DETECTION OF Leishmania (Viannia) IN Nyssomyia neivai AND Nyssomyia whitmani BY MULTIPLEX POLYMERASE CHAIN REACTION, IN SOUTHERN BRAZIL / Detecção de Leishmania (Viannia) em Nyssomyia neivai e Nyssomyia whitmani por Multiplex Reação em Cadeia da Polimerase, no sul do Brasil

Sandflies transmit pathogens of leishmaniasis. The natural infection of sandflies by Leishmania (Viannia) was assessed in municipalities, in the state of Paraná, in Southern Brazil. Sandflies were collected with Falcão and Shannon traps. After dissection in search of flagellates in digestive tubes and identification of the species, female sandflies were submitted to the Multiplex Polymerase Chain Reaction (multiplex PCR) for detection of the fragment of the kDNA of Leishmania (Viannia) and the fragment from the IVS6 cacophony gene region of the phlebotomine insects. The analysis was performed in pools containing seven to 12 guts from females of the same species. A total of 510 female sandflies were analyzed, including nine Migonemyia migonei, 17 Pintomyia fischeri, 216 Nyssomyia neivai, and 268 Nyssomyia whitmani. Although none of the females was found naturally infected by flagellates through dissection, the fragment of DNA from Leishmania (Viannia) was shown by multiplex PCR in one sample of Ny. neivai (0.46%) and three samples of Ny. whitmani (1.12%). It was concluded that Ny. neivai and Ny. whitmani are susceptible to Leishmania infection, and that multiplex PCR can be used in epidemiological studies to detect the natural infection of the sandfly vector, because of its sensitivity, specificity and feasibility.

Flebotomíneos transmitem os patógenos das leishmanioses. Foi avaliada a infecção natural de flebotomíneos por Leishmania (Viannia) em municípios do Estado do Paraná, sul do Brasil. Os flebotomíneos foram coletados com armadilhas de Falcão e Shannon. Após dissecação para pesquisa de flagelados no tubo digestório e identificação das espécies, as fêmeas de flebotomíneos foram submetidas a Multiplex Reação em Cadeia da Polimerase (multiplex PCR) para a detecção do fragmento do kDNA de Leishmania (Viannia) e do fragmento do gene IVS6 da cacofonia de flebotomíneos. A análise foi realizada em pools contendo sete a 12 tubos digestórios de fêmeas da mesma espécie. Um total de 510 fêmeas foram analisadas, incluindo nove Migonemyia migonei, 17 Pintomyia fischeri, 216 Nyssomyia neivai e 268 Nyssomyia whitmani. Embora nenhuma fêmea tenha sido encontrada naturalmente infectada com flagelados pela dissecação, o fragmento de DNA de Leishmania (Viannia) foi mostrado por multiplex PCR em uma amostra de Ny. neivai (0,46%) e três amostras de Ny. whitmani (1,12%). Conclui-se que Ny. neivai e Ny. whitmani são suscetíveis à infecção por Leishmania, e que multiplex PCR, devido à sua sensibilidade, especificidade e viabilidade, pode ser utilizada em estudos epidemiológicos para a detecção da infecção natural do inseto vetor.

Luz e galinhas como fatores de atração de Nyssomyia whitmani em ambiente rural, Paraná, Brasil / Light and hens as attraction factors of Nyssomyia whitmani in a rural area, Southern Brazil

OBJETIVO: Verificar a influência de armadilhas com luz elétrica e galinhas como fatores de atração de flebotomíneos e comparar os resultados entre métodos de captura. MÉTODOS: O estudo foi realizado na Fazenda Palmital, município de Terra Boa, Paraná, Brasil. As coletas de flebotomíneos foram feitas com armadilhas de Falcão e aspirador elétrico, quinzenalmente, das 20 às 23 horas, na presença ou na ausência de luz e de galinhas, no ambiente peridomiciliar, de setembro de 1998 a junho de 1999. RESULTADOS: Coletaram-se 43.767 exemplares de oito espécies de flebotomíneos; Nyssomyia whitmani, N. neivai e Migonemyia migonei representando 99,9 por cento do total coletado, com predomínio de N. whitmani. O número de exemplares coletados na presença (21.045) foi maior do que na ausência de galinhas (10.434). Na presença de galinhas, indiferentemente das intensidades de luz, coletou-se maior número de exemplares de N. whitmani com luz de 3W. Na presença de galinhas e luz (3W) o número de N. whitmani coletado com aspirador elétrico (5.141) foi superior ao coletado com armadilha de Falcão (1.675). Na ausência de luz não houve diferença entre o número de N. whitmani coletado com o aspirador elétrico e na armadilha de Falcão, na presença ou na ausência de galinhas. CONCLUSÕES: As galinhas e a luz elétrica juntas atraem mais N. whitmani para o ambiente peridomiciliar. O número de N. whitmani coletado com o aspirador elétrico na presença de galinhas e luz no galinheiro foi maior do que o coletado na armadilha de Falcão, na mesma condição.

OBJECTIVE: To verify the influence of traps with electric light and hens as factors that attract sandflies and compare results between capture methods. METHODS: The study was conducted in the Palmital Farm, Southern Brazil. Sandfly collections were conducted with Falcão traps and an electric aspirator, fortnightly, between 8 p.m. and 11 p.m. in the presence or absence of light and hens in peridomiciliary areas, from September 1998 to June 1999. RESULTS: A total of 43,767 specimens from eight species of sandflies were collected: Nyssomyia whitmani, N. neivai and Migonemyia migonei constituting 99.9 percent of the total collected, with predominance of N. whitmani. The number of this species collected inside the hen's shed in the presence of hens (21,045) was greater than in their absence (10,434). In the presence of hens, with distinct intensities of light, a larger number of N. whitmani samples were collected with 3W light. In the presence of hens and light (3W), the number of N. whitmani collected with the electric aspirator (5,141) was superior to that collected with the Falcão trap (1,675). In the absence of light, with or without the presence hens, there was no difference between the numbers of N. whitmani collected with the electric aspirator or the Falcão trap. CONCLUSIONS: Hens and electric light together attract more N. whitmani to peridomicilary areas. The number of N. whitmani collected with an electric aspirator inside a hen's shed with the presence of hens and light is greater than those collected with a Falcão trap in the same conditions.

Reorganization and cleanness of peridomiciliar area to control sand flies (Diptera, Psychodidae, Phlebotominae) in South Brazil

O objetivo do presente trabalho foi avaliar o impacto da reorganização e limpeza do peridomicílio no controle de flebotomíneos vetores de Leishmania. Foram feitas coletas de insetos em abrigos de animais domésticos e em área peridomiciliar localizadas na Fazenda de Jussara, Município de Jussara, Estado de Paraná, Brasil onde leishmaniose tegumentar é endêmica. As coletas foram realizadas cinco noites por mês das 21:00 horas a 1:00 hora da manhã em 1996 e 1997. Os resultados foram comparados àqueles obtidos nos mesmos locais (ecótopo) em 1992 e 1994. Após as coletas de 1992 foram feitas limpezas do peridomicílio com a retirada de matéria orgânica e relocação dos animais domésticos. Em 1992 foram observados 10 espécies de flebotomíneos, em 1994 um total de sete e em 1996/97 foram identificadas 12 espécies. Lutzomyia (Nyssomyia) whitmani foi a espécie predominante em todas as coletas, tanto em 1992 quanto em 1997. A população total de flebotomíneos em 1992 era de 64.725. Após as medidas de reorganização e limpeza o número de insetos passou para 6.311 em 1994. Em 1996/97 como as condições ambientais retomavam os padrões do início do trabalho a população aumentou para 39.817. O presente trabalho demonstra que a reorganização e limpeza do peridomicílio em zonas endêmicas pode levar a um decréscimo na população de flebotomíneos e assim diminuir o risco de transmissão de Leishmania em áreas endêmicas. Estas medidas devem ser implementadas anualmente, principalmente no período a risco de transmissão (Janeiro a Maio).