RESUMO
O câncer gástrico constitui um sério problema de saúde pública. Diversos fatores de riscoparecem estar envolvidos na contribuição para o seu desenvolvimento, tais como: genes devirulência de H. pylori, SNPs em genes-chave no hospedeiro e eventos epigenéticos. Assim, oobjetivo desse estudo foi investigar a relação entre a metilação de genes em casos de câncergástrico, sua associação com genes de virulência de H. pylori, verificar a influência dos SNPsde CDH1 e MLH1 em seu status de metilação, bem como correlacionar a metilação dopromotor de miR-34b/c e a expressão da proteína MET nesses mesmos casos. A metilaçãodos genes foi obtida através da realização da técnica MS-PCR e HRM (para miR-34b/c). Osgenes de H. pylori foram detectados por PCR e os SNPs, por PCR-RFLP. Os genes de maior emenor frequência de metilação foram MSH2 e MLH1, respectivamente. O corte de idademostrou que pacientes com idade ≥ 50 anos tiveram CDH1 mais frequentemente metilado queaqueles mais jovens. O gene MLH1 foi significativamente menos metilado em tumores dacárdia. Quanto ao TNM, o gene CDH1-M foi associado à extensão tumoral avançada,inclusive quando subdividido por subtipo, já que mesma associação foi mostrada em tumoresdo subtipo intestinal. Já a combinação CDKN2A-M/MLH1-U foi associada à ausência demetástase à distância. Levando em consideração os genes de virulência de H. pylori, foi vistoque pacientes infectados por cepas vacAm1+ ou cagG+ tiveram uma maior frequência deCDKN2A-U, vacAs1+ foi associado com COX-2-U e CDH1-U, enquanto hopQII, comMLH1-U. Pacientes infectados por cepas cagE+ e virB11+ tiveram maior frequência deMSH2-M. Foi observado também que cepas menos virulentas apresentaram uma tendência ànão-metilação para os genes MLH1 e CDH1...
Gastric cancer is a serious health problem. Several risk factors have been identified tocontribute to its development, such as virulence genes of H. pylori, SNPs in hosts key genesand epigenetic events. The aim of this study was to investigate the relationship between genesmethylation in gastric cancer, its association with H. pylori virulence genes, and verify theinfluence of CDH1 and MLH1 SNPs in the methylation status and correlate methylation of thepromoter of miR-34b/c expression of MET protein in those cases. The promoter genesmethylation was assessed by MS-PCR and HRM (for miR-34b/c) techniques. H.pylori geneswere detected by PCR and SNPs, by PCR-RFLP. H.pylori genes were detected by PCR andSNPs, by PCR-RFLP. The genes of higher and lower methylation frequency were MSH2 andMLH1, respectively. Patients aged ≥ 50 had CDH1 more frequently methylated than thoseyounger. The MLH1 gene was significantly less methylated in cardia tumors. As for the TNM,the CDH1-M gene was associated with advanced tumor extension, even when subdivided bysubtype, since same association has been shown in tumors of intestinal subtype. Already thecombination CDKN2A-M/MLH1-U was associated with absence of distant metastases. Takinginto account the virulence genes of H. pylori, it was seen that patients infected vacAm1+ orcagG+ strains had a higher frequency of CDKN2A-U vacAs1 + was associated with COX-2-Uand CDH1-U, while hopQII with MLH1-U. Patients infected with cagE+ and virB11+ strainshad higher frequency of MSH2-M. It was also observed that less virulent strains tended tonon-methylation for CDH1 and MLH1 genes...