by temperature. The granules conserved at room temperature had lower viability than those stored in the refrigerator and freezer. In the Scanning Electronic Microscopy analysis, it was observed that the immobilization is a safe method in which the fungus mycelium remains inside the granule, facilitating transport, storage and application of micro-organisms.(AU)

Methods to preserve potentially toxigenic fungi

Microorganisms are a source of many high-value compounds which are useful to every living being, such as humans, plants and animals. Since the process of isolating and improving a microorganism can be lengthy and expensive, preserving the obtained characteristic is of paramount importance, so the process does not need to be repeated. Fungi are eukaryotic, achlorophyllous, heterotrophic organisms, usually filamentous, absorb their food, can be either macro or microscopic, propagate themselves by means of spores and store glycogen as a source of storage. Fungi, while infesting food, may produce toxic substances such as mycotoxins. The great genetic diversity of the Kingdom Fungi renders the preservation of fungal cultures for many years relevant. Several international reference mycological culture collections are maintained in many countries. The methodologies that are most fit for preserving microorganisms for extended periods are based on lowering the metabolism until it reaches a stage of artificial dormancy . The goal of this study was to analyze three methods for potentially toxigenic fungal conservation (Castellani's, continuous subculture and lyophilization) and to identify the best among them.

Biological control and bioactive microbial metabolites: a coffee quality perspective / Controle biológico e metabólitos microbianos bioativos: uma perspectiva da qualidade do café

The improvement of techniques of biological control and the use of metabolites produced by microorganisms to obtain products that can be applied in various fields, is getting stronger in face of the undeniable advantages in relation to the models currently in adopted. This review, besides general considerations about the principles and the application of measures of biological control and usage of metabolites produced by microorganisms as sustainable alternatives for the agrochemical segment, among others, reports theexperience lived by the author and the institutions to which she is associated, concerning identification, characterization and development of a biological fungicide resulting from the encapsulation of the fungus Cladosporium cladosporioides (Fres.) de Vries, after proving its bioprotecting action on the quality of the coffee. The possibility of using microorganisms as a source of metabolites obtained from biological extracts, with applications in various fields, is also presented and discussed.

O aprimoramento das técnicas de controle biológico e o aproveitamento de metabólitos produzidos por microrganismos para obtenção de produtos aplicáveis em várias áreas do conhecimento humano, vem se fortalecendo diante de inegáveis vantagens em relação aos modelos hoje adotados. A presente revisão, além de considerações gerais sobre princípios e aplicações de medidas de controle biológico e de aproveitamento de metabólitos produzidos por microrganismos como alternativas de sustentabilidade para o segmento de agroquímicos entre outros, relata a experiência vivenciada pela autora e instituições às quais encontra-se associada com relação à identificação, caracterização e desenvolvimento de um fungicida biológico resultante do encapsulamento do fungo Cladosporium cladosporioides (Fres.) de Vries, após a comprovação de sua ação bioprotetora sobre a qualidade do café. A possibilidade da utilização de microrganismos como fonte de metabólitos obtidos de extratos biológicos, com aplicações em vários setores do conhecimento, também é apresentada e discutida.

Avaliação in vitro da atividade fungitóxica de extratos de condimentos na inibição de fungos isolados de pães artesanais / In vitro evaluation of the fungitoxic activity of seasonings on the inhibition of fungi isolated from homemade breads

Objetivou-se, na presente pesquisa, avaliar a atividade antifúngica in vitro de alho, gengibre, orégano, cravo, canela e tomilho sobre a inibição e o desenvolvimento de Aspergillus ochraceus, Penicillium roqueforti, Rhizopus stolonifer, desenvolvidos em pães artesanais. Para cada planta foram preparados extratos alcólicos (EA10%, EA20% e EA25%), extrato aquoso (EAQ10%), extrator alcoólico puro (EAP) e testemunha sem extrato e álcool. Para alho, gengibre, orégano incluiu-se o extrato alcoólico da planta fresca (EAF 10%). Os experimentos foram instalados no Laboratório de Fitopatologia do EcoCentro/EPAMIG, Lavras, MG e no Laboratório de Fitopatologia do Incaper/CRDS-CS, em Domingos Martins, ES. Os tratamentos foram aplicados sobre os fungos inoculados em placas de petri, em meio BDA. Calcularam-se médias do Índice de Velocidade de Crescimento Micelial (IVCM) e esporulação. Os EA de plantas desidratadas a 10%, 20% e 25% inibiram totalmente o crescimento micelial dos fungos estudados, com exceção do EA 25% de alho sobre o Penicillium roqueforti e o EA 25% de gengibre sobre o desenvolvimento do Aspergillus ochraceus que não se diferenciaram da testemunha. O EA de alho teve um efeito não inibitório sobre P. roqueforti. Os EA, EAF e EAP apresentaram menor esporulação em relação à testemunha, exceto com gengibre e cravo sobre a esporulação do R. stolonifer e o EAQ apresentou um efeito semelhante ao da testemunha.

This research was carried out to evaluate the in vitro anti-fungus activity of alcoholic extracts of garlic, ginger, oregano, clove, cinnamon, and thyme on the inhibition and development of Aspergillus ochraceus, Penicillium roqueforti, and Rhizopus stolonifer, which develop in homemade breads. For each commercial seasoning, alcoholic extracts (AE) were prepared (AE10%, AE20% and AE25%) as well as aqueous extract (AQE) at 10%, pure alcoholic extract (PAE), and control without extract and alcohol. For garlic, ginger and oregano, a fresh plant alcoholic extract (FAE10%) was included. The experiments were installed at Plant Pathology Laboratories, EcoCentro/EPAMIG, MG and at Incaper/CRDS-CS in Domingos Martins, ES. The treatments were applied to thefungi inoculated on Petri dishes, on BDA medium. Mycelial Index Growth Speed (MIGS) and sporulation were calculated. All of the AE from dehydrated plants (10%, 20%, and 25%) showed significant inhibitory effect on the mycelial growth and fungus sporulation,and an unstable performance was observed when the AE seasoning concentration was 0%. The control presented higher MIGS and sporulation. Garlic AE25% on Penicillium roqueforti and ginger AE25% on Aspergillus ochraceus did not differ from the control.Garlic AE did not present an inhibitory effect on P. roqueforti. The AE, FAE and PAE presented lower sporulation in relation to the control, exception made to ginger and clove on the sporulation of R. stolonifer, and the AQE showed an effect similar to the control.

Influência do processamento por via úmida e tipos de secagem sobre a composição, físico química e química do café (Coffea arabica L) / Influence of the wet processing and drying types on chemical and physicochemical composition of coffee (Coffea arabica L. )

O café (Coffea arabica L.) é um importante produto de exportação brasileira, por fazer parte do hábito alimentar da população de diversos países. Sua produção vem passando por transformações tecnológicas que têm como objetivo agregar valores qualitativos ao produto destinado tanto para mercado interno como externo. A exportação do café e de produtos alimentícios deve se adequar aos programas de qualidade estabelecidos por acordos políticos internacionais. Assim sendo, objetivou-se, nesse estudo, verificar a influência do método de preparo via úmida com tipos distintos de secagens, na obtenção do café cereja descascado, sobre a composição, físico-química e química do café. Houve influência da forma, preparo e tipo de secagem sobre as principais características estudadas. O café cereja descascado apresentou diferenças nos principais indicadores químicos físico-químicos e com uma superioridade para esse método de preparo com secagem exclusiva no terreiro, em diversos aspectos. Houve redução na condutividade elétrica, lixiviação de potássio e aumento da atividade da polifenoloxidase.

Coffee (Coffea arabica L.) is an important Brazilian export product, being part of the eating habit in several countries. Its production has experienced technological transformations, with the aim at adding quality values to the product destined to internal as well as to external market. The export of coffee and food products must adjust to the quality programs established by international political agreements. In this context, this work was carried out to verify the influence of the wet processing using different drying types on the obtentainment of the husked coffee cherry on the chemical and physicochemical composition of the coffee. There was influence of the preparation and the drying type methods on the main studied characteristics. The peeled red cherry coffee presented differences in the main chemical and physicochemical indicators, with a superiority in the preparation method with exclusive drying on the patio, in several aspects. Reduction in the electric conductivity and potassium leaching was observed as well as increase in the polyphenoloxidase activity.

Incidência de ocratoxina A em diferentes frações do café (Coffea arabica L.): bóia, mistura e varrição após secagem em terreiros de terra, asfalto e cimento / Incidence of ochratoxin A in fraction diferents coffee beans (Coffea Arabica L.): \"boia\", mixes and \"varrição\"

A incidência de ocratoxina A foi estudada em café mistura, bóia e varrição secas em três tipos de terreiro: terra, cimento e asfalto. Foram analisadas 238 amostras coletadas em 11 municípios da região sul do Estado de Minas Gerais, sendo 35 bóia, 97 - mistura e 106 varrição. Das amostras analisadas, em 40 por cento não foi detectada a presença de ocratoxina A, em 31 por cento, foram detectadas a presença de ocratoxina A em níveis que variaram de 0,1 a 5,0 æg/Kg de café. Estes resultados demonstram que 169 amostras (71 por cento) analisadas estariam dentro dos limites em estudo da Legislação Européia que regulamenta a concentração máxima de ocratoxina A em grãos de café torrado. As espécies de Aspergillus identificadas como produtoras de ocratoxina A foram Aspergillus ochraceus, A. sclerotiorum e A. sulphureus. Os níveis de contaminação de ocratoxina A em grãos de café foram maiores na fração varrição e nas frações bóia e mistura, secas em terreiro de terra. Os resultados deste estudo concluem que o terreiro de terra aumenta o risco de contaminação com ocratoxina A em grãos de café. A fração varrição devido aos riscos de exposição a ocratoxina A, deve ser reduzida através da adoção de boas práticas agrícolas e não ser utilizada para fins de consumo humano e animal.

The ochratoxin incidence was studied in coffee it mixes, it "bóia" and "varrição" dry in three yard types: earth, cement and asphalt. 238 samples were analyzed collected in 11 municipal districts of the south of Minas Gerais state, being 35 "bóia", 97 - it mixes and 106 varrição. Of the analyzed samples, in 40 percent the ochratoxin A presence it was not detected, in 74 samples, 31 percent, ochratoxin A presence were detected the in levels that varied from 0,1 to 5,0 æg/Kg of coffee beans. These results demonstrate that in 169 samples (71 percent) analyzed they would be inside of the limits in study of the European Legislation that regulates the maximum concentration of ochratoxin A in coffee beans toasted. The species of identified Aspergillus as producing of ochratoxin A were Aspergillus ochraceus, A. sclerotiorum and A. sulphureus. The ochratoxin A concentration levels in coffee beans was larger in the fraction varrição and in the fractions bóia and it mixes, droughts in earth yard. The results of this study conclude that the earth yard increases the risk of contamination with ochratoxin A in coffee beans. The fraction varrição due to the exhibition risks the ochratoxin A, it should be reduced through the adoption of good agricultural practices and not to be used for ends of human and animal consumption.

Inquérito sobre o consumo de alimentos possíveis de contaminação por micotoxinas na ingesta alimentar de escolares da cidade de Lavras, MG / Inquiry on the consumption of meals susceptible to contamination by mycotoxins in alimentary ingesta of scholars of the city of Lavras, MG

Com presente trabalho, objetivou-se investigar a alimentação de alunos em idade escolar, de quatro escolas da rede estadual e particular da cidade de Lavras,MG, supostamente contaminada com micotoxinas O universo amostral constou de escolares de 1ª e 2ª séries do ensino fundamental, totalizando 197 alunos. A avaliação do consumo alimentar dos escolares foi efetuada utilizando-se dois tipos de inquéritos dietéticos: o recordatório de 24 horas e o questionário de freqüência alimentar (QFA). De posse dos dados referentes do recordatório de 24 horas e o QFA, promoveu-se uma seleção entre os alimentos citados, caracterizando-os como alimentos com maior potencial de risco com relação à contaminação com micotoxinas. As análises descritivas da população de escolares indicaram uma população com boa distribuição amostral em função do sexo com 45,2 por cento (meninos) e 54,8 por cento (meninas). Não foi observada uma relação entre o grau de escolaridade das mães e o padrão alimentar dos escolares, uma vez que 60,9 por cento das mães apresentaram um nível de escolaridade correspondente ao 1° grau do ensino fundamental. Dos alimentos selecionados no grupo de risco de contaminação de micotoxinas, observou-se que 49,7 por cento das crianças entrevistadas apresentaram uma ingestão superior a 72,6 por cento do seu valor calórico total (VCT) obtido de alimentos desse grupo embora tenham sido observadas dissimilaridades entre as escolas com relação aos alimentos ingeridos. As análises do consumo energético individual apresentaram uma ingestão de alimentos de risco acima de 72,5 por cento, sendo 41,5 por cento representados na Escola A, 61 por cento na Escola B, 33,3 por cento na Escola C e 64,7 por cento na Escola D. Conclui-se, nesta pesquisa, que a população apresenta um perfil de alta ingestão de alimentos considerados de risco para micotoxinas, existindo a necessidade de adequação da dieta, visando reduzir a exposição a esse risco.

The present work was intended to investigate the feeding of students at school age from four state and private network schools of the town of Lavras, MG, supposedly contaminated with mycotoxins . The sample universe comprised elementary school 1st and 2nd grade students amounting to 197 students. The evaluation of the students' consumption was performed by utilizing two sorts of dietary inquires: the 24-hour recordatory and the feeding frequency questionnaire (FFQ). In possession of the data concerning the 24-hour recordatory and the FFQ, promoted a selection among the quoted foods, characterizing them as foods with greater potential of risk as regards the contamination with mycotoxins. The descriptive analyses of the population of students at school indicated a population with a good sample distribution as related with sex with 45.2 percent ( boys) and 54.8 percent (girls). No relationship between degree of education of the mothers and the feeding standard of the students correspondent to the 1st degree of elementary teaching. Out of the feeds selected in the group of mycotoxin contamination risk, it was found that 49.7 percent of the children interviewed presented a intake superior to 72.6 percent of its total caloric value (TCV) obtained from feeds of that group although they have been observed dissimilarities among the schools with relation to the feeds ingested. The analyses of the individual energy consumption presented a risk intake of foods above 72.5 percent, 41.5 percent being stood for at School A, 61 percent at School B, 33.3 percent at School C and 64.7 percent at School D. It follows, in this research, that the population presents a profile of high intake of foods considered of risk for mycotoxins, existing the need of adequacy of the diet, aiming to reduce the exposition to that risk.