New approaches to studying morphological details of intramolluscan stages of Angiostrongylus vasorum / Novas abordagens para estudo morfológico dos estágios intramoluscos de Angiostrongylus vasorum

Abstract Angiostrongylus vasorum is a pulmonary artery parasite of domestic and wild canid. On molluscs, intermediate host, first stage larvae (L1) are found after the first day of infection, in the 8th L2 and in the 30 th L3. It was evaluated L1, L2 and L3 recovered by Baermann technique from Achatina fulica infected with 1000 L1. Fifty larvae/stage were incubated with antibodies anti-β-tubulin, anti-α-tubulin, anti- α-actin, anti-β-actin and anti-collagen, and then with Alexa 633. Fifty larvae/stage were observed with picrosirius red and Oil Red O. It was also observed in the anterior region of L1 the beginning of the chitinous stems development, in the initial portion of the intestine and genital primordium. In L2 anterior region, the papillae, chitinous canes juxtaposed to the mouth and intestines bigger than L1. The L3 musculature is well defined, next to the chitinous stems, there are two round distally arranged from each other. It was observed the whole extension of the intestine genital primordium and intense cellularity in the L3 distal portion. With the picrosirius red the L1, L2 and L3 musculature could be observed, as the nerve ganglia on L3. Oil Red O revealed that L1, L2 and L3 store energy on lipid droplets.

Resumo Angiostrongylus vasorum é um parasito de artérias pulmonares dos canídeos domésticos e silvestres. Nos moluscos, hospedeiros intermediários, encontram-se no primeiro dia após a infecção, larvas de primeiro estágio (L1), ao 8° L2 e ao 30° L3. Avaliou-se L1, L2 e L3 recuperadas pela técnica de Baermann de Achatina fulica infectada com 1.000 L1. Incubou-se 50 larvas/estádio com anticorpos anti-β-tubulina, anti-α-tubulina, anti-β-actina e anti-colágeno e, em seguida, com anticorpo Alexa 633. Observaram-se também 50 larvas/estádio com picrosirius red e Oil Red O, na região anterior da L1, o início do desenvolvimento de hastes quitinosas, a porção inicial do intestino e o primórdio genital. Na região anterior de L2, papilas, bastões quitinosos justapostos à boca e ao intestino maior que em L1. A musculatura de L3 é bem desenvolvida, próximo às hastes quitinosas, há duas estruturas redondas dispostas distalmente uma da outra. Observaram-se também toda a extensão do intestino, o primórdio genital e a intensa celularidade na porção distal da L3. Com o picrosirius red observou-se a musculatura de L1, L2 e L3, assim como, gânglios nervosos na L3. Oil Red O revelou que L1, L2 e L3 armazenam energia em gotículas lipídicas.

Nodular and sclerosing gastritis caused by Cylicospirura felineus in a puma (Puma concolor) / Gastrite nodular esclerosante causada por Cylicospirura felineus em onça parda (Puma concolor)

Abstract An adult male puma (Puma concolor), hit by a car in an urban area, died three days later despite the therapeutic support provided. At necropsy, multiple firm nodules were identified in the gastric mucosa. The nodules were coated by an intact mucosa with a central opening from which reddish and cylindrical nematodes protruded into the lumen. Twenty-seven nematodes were retrieved for morphological and morphometric evaluations. During histopathological examination of the gastric tissue, the adult nematodes appear in longitudinal and transverse sections, surrounded by thick bands of collagen, interspersed with mixed inflammatory infiltrates. The nematodes had an eosinophilic cuticle with caudal serrated projections (bulbar type), coelomyarian musculature, pseudocoelom, and females with uterus containing numerous larvated eggs, characteristics consistent with the Cylicospirura genus. Morphologically, female nematodes had six large tricuspid teeth in the oral cavity and the vulva had an opening anterior to the esophagus-intestinal junction. Male nematodes had five pairs of small papillae near the tip of the tail. These findings were consistent with Cylicospirura felineus. This parasite should be included in the differential diagnosis of nodular gastric wall lesions in wild felids.

Resumo Uma onça parda (Puma concolor) foi encontrada em uma área urbana após atropelamento e, apesar do suporte terapêutico fornecido, o animal morreu três dias depois. No exame post-mortem, múltiplos nódulos firmes foram identificados na mucosa gástrica. Os nódulos eram revestidos por mucosa intacta com um orifício central, do qual se insinuavam nematódeos cilíndricos e avermelhados. Vinte e sete nematódeos foram recuperados para avaliação morfológica e morfométrica. Na avaliação histopatológica do tecido gástrico, os nematódeos adultos apareceram em cortes longitudinais e transversais, circundados por bandas espessas de colágeno, intercaladas por infiltrado inflamatório misto. Os nematódeos eram constituídos por cutícula eosinofílica, com projeções serrilhadas voltadas caudalmente (do tipo bulbar), musculatura celomiariana, pseudoceloma e, nas fêmeas, útero com numerosos ovos larvados cujos achados foram sugestivos do gênero Cylicospirura. Morfologicamente, a cavidade bucal continha seis grandes dentes trífidos, na fêmea, a abertura da vulva era anterior à junção esôfago intestinal; e os machos tinham cinco pares de pequenas papilas próximas à ponta da cauda. Esses achados foram consistentes com Cylicospirura felineus. Este parasita deve ser incluído no diagnóstico diferencial de lesões nodulares da parede gástrica em felinos selvagens.