Optimization of transgenesis conditions for the generation of CXCL2-luciferase reporter mice line

Background: Transgenesis by microinjection has been widely used for the generation of different mouse models. Different variables of the procedure may critically affect the efficiency of the process. A DNA construction that carries the CXCL2 promoter gene and firefly luciferase has been used to optimize aspects of the procedure. Three different concentrations (0.5, 1.0 and 4.0 ng/µl) of the DNA construction to microinject a total of 1981 zygotes has been tested. Intact/injected embryos, pregnancy and birth rate, survival of pups 7 days after birth, number of transgenic pups and overall transgenic efficiency was registered and analyzed by Z test of proportions for each group. Results: A total of seven transgenic founders were detected for the three DNA concentrations used, 1 in 46 alive pups in the 0.5 ng/µl group, 5 in 38 alive pups in the 1 ng/µl group and 1 in 21 alive pups in the 4 ng/µl group ( p < 0.1). The overall transgenic efficiency was higher for the 1 ng/µl concentration, with a transgenic rate of 13.2%. Conclusions: In conclusion, we have selected the best operative conditions to maximize the transgenesis efficiency. Furthermore, the transgenic lines developed could be used as a reporter model of innate immunity activation with many different applications in the fields of immunology, cancer and neurodegenerative diseases.

Aplicación de dispositivos intravaginales impregnados con progesterona para la sincronización del estro y ovulación en yeguas pura sangre de carrera / Application of an intravaginal progesterone device for the oestrus and ovulation synchronization of thoroughbred mares

Se utilizaron distintos dispositivos intravaginales (DI) impregnadas con progesterona para determinar el tiempo entre de colocación del DI y el momento cuanto el folículo preovulatorio alcanzó más de 35 mm (FPO > 35mm) y desde este momento hasta la ovulación. Con 30 yeguas Pura Sangre de Carreras (PSC) se formaron dos grupos al azar: Grupo 1, n=15; DI con 1,38 g de progesterona y 25 mg i.m de benzoato de estradiol (BE), Grupo2, n= 15; DI con 1,0 g de progesterona y 25 mg i.m de BE. Se realizaron ecografías desde el 4to día de colocado el DI hasta FPO > 35mm, en ese momento se retiraron los DI y presentaron las yeguas para detectar estadísticamente el estro y monitorear la ovulación mediante ecografía. La presentación del estro fue analizada estadísticamente mediante el test de Fisher, el tiempo de colocado el DI hasta FPO > 35mm y la ovulación, mediante el test de Mann Whitney. La presentación del estro fue de 80 y 93,3%, en 12 yeguas ante el calentador (14). El promedio desde inserción de DI hasta FPO > 35mm y la ovulación fue 150 ± 20, 96 ± 34 h en G1 y 149 ± 19, 79 ± 24 h en G2. Se concluye que en yeguas PSC es posible retirar los DI al día 6-7 y que el contenido de progesterona en los DI no tuvo efecto sobre la presentación del estro, tiempo hasta FPO > 35mm y a la ovulación (P>0,05).